人工老化水稻種子生理生化變化、DNA損傷及活力恢復的研究.pdf

1、本文以浙江省主栽品種浙優(yōu)12和Ⅱ優(yōu)7954為試驗材料，采用高溫高濕(43℃、100％RH)人工加速老化3、6、9天得到不同活力的水稻種子，模擬水稻種子劣變過程，對其生理生化和超微結(jié)構(gòu)變化和干種子DNA損傷進行ISSR標記分析并探索了水稻老化種子活力恢復的方法，從而為水稻種子貯藏和生產(chǎn)實踐上活力的保持提供實際參考和理論依據(jù)。取得了如下結(jié)果:
　　 1.隨著老化程度加深，Ⅱ優(yōu)7954和浙優(yōu)12種子的發(fā)芽勢、發(fā)芽率、發(fā)芽指數(shù)和活力指數(shù)

2、逐漸降低，平均發(fā)芽時間逐漸延長。老化6天后，種子的活力下降變快，且與未老化種子有顯著差異。除浙優(yōu)12種子的發(fā)芽率外，兩個品種老化6天后種子的發(fā)芽勢、發(fā)芽率、發(fā)芽指數(shù)、活力指數(shù)均顯著低于未老化種子，平均發(fā)芽時間則顯著增加。老化9天后種子的發(fā)芽指標最低。同時，隨老化程度加深，種子的呼吸作用減弱，具體表現(xiàn)為萌發(fā)啟動時間(IMT)和理論萌發(fā)時間(RGT)延長，萌發(fā)氧氣消耗速率(OMR)降低。老化后種子的電導率、浸出液核苷酸含量和MDA含量與種子

3、的活力呈顯著負相關(guān)，且隨老化程度加深而明顯增加，老化對細胞膜系統(tǒng)的損傷較大。隨種子老化時間延長，過氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)活性逐漸下降。此外，老化后水稻種子的超微結(jié)構(gòu)受損，主要表現(xiàn)為線粒體膨脹、膜破損及解體，脂肪體融合成大的脂肪團。
　　 2.Ⅱ優(yōu)7954的POD、浙優(yōu)12不同活力的種子萌發(fā)后幼苗POD、SOD、CAT、APX指標與對照比無顯著差異，表明老化種子長成的幼苗保護酶活性得到一

4、定程度的恢復;且不同品種之間存在一定的差異。隨著水稻種子老化時間延長，幼苗的整齊度降低，長勢不均勻，老化9天出現(xiàn)大量短小幼苗。
　　 3.采用CTAB法直接從人工老化水稻干種子中提取DNA,進行ISSR標記分析。引物UBC886擴增譜帶發(fā)現(xiàn)老化后Ⅱ優(yōu)7954和浙優(yōu)12與對照比在600-700bp條帶數(shù)減少，UBC811擴增譜帶發(fā)現(xiàn)老化9天的兩個品種擴增譜帶與對照比在350-400bp條帶明顯缺失。隨著種子老化程度加深，DNA條帶