鐵皮石斛組培苗培養(yǎng)及叢生芽增殖體系的建立.pdf

1、本文針對(duì)鐵皮石斛組織培養(yǎng)過程中存在的，培育周期長、轉(zhuǎn)瓶次數(shù)多、操作繁瑣等問題，展開了以鐵皮石斛種子為外植體的組培苗培養(yǎng)以及莖段和組培苗為材料的叢生芽增殖的研究。通過單因素和正交實(shí)驗(yàn)，篩選出最佳培養(yǎng)基，研究基礎(chǔ)培養(yǎng)基、植物生長調(diào)節(jié)劑、天然附加物、時(shí)間等多種因素對(duì)組培苗的培養(yǎng)、腋芽誘導(dǎo)以及叢生芽增殖的影響，以達(dá)到減少組培苗和叢生芽的培養(yǎng)步驟、縮短生長時(shí)間和簡(jiǎn)化實(shí)驗(yàn)操作的目的。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:
　　以鐵皮石斛種子為外植體培養(yǎng)組培苗的研究發(fā)

2、現(xiàn):一步成苗法中鐵皮石斛種子萌發(fā)為幼苗的最佳成苗培養(yǎng)基為N6+6-BA0.1mg/L+NAA0.5mg/L+馬鈴薯100g/L+活性炭2g/L;最佳壯苗培養(yǎng)基為MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.5mg/L+香蕉汁100g/L+活性炭3g/L。而兩步成苗法的實(shí)驗(yàn)中1/2MS比MS更適合將鐵皮石斛種子培養(yǎng)為組培苗，其中原球莖的最佳萌發(fā)培養(yǎng)基為1/2MS+芋頭100g/L;最佳原球莖增殖分化培養(yǎng)基為1/2MS+馬鈴薯100g/L+香蕉1

3、00g/L+6-BA0.2mg/L;最佳壯苗生根培養(yǎng)基為1/2MS+馬鈴薯100g/L+香蕉100g/L+NAA0.5mg/L。這兩種方法育苗的步驟都比較簡(jiǎn)便、培養(yǎng)組培苗比較方便，且都具有可行性，生長的組培苗都顏色翠綠、生長健壯。
　　鐵皮石斛莖段為外植體的叢生芽增殖的實(shí)驗(yàn)分為兩個(gè)步驟，即腋芽誘導(dǎo)和叢生芽增殖。結(jié)果表明，馬鈴薯對(duì)鐵皮石斛莖段腋芽誘導(dǎo)的效果最佳，腋芽誘導(dǎo)最佳的培養(yǎng)基為:N6+6-BA1.0mg/L+NAA0.2mg/

4、L+馬鈴薯100g/L;香蕉對(duì)叢生芽增殖的影響效果最佳，最佳的叢生芽增殖培養(yǎng)基為:N6+TDZ0.05mg/L+6-BA1.0mg/L+NAA1.0mg/L+香蕉100g/L，且最佳增殖時(shí)間為60天。60天時(shí)的叢生芽生長狀況最好，能夠進(jìn)行壯苗和生根生長。
　　以鐵皮石斛組培苗為材料增殖叢生芽的研究發(fā)現(xiàn):香蕉對(duì)叢生芽增殖的影響效果最佳，最佳增殖培養(yǎng)基分別為:N6+TDZ0.05mg/L+6-BA1.0mg/L+NAA0.6mg/L+

5、香蕉100g/L，且最佳增殖時(shí)間與莖段增殖叢生芽的最佳增殖時(shí)間一致，都為60天。在相同實(shí)驗(yàn)條件下，莖段比組培苗增殖叢生芽的增殖系數(shù)大，叢生芽也生長的更壯;但組培苗比莖段增殖叢生芽少了誘導(dǎo)腋芽的步驟，減少了實(shí)驗(yàn)操作和叢生芽生長的時(shí)間;叢生芽生根培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)中莖段和組培苗增殖的叢生芽均能進(jìn)行正常的壯苗生根培養(yǎng)。本文對(duì)鐵皮石斛莖段和組培苗增殖叢生芽的生長條件和過程進(jìn)一步優(yōu)化，達(dá)到了提高叢生芽增殖系數(shù)、縮短叢生芽生長時(shí)間的實(shí)驗(yàn)?zāi)康?，且文中的叢生?/p>