葡萄組培脫毒快繁技術(shù)研究.pdf

1、本論文以金星無(wú)核、維多利亞、藤稔等三個(gè)葡萄品種的新梢單芽莖段為材料，探討了不同外植體消毒時(shí)間、不同外植體大小、不同培養(yǎng)基對(duì)葡萄組培快繁的影響。試驗(yàn)結(jié)果如下： 將三種不同消毒時(shí)間處理的金星無(wú)核外植體接種到啟動(dòng)培養(yǎng)基中培養(yǎng)，20天后統(tǒng)計(jì)全部污染率、褐變率和成活率。試驗(yàn)結(jié)果表明，當(dāng)外植體用0.1％升汞消毒5min時(shí)，污染率最高68％，褐變率最低13％；當(dāng)外植體用0.1％升汞消毒8min時(shí)，污染率和褐變率適中，成活率最高54％；當(dāng)外植體

2、用0.1％升汞消毒11min時(shí)，污染率最低2％，褐變率最高86％。金星無(wú)核外植體適宜的消毒時(shí)間為8min。 將三種不同大小的金星無(wú)核外植體接種到啟動(dòng)培養(yǎng)基中培養(yǎng)，30天后統(tǒng)計(jì)莖段萌芽率及觀察芽的生長(zhǎng)情況。試驗(yàn)結(jié)果表明，0.2～0.5cm外植體總體萌芽較慢，芽的生長(zhǎng)也較慢，愈傷組織較少；0.5～1.0cm外植體萌芽較快，芽的生長(zhǎng)也較快，植株健壯，愈傷組織較多；1.0～2.0cm外植體愈傷組織較少，萌芽較快，但生長(zhǎng)較細(xì)弱，三種不同大

3、小外植體的萌芽率分別為62％、67％和61％。金星無(wú)核葡萄組培適宜的外植大小為0.5～1.0cm。 以金星無(wú)核外植體為材料，以1/2MS為基本培養(yǎng)基，探討不同6—BA濃度對(duì)葡萄啟動(dòng)培養(yǎng)的影響。試驗(yàn)結(jié)果表明，當(dāng)6—BA濃度為0.5mg/L時(shí)，金星無(wú)核的萌芽率為36％，增殖系數(shù)為0.4；當(dāng)6—BA濃度為1.0mg/L時(shí)，金星無(wú)核的萌芽率為59％，增殖系數(shù)為1.4；當(dāng)6—BA濃度為2.0mg/L時(shí)，金星無(wú)核的萌芽率為62％，增殖系數(shù)為

4、1.5。金星無(wú)核葡萄組培適宜的啟動(dòng)培養(yǎng)基為1/2MS+6—BA1.0mg/L+IBA0.05mg/L。 以金星無(wú)核無(wú)菌苗為材料進(jìn)行生根培養(yǎng)，選用1/2MS為基本培養(yǎng)基，探討不同激素配比對(duì)葡萄組培苗生根的影響。試驗(yàn)結(jié)果表明，金星無(wú)核葡萄適宜的生根培養(yǎng)基為1/2MS+IBA0.5mg/L。 以金星無(wú)核、維多利亞、藤稔等三個(gè)不同葡萄品種的外植體為材料，以1/2MS+6—BA1.0mg/L+IBA0.05mg/L為啟動(dòng)培養(yǎng)基，對(duì)

5、比不同葡萄品種的組培效果。試驗(yàn)結(jié)果表明，金星無(wú)核、維多利亞、藤稔的萌芽率分別為59％、50％、18％，增殖系數(shù)分別為1.3、1.1、0.3。藤稔的萌芽率與另外兩個(gè)品種的萌芽率存在顯著差異，金星無(wú)核、維多利亞兩個(gè)葡萄品種比藤稔更適宜采用組培方法進(jìn)行繁殖。 將金星無(wú)核、維多利亞、藤稔啟動(dòng)培養(yǎng)中產(chǎn)生的愈傷組織轉(zhuǎn)入分化培養(yǎng)基MS(改)+6—BA0.5mg/L+NAA0.1m/L中，探討不同葡萄品種愈傷組織分化率與增殖系數(shù)。試驗(yàn)結(jié)果表明，

6、維多利亞愈傷組織分化率最高73％，金星無(wú)核愈傷組織分化率較高70％，分化出的苗質(zhì)量最好，藤稔愈傷組織分化率最低23％，增殖最慢。 維多利亞在繼代培養(yǎng)過(guò)程中出現(xiàn)一些畸形黃化癥狀，其原因可能與6—BA濃度過(guò)高或外植體本身帶毒有關(guān)。在葡萄愈傷組織誘導(dǎo)分化試驗(yàn)中，有極少數(shù)愈傷組織會(huì)分化出細(xì)長(zhǎng)的根而不形成苗，其原因有待進(jìn)一步研究。 本論文對(duì)三個(gè)優(yōu)良鮮食葡萄新品種進(jìn)行了組培脫毒快繁技術(shù)研究，該技術(shù)對(duì)葡萄無(wú)病毒苗木繁育體系建設(shè)及促進(jìn)葡