白及組織培養(yǎng)及組培苗生長營養(yǎng)調(diào)控研究.pdf

1、白及（Bletillae Rhizoma）為蘭科多年生草本植物白及(Bletilla striata(Thunb.)Reichb.f)的干燥塊莖;具有補肺、止血、散風(fēng)除濕、通竅止痛、消腫排膿、生肌、斂瘡的功效，是我國傳統(tǒng)中藥材（《中國藥典》2010版）。白及種子較小，野生條件下在真菌共生時才可萌發(fā)，實生苗的栽培技術(shù)尚不成熟，而傳統(tǒng)無性繁殖技術(shù)效率低。近年來白及市場需求量劇增，供需矛盾突出，白及組培快繁體系的建立與完善工作亟需精進(jìn)。本試驗

2、以白及種子為外植體建立白及快繁體系，研究其成苗技術(shù)及移栽條件;并研究野生白及內(nèi)生真菌種群的異同，試圖模擬野生白及微生物環(huán)境，為提高白及移栽成活率建立基礎(chǔ)。主要內(nèi)容如下:
　　1.白及種子無菌萌發(fā)需光。1/2 MS適宜作為白及種子萌發(fā)基本培養(yǎng)基。NAA有利于白及種子萌發(fā)率，添加1.0 mg·L-1NAA及1.6 mg·L-16-BA對白及萌發(fā)促進(jìn)效果最明顯;椰汁替代培養(yǎng)基中的蔗糖可提高白及種子誘導(dǎo)形成原球莖，添加土豆泥白及萌發(fā)率未見

3、提高?？紤]在12h/12h光周期下，以1/2 MS+1.0 mg·L-1NAA+1.6 mg·L-16-BA為萌發(fā)培養(yǎng)基培養(yǎng)獲得組培苗，種子萌發(fā)率可達(dá)98％(50 d)，且組培苗生長健壯;以1/2 MS+20％椰汁為培養(yǎng)基獲得白及原球莖。
　　2.MS為基本培養(yǎng)基可促進(jìn)組培苗生長;添加10 mg·L-1黃腐酸，并以10％椰汁和5％香蕉汁替代其中的蔗糖可促進(jìn)白及壯苗;添加25 mg·L-1腐植酸對白及生根有利。各種培養(yǎng)基上白及培養(yǎng)時

4、間均不宜過長。土豆及酵母粉對白及生長的影響需進(jìn)一步研究確定。
　　3.研究NH4+-N和NO3--N對白及組培苗生長的影響，發(fā)現(xiàn)銨硝比為75∶25較適宜白及生長，白及組培苗在銨態(tài)氮含量多于硝態(tài)氮時生長較好;全銨態(tài)氮或全硝態(tài)氮均不利白及生長，銨硝比為50∶50時，白及葉片生理活性較高。
　　4.研究K+濃度對白及組培苗生長的影響，發(fā)現(xiàn)K+濃度為26.85 mmol·L-1時，白及植株生長良好，且葉片中總?cè)~綠素含量最高;在一定濃

5、度范圍內(nèi)，增施K+提高白及葉片SOD、POD活力及可溶性蛋白含量，減少了MDA的積累。為促進(jìn)白及組培苗生長，應(yīng)提高培養(yǎng)基中K+含量，較適宜濃度為26.85 mmol·L-1。
　　5.土豆提取液、椰汁及香蕉汁等有機(jī)添加物對白及生長均有一定促進(jìn)作用。不同的植物激素對白及生長具有不同的調(diào)控作用。NAA有助于促進(jìn)白及地上部分生長，同時添加6-BA對白及植株生長有利;2，4-D能成功誘導(dǎo)白及組培苗形成愈傷組織;1.0mg·L-1 KT對白

6、及葉片生長最為有利。
　　6.在一定濃度范圍內(nèi)，提高培養(yǎng)基中Ca2+含量有利于促進(jìn)白及組培苗生長，提高白及葉片生理活性。濃度為4.10 mmol·L-1時，白及生長良好，葉片葉綠素a、類胡蘿卜素及總?cè)~綠素含量到達(dá)最高;同時，白及葉片POD活力最高。當(dāng)Ca2+濃度為3.40mmol·L-1時，白及葉片SOD活力、可溶性蛋白含量最高，MDA積累最少。
　　7.白及苗生長階段對移栽成活率影響較大，株高太大或太小對成活不利，株高49