鐵皮石斛離體培養(yǎng)誘導開花的研究.pdf

1、鐵皮石斛因具有很好的藥用價值且難于自然繁殖，隨著大量的采掘己使得野生鐵皮石斛資源瀕臨滅絕。應用植物組織培養(yǎng)技術，對鐵皮石斛離體培養(yǎng)進行種質保存和快速繁殖具有非常重要的意義。特別是通過離體培養(yǎng)研究有關開花機理，具有著重要的現(xiàn)實意義和應用價值。本實驗利用植物組織培養(yǎng)技術，通過各種激素及其配比組合處理廣西鐵皮石斛無根試管苗，誘導其生根和開花，研究影響鐵皮石斛試管開花的調控因子。本論文探討了MS、Miller、White三種不同基本培養(yǎng)基和三種

2、不同添加物對石斛繼代增殖的影響，激素IBA、NAA、ABT及其組合對鐵皮石斛生根誘導的影響，以及6-BA、NAA、KT、PP333、TDZ等激素和預處理條件對石斛組培苗花芽分化和花朵開放率的影響。本實驗還采用了石蠟切片的方法，在細胞水平上對鐵皮石斛花芽分化的過程進行了形態(tài)學觀察，研究鐵皮石斛試管苗花芽發(fā)生、發(fā)育的進程。研究結果表明：
　　 1．在三種基本培養(yǎng)基對鐵皮石斛試管苗芽增殖影響的比較試驗中，以MS基本培養(yǎng)基對鐵皮石斛芽的

3、增殖效果最好，芽增殖倍數(shù)為3.5倍，且增殖芽的素質最好，芽粗壯、葉色濃綠。
　　 2．在不同添加物對鐵皮石斛芽增殖影響的比較試驗中，以添加CPPU0.5mg/L的處理增殖效果最佳，芽增殖的倍數(shù)達到5.79倍，但是芽的素質一般。添加KT0.5mg/L的處理芽增殖的倍數(shù)達到4.58倍，芽的素質一般。添加有椰汁的處理增殖芽的素質較佳，表現(xiàn)為芽粗、健壯、葉色濃綠，其芽增殖的倍數(shù)達到4.17倍。
　　 3．在不同激素對鐵皮石斛生根

4、誘導效果的影響的比較試驗中，以培養(yǎng)基1/2MS+IBA4.0mg/L+PP3330.5mg/L對鐵皮石斛芽生根誘導的效果最好，生根率可達到100％，平均生根數(shù)為7.44條，平均根長為1.73cm。
　　 4．在單因子激素對鐵皮石斛組培苗花芽誘導的效果的比較試驗中，以培養(yǎng)基MS+TDZ0.06mg/L對鐵皮石斛組培苗花芽誘導的效果最好，其花芽形成率可達到15.5％，而花開放率可達到90.2％，平均每個具花株的花苞數(shù)為2.1朵。

5、r>　　 5．在雙因子激素對鐵皮石斛組培苗花芽誘導的效果的比較試驗中，以培養(yǎng)基MS+PP3330.3mg/L+TDZ0.06mg/L對鐵皮石斛芽開花誘導的效果最好，其花芽形成率可達到25.2％，而花開放率可達到70.2％，平均每個具花株的花苞數(shù)為3.7朵。
　　 6．在多因子激素對鐵皮石斛組培苗花芽誘導的效果的比較試驗中，以培養(yǎng)基MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.5mg/L+PP3330.3mg/L+TDZ0.06mg/

6、L對鐵皮石斛芽開花誘導的效果最好，其花芽形成率可達到80.4％，而花開放率可達到93.3％，平均每個具花株的花苞數(shù)為12.3朵。
　　 7．在激素預培養(yǎng)實驗中，以由培養(yǎng)基MS+TDZ0.06mg/L+PP3330.5mg/L預培養(yǎng)40天再轉入誘導開花培養(yǎng)基MS+KT1.0mg/L+ NAA0.5mg/L+PP3330.5mg/L的處理對石斛試管花控效果最好，其花芽形成率可達到78.0％，而花開放率可達到97.8％，平均每個具花株

7、的花苞數(shù)為7.89朵。
　　 8．在培養(yǎng)基中不同含糖量對鐵皮石斛組培苗花芽誘導的效果的比較試驗中，以培養(yǎng)基含糖量為50g/L時對鐵皮石斛芽開花誘導的效果最好，其花芽形成率可達到87.8％，而花開放率可達到96.8％，平均每個具花株的花苞數(shù)為13.7朵。
　　 9．在鐵皮石斛組培苗是否有根對鐵皮石斛試管開花影響的比較試驗中，無根的組培苗花芽誘導的效果要明顯好于有根的組培苗。
　　 10.在利用石蠟切片對鐵皮石斛花芽