鐵皮石斛組培快繁技術(shù)的優(yōu)化.pdf

1、鐵皮石斛（Dendrobium candidum Kimura et Migo）又名黑節(jié)草、鐵皮蘭，為蘭科石斛屬多年生附生型草本植物。其藥用價值獨特，是石斛屬中的極品。目前通過組織培養(yǎng)技術(shù)已成功獲組培苗，但是組培快繁過程中仍存在許多問題:組培苗易黃化、易產(chǎn)生變異、移栽成活率不高等。本研究以鐵皮石斛的成熟果實和莖段為材料，采用正交試驗設(shè)計，對其組培快繁技術(shù)進(jìn)行優(yōu)化，以期為鐵皮石斛的組織培養(yǎng)和規(guī)?；a(chǎn)提供理論參考和技術(shù)支持。主要研究結(jié)果如

2、下:
　　(1)種胚萌發(fā)最適培養(yǎng)基:MS或1/2MS+6-BA1.0mg/L+NAA1.0mg/L+椰汁100ml/L+活性炭1.0g/L+白糖25g/L+瓊脂4.6g/L，植物生長調(diào)節(jié)劑與天然有機物椰汁的添加能縮短鐵皮石斛種胚的萌動時間。
　　(2)外值體最優(yōu)滅菌方法:經(jīng)預(yù)處理的鐵皮石斛莖段在流動的自來水下沖洗30min，用75％酒精浸泡30s，再用10％ NaClO8min+0.1％ HgCl25min+0.2％HgCl

3、22min綜合滅菌，經(jīng)該組合處理的外植體在培養(yǎng)30d后仍未發(fā)現(xiàn)有污染。
　　(3)腋芽誘導(dǎo)最優(yōu)培養(yǎng)基:MS+NAA0.5mg/L+6-BA1.0mg/L+白糖25g/L+瓊脂4.6g/L，莖段誘導(dǎo)率達(dá)85％。
　　(4)叢生芽誘導(dǎo)最優(yōu)培養(yǎng)基:MS+NAA0.5mg/L+6-BA1.0mg/L+KT2.0mg/L+白糖25g/L+瓊脂4.6g/L，此培養(yǎng)基誘導(dǎo)的叢生芽數(shù)量最多，葉色濃綠、植株健壯，且新芽的變異率居中。
　

4、　(5)增殖最優(yōu)培養(yǎng)基:1/2MS+NAA1.0mg/L+6-BA0.2mg/L+KT0.2mg/L+活性炭0.5g/L+5％土豆汁+白糖25g/L+瓊脂4.6g/L，增殖系數(shù)達(dá)8.3，原球莖生長緊湊、綠色、且無變異和褐化現(xiàn)象。
　　(6)分化最優(yōu)培養(yǎng)基:N6+6-BA0.5mg/L+KT1.0mg/L+土豆汁100g/L+活性炭0.5g/L+白糖25g/L+瓊脂4.6g/L，分化率達(dá)87.7％，不定芽數(shù)量多、健壯度和整齊度均勻、

5、葉綠。
　　(7)壯苗最優(yōu)培養(yǎng)基:N6+6-BA0.5mg/L+NAA1.0 mg/L+香蕉汁150g/L+活性炭0.5g/L+白糖25g/L+瓊脂4.6g/L，試驗研究結(jié)果表明:處理8中的4個評價指標(biāo)（新芽增長數(shù)量、單株鮮重、株高及莖粗）綜合評分結(jié)果最好，達(dá)34.796。
　　(8)生根最優(yōu)培養(yǎng)基:MS+NAA2.0mg/L+活性炭1.0g/L+香蕉汁150g/L+白糖25g/L+瓊脂4.6g/L，苗生長健壯，根多且粗，平