曼地亞紅豆杉組培快繁技術(shù)的研究.pdf

1、曼地亞紅豆杉是一種集經(jīng)濟(jì)價(jià)值與觀賞價(jià)值為一體的珍貴樹(shù)種，更由于其含有抗癌活性的紫杉醇而備受關(guān)注，但是該屬植物生長(zhǎng)十分緩慢，自然更新困難，因此，紅豆杉屬植物的資源保護(hù)和再生問(wèn)題受到了人們的重視，而建立和完善曼地亞紅豆杉組培快繁技術(shù)是解決資源短缺等問(wèn)題的重要途徑。
　　 本實(shí)驗(yàn)以曼地亞紅豆杉幼嫩莖段為外植體，研究外植體最佳滅菌方法、腋芽誘導(dǎo)最佳培養(yǎng)基配方、褐變影響因子以及叢生芽繼代增殖最佳培養(yǎng)基配方，數(shù)據(jù)采用SAS軟件分析，意圖通過(guò)

2、上述試驗(yàn)，全面研究曼地亞紅豆杉組培快繁各階段的主要影響因素和最佳培養(yǎng)基配方，篩選出最優(yōu)技術(shù)參數(shù)組合，逐步完善紅豆杉植株的離體培養(yǎng)技術(shù)體系，早日實(shí)現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)，保護(hù)該樹(shù)種的現(xiàn)有資源。
　　 通過(guò)實(shí)驗(yàn)研究取得了以下結(jié)果：
　　 1．曼地亞紅豆杉外植體——幼嫩莖段最佳的滅菌方法是：曼地亞紅豆杉莖段→洗衣粉上清液浸泡20 min后再用軟刷刷去表面污垢→流水沖洗30 min→超凈臺(tái)上用70％酒精浸泡20 s→無(wú)菌水沖洗2次→0.3

3、％升汞浸6 min→無(wú)菌水沖洗8次→無(wú)菌濾紙吸干水分→切成約1.5 cm的小莖段→接種，成活率達(dá)83.3％。
　　 2．曼地亞紅豆杉腋芽誘導(dǎo)的最適宜培養(yǎng)基是MS+6-BA1.0 mg·L－1+NAA0.4mg·L－1+AC0.59·L－1+食糖30 g·L－1+瓊脂8 g·L－1，pH5.8-6.0。
　　 3．在空白培養(yǎng)基（不添加任何激素的MS基本培養(yǎng)基）中連續(xù)培養(yǎng)兩周能有效降低褐變率，但污染率也隨之增加，所以不做任何

4、預(yù)處理更適合曼地亞紅豆杉的下一步組培實(shí)驗(yàn)?；钚蕴繚舛葘?duì)曼地亞紅豆杉外植體的褐變有極顯著影響，添加0.4 g·L－1的活性炭對(duì)抑制外植體褐變的效果最佳，但隨著活性炭濃度的繼續(xù)增加效果反而降低。PVP抑制外植體褐變的最佳濃度為100 mg·L－1，VC抑制外植體褐變的最佳濃度為0.3 g·L－1，轉(zhuǎn)接周期過(guò)短并不能有效減輕褐變的發(fā)生，25天為繼代轉(zhuǎn)接的最佳周期。
　　 4．影響曼地亞紅豆杉叢生芽繼代增殖倍數(shù)和芽長(zhǎng)的主要因素是6-BA