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文檔簡介
1、曼地亞紅豆杉是一種集經(jīng)濟(jì)價值與觀賞價值為一體的珍貴樹種,更由于其含有抗癌活性的紫杉醇而備受關(guān)注,但是該屬植物生長十分緩慢,自然更新困難,因此,紅豆杉屬植物的資源保護(hù)和再生問題受到了人們的重視,而建立和完善曼地亞紅豆杉組培快繁技術(shù)是解決資源短缺等問題的重要途徑。
本實驗以曼地亞紅豆杉幼嫩莖段為外植體,研究外植體最佳滅菌方法、腋芽誘導(dǎo)最佳培養(yǎng)基配方、褐變影響因子以及叢生芽繼代增殖最佳培養(yǎng)基配方,數(shù)據(jù)采用SAS軟件分析,意圖通過
2、上述試驗,全面研究曼地亞紅豆杉組培快繁各階段的主要影響因素和最佳培養(yǎng)基配方,篩選出最優(yōu)技術(shù)參數(shù)組合,逐步完善紅豆杉植株的離體培養(yǎng)技術(shù)體系,早日實現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn),保護(hù)該樹種的現(xiàn)有資源。
通過實驗研究取得了以下結(jié)果:
1.曼地亞紅豆杉外植體——幼嫩莖段最佳的滅菌方法是:曼地亞紅豆杉莖段→洗衣粉上清液浸泡20 min后再用軟刷刷去表面污垢→流水沖洗30 min→超凈臺上用70%酒精浸泡20 s→無菌水沖洗2次→0.3
3、%升汞浸6 min→無菌水沖洗8次→無菌濾紙吸干水分→切成約1.5 cm的小莖段→接種,成活率達(dá)83.3%。
2.曼地亞紅豆杉腋芽誘導(dǎo)的最適宜培養(yǎng)基是MS+6-BA1.0 mg·L-1+NAA0.4mg·L-1+AC0.59·L-1+食糖30 g·L-1+瓊脂8 g·L-1,pH5.8-6.0。
3.在空白培養(yǎng)基(不添加任何激素的MS基本培養(yǎng)基)中連續(xù)培養(yǎng)兩周能有效降低褐變率,但污染率也隨之增加,所以不做任何
4、預(yù)處理更適合曼地亞紅豆杉的下一步組培實驗?;钚蕴繚舛葘β貋喖t豆杉外植體的褐變有極顯著影響,添加0.4 g·L-1的活性炭對抑制外植體褐變的效果最佳,但隨著活性炭濃度的繼續(xù)增加效果反而降低。PVP抑制外植體褐變的最佳濃度為100 mg·L-1,VC抑制外植體褐變的最佳濃度為0.3 g·L-1,轉(zhuǎn)接周期過短并不能有效減輕褐變的發(fā)生,25天為繼代轉(zhuǎn)接的最佳周期。
4.影響曼地亞紅豆杉叢生芽繼代增殖倍數(shù)和芽長的主要因素是6-BA
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