牡丹組培快繁技術(shù)的研究.pdf

1、牡丹觀賞價(jià)值高的品種，雄蕊、雌蕊大都高度瓣化，導(dǎo)致種子發(fā)育不全或無結(jié)實(shí)力，而傳統(tǒng)分株、嫁接繁殖方法，繁殖系數(shù)低且周期長(zhǎng)。采用組培技術(shù)可在短時(shí)間內(nèi)獲得大量試管苗，既為牡丹新品種培育和定向改良提供遺傳轉(zhuǎn)化再生體系，又為牡丹種苗商品化提供技術(shù)支持和理論依據(jù)。
　　本研究以黃色系牡丹中的中晚期品種金閣和海黃為研究對(duì)象，以主莖基部鱗芽為外植體，研究了不同取材時(shí)期對(duì)牡丹試管苗生長(zhǎng)的影響，篩選出了外植體最佳取材時(shí)期；探討了不同種類和濃度的生長(zhǎng)調(diào)

2、節(jié)物質(zhì)對(duì)牡丹試管苗增殖及生根的影響，并得出了最適宜其增殖和生根的激素配比；分析了在增殖培養(yǎng)過程中AgNO3對(duì)其增殖和褐化的影響，測(cè)定了引起褐化的相關(guān)生理生化指標(biāo)。主要研究結(jié)果如下：
　?。?）以金閣和海黃的鱗芽為外植體，從2013年10月到2014年4月，每月20日取樣。將鱗芽接種在MS培養(yǎng)基附加0.6 mg/L6-BA和0.2 mg/L NAA中培養(yǎng)，觀察取材時(shí)間對(duì)牡丹金閣和海黃組培污染率和褐化率以及苗體生長(zhǎng)的影響。結(jié)果表明：從

3、10月份到翌年4月份均可用牡丹鱗芽進(jìn)行組培快繁，以3-4月的外植體生長(zhǎng)最好，冬前10到11月的牡丹鱗芽需要進(jìn)行適當(dāng)?shù)牡蜏嘏c黑暗誘導(dǎo)，以便解除牡丹鱗芽的休眠狀態(tài)。每年3-4月份是牡丹組織培養(yǎng)的鱗芽外植體最佳取材時(shí)期。
　?。?）對(duì)比金閣和海黃增殖培養(yǎng)的單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)結(jié)果可以看出，單獨(dú)使用一種激素對(duì)牡丹的增殖有一定作用，激素復(fù)配可使兩個(gè)品種的增殖系數(shù)均大于單獨(dú)使用。牡丹金閣最佳增殖培養(yǎng)基組合為MS+6-BA0.6 mg/L+ N

4、AA0.2 mg/L+ KT0.9 mg/L+ TDZ0.06 mg/L，牡丹海黃最佳增殖培養(yǎng)基組合為：MS+6-BA0.9 mg/L+NAA0.3 mg/L+KT0.9 mg/L+TDZ0.04 mg/L。其對(duì)金閣增殖影響 TDZ＞KT＞6-BA＞NAA，而對(duì)海黃增殖影響6-BA＞KT＞TDZ＞NAA。
　?。?）培養(yǎng)基附加不同濃度 AgNO3，顯著抑制金閣和海黃試管苗的褐變。在增殖培養(yǎng)基中附加1 mg/L和2-3 mg/L的

5、AgNO3能有效抑制金閣和海黃試管苗的褐變，也抑制了其增殖。隨著 AgNO3濃度的增加，金閣和海黃試管苗褐化度呈現(xiàn)先下降后升高趨勢(shì)且與SOD、POD和CAT活性呈顯著負(fù)相關(guān)關(guān)系，與試管苗 MDA含量、乙烯釋放速率、PPO活性、O2·-產(chǎn)生速率和多酚含量呈顯著正相關(guān)關(guān)系。但將在不同 AgNO3濃度處理20 d后的金閣和海黃試管苗轉(zhuǎn)接到不含 AgNO3的最適增殖培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)，不僅能有效抑制試管苗的褐化還能促進(jìn)其增殖，其中1 mg/L A