多花水仙離體培養(yǎng)及多倍體誘導(dǎo)技術(shù)研究.pdf

1、多花水仙為石蒜科水仙屬多年生球根類花卉，其球莖大，花朵多，開花期長(zhǎng)，花香清雅，是具有較高觀賞價(jià)值和經(jīng)濟(jì)價(jià)值的一類花卉。由于多花水仙商品球繁殖率低，顏色單一，品種少，故改良水仙品種一直都是科學(xué)研究者們的研究重點(diǎn)。離體快速繁殖技術(shù)可以在極短的時(shí)間內(nèi)生產(chǎn)大量?jī)?yōu)質(zhì)種苗，還可以用于人工種子的生產(chǎn)、原原種保存等工作，同時(shí)經(jīng)過染色體加倍的植株具有外形健壯，鱗片肥厚，高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)等優(yōu)點(diǎn)。因此，多花水仙的離體快繁和多倍體誘導(dǎo)的研究具有十分重要的理論和實(shí)際意義

2、。本研究以漳州水仙和黃花水仙為試驗(yàn)材料，系統(tǒng)的研究了不同處理對(duì)鱗莖不同部位愈傷組織形成及分化的影響，從而篩選出最適漳州水仙和黃花水仙生長(zhǎng)的培養(yǎng)基，為漳州水仙和黃花水仙的快速繁殖提供了技術(shù)指導(dǎo)，也為多花水仙的遺傳轉(zhuǎn)化等研究工作奠定了基礎(chǔ)；同時(shí)本試驗(yàn)利用秋水仙素直接液體浸泡法和固體培養(yǎng)法來對(duì)漳州水仙和黃花水仙進(jìn)行多倍體誘導(dǎo)，比較了不同濃度秋水仙素和不同時(shí)間組合對(duì)漳州水仙和黃花水仙的誘變效果，試圖探索出誘導(dǎo)多倍體的技術(shù)和方法，為培育具有更高觀

3、賞價(jià)值和經(jīng)濟(jì)價(jià)值的水仙新品種奠定基礎(chǔ)。本研究主要獲得以下研究成果：
　　1.用不同部位的水仙帶盤鱗片為外植體，以小球莖誘導(dǎo)率和小球莖的質(zhì)量為主要因素來篩選最佳培養(yǎng)基。漳州水仙外層鱗莖最佳誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS+0.2mg/L6-BA+0.5mg/L2,4-D+0.1mg/L KT，漳州水仙中層鱗莖最佳誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS+0.5mg/L2,4-D+0.1mg/L KT，黃花水仙外層鱗莖最佳誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS+0.5mg/L6-BA+1.0mg

4、/L2,4-D+0.1mg/L KT，黃花水仙中層鱗莖最佳誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS+0.5mg/L6-BA+0.5mg/L2,4-D+0.1mg/L KT。
　　2.本試驗(yàn)通過對(duì)水仙的外層鱗莖和中層鱗莖進(jìn)行比較發(fā)現(xiàn)，漳州水仙和黃花水仙外層的效果均不佳，容易褐化，影響了愈傷組織及小球莖的誘導(dǎo)。與外層鱗片相比，選擇漳州水仙和黃花水仙中層鱗莖作為外植體誘導(dǎo)效果較好。
　　3.在組織培養(yǎng)的基礎(chǔ)上，利用秋水仙素的直接液體浸泡法和固體培養(yǎng)法，比

5、較不同秋水仙素濃度和不同時(shí)間組合對(duì)漳州水仙和黃花水仙的誘變效果。研究結(jié)果表明，兩種方法均能誘導(dǎo)出多倍體植株，但直接液體浸泡法比固體培養(yǎng)法的誘導(dǎo)率要高，死亡率也較高。
　　4.通過用不同的預(yù)處理方法對(duì)黃花水仙根尖進(jìn)行處理可以發(fā)現(xiàn)，秋水仙素、8-羥基喹啉、對(duì)二氯苯對(duì)中期染色體均有一定的凝縮作用，能達(dá)到較好的效果，而冰水對(duì)染色體的凝縮效果和分散效果均不佳；用0.2％秋水仙素處理8h的染色體形態(tài)較好，分散度適中，縊痕區(qū)比較清晰；用0.00

6、2 mol/L的8-羥基喹啉處理8h的染色體形態(tài)最好，分散度最好，縊痕區(qū)很清晰；用飽和對(duì)二氯苯溶液處理8h的染色體分散程度好，但凝縮效果不是很好，染色體較長(zhǎng)，主縊痕和次縊痕不清晰。所以本試驗(yàn)前處理采用0.002 mol/L的8-羥基喹啉液浸泡8 h。
　　5.經(jīng)秋水仙素誘導(dǎo)的植株與對(duì)照組植株比較發(fā)現(xiàn)，變異植株鱗莖變大，氣孔也顯著變大，單位面積內(nèi)氣孔個(gè)數(shù)明顯減少，對(duì)變異植株進(jìn)行染色體鑒定發(fā)現(xiàn)，漳州水仙中并未發(fā)現(xiàn)六倍體植株，黃花水仙中