四倍體連翹組培快繁技術(shù)研究.pdf_第1頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

1、本試驗(yàn)以四倍體連翹(tetraploid Forsythia)當(dāng)年生幼嫩枝條、葉片為試驗(yàn)材料,建立了四倍體連翹的組織培養(yǎng)體系。分別對(duì)外植體的消毒處理、初代培養(yǎng)、繼代培養(yǎng)、生根培養(yǎng)和馴化移栽幾方面進(jìn)行試驗(yàn),對(duì)影響四倍體連翹組織培養(yǎng)的因素進(jìn)行了比較系統(tǒng)地研究,從有利于工廠化育苗的目的出發(fā),試圖為四倍體連翹生物技術(shù)育種提供技術(shù)和方法,同時(shí)為其進(jìn)一步遺傳操作研究和擴(kuò)大藥材資源奠定基礎(chǔ)。主要研究?jī)?nèi)容及結(jié)果如下:
  (1)外植體消毒

2、  以四倍體連翹莖尖、莖段和幼嫩葉片為外植體,進(jìn)行消毒處理試驗(yàn)。選擇75%酒精以及2%次氯酸鈉配合使用進(jìn)行滅菌處理。試驗(yàn)結(jié)果表明:2%次氯酸鈉的處理時(shí)間長(zhǎng)短對(duì)四倍體連翹外植體的消毒效果起到關(guān)鍵作用,需要嚴(yán)格控制。四倍體連翹莖尖、莖段外植體的最佳處理方式是75%酒精處理30s,2%次氯酸鈉處理7 min。四倍體連翹葉片外植體的最佳處理方式是75%酒精處理30s,2%次氯酸鈉處理3 min。
  (2)植物離體培養(yǎng)
  以四倍體

3、連翹莖尖以及帶腋芽的莖段為外植體,探討不同植物激素6-BA、NAA的不同濃度配比對(duì)組培苗離體培養(yǎng)的影響。試驗(yàn)結(jié)果表明:四倍體連翹的組織培養(yǎng)宜選擇莖段為外植體。適宜四倍體連翹腋芽誘導(dǎo)的培養(yǎng)基為MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L。適宜四倍體連翹莖尖、莖段增殖培養(yǎng)的培養(yǎng)基為MS+6-BA9.0mg/L+NAA0.05mg/L。
  (3)愈傷組織培養(yǎng)
  以四倍體連翹幼嫩葉片為外植體,探討不同植物激素6-BA、2,

4、4-D、NAA的不同濃度配比對(duì)葉片愈傷組織誘導(dǎo)以及增殖培養(yǎng)的影響。試驗(yàn)結(jié)果表明:有利于四倍體連翹葉片愈傷組織誘導(dǎo)的培養(yǎng)基為MS+6-BA1.0mg/L+2,4-D1.0mg/L。經(jīng)觀察發(fā)現(xiàn),在添加各種不同激素及不同配比的培養(yǎng)基上,葉片愈傷組織生長(zhǎng)緩慢,顏色為黃綠色或深綠色,均未產(chǎn)生類(lèi)似不定芽的小突起,繼續(xù)培養(yǎng)一段時(shí)間后愈傷組織基本褐化死亡。
  (4)組培苗生根培養(yǎng)
  以通過(guò)增殖培養(yǎng)誘導(dǎo)出的叢生芽單芽為培養(yǎng)材料,進(jìn)行生根培

5、養(yǎng),探討不同植物激素IBA、IAA的不同濃度配比對(duì)組培苗生根培養(yǎng)的影響。試驗(yàn)結(jié)果表明:在試驗(yàn)范圍內(nèi),適宜誘導(dǎo)四倍體連翹生根的培養(yǎng)基為1/2MS+IBA0.4mg/L+IAA0.4mg/L,此時(shí)組培苗生根狀況較好。
  (5)組培苗的馴化移栽
  將已經(jīng)生根的組培苗進(jìn)行馴化移栽,研究不同煉苗時(shí)間以及不同基質(zhì)對(duì)四倍體連翹組培苗移栽成活率的影響。試驗(yàn)結(jié)果表明:煉苗處理與不煉苗處理對(duì)組培苗的移栽成活率方面存在顯著性差異,經(jīng)過(guò)煉苗處理

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