高山杜鵑‘粉冠博士’組培快繁技術(shù)研究.pdf

1、高山杜鵑(Rhododendron hybrids)，杜鵑花科杜鵑花屬，常綠灌木類(lèi)高檔觀賞植物;主要靠扦插繁殖，而扦插繁殖受母株材料和繁殖季節(jié)的影響，往往無(wú)法滿足市場(chǎng)的需要;用組織培養(yǎng)技術(shù)進(jìn)行觀賞植物的繁殖，具有繁殖速度快，不受季節(jié)影響等特點(diǎn)，對(duì)于優(yōu)良品種的引進(jìn)和推廣意義重大[1]。本研究以高山杜鵑‘粉冠博士'品種為研究材料，對(duì)外植體植入、初代培養(yǎng)、繼代增殖、高山杜鵑無(wú)菌苗莖段和無(wú)菌苗葉片愈傷組織的誘導(dǎo)、分化、壯苗、煉苗移栽以及試管苗褐

2、化、玻璃化預(yù)防等進(jìn)行研究，以期歸納出一整套高山杜鵑‘粉冠博士'組培快繁技術(shù)體系。主要研究結(jié)果如下:
　　 (1)高山杜鵑‘粉冠博士'外植體的取材季節(jié)對(duì)其存活率有著較大的影響，花苞外植體培養(yǎng)的最佳采取時(shí)期為12月份，用酒精處理30s后，再用0.1％的升汞消毒60s時(shí)，效果最佳，成活率最高，為74.4％，污染率較低，為11.1％;莖段外植體培養(yǎng)的最佳采取時(shí)期為3月下旬到4月上旬，用酒精處理30s后，再用0.1％的升汞消毒9min時(shí)，

3、效果最佳，成活率最高，為64.4％，污染率較低，為17.7％。
　　 (2)不同的細(xì)胞分裂素對(duì)花苞的啟動(dòng)率和生長(zhǎng)量有一定的影響。不同種類(lèi)的細(xì)胞分裂素對(duì)高山杜鵑‘粉冠博士'花苞誘導(dǎo)作用大小依次為:KT＞2-ip＞6-BA＞TDZ。在添加KT的培養(yǎng)基上，花苞的啟動(dòng)率和生長(zhǎng)量均達(dá)到最大值，分別為74.5％和1.6cm。KT是高山杜鵑‘粉冠博士'花苞啟動(dòng)培養(yǎng)的最適細(xì)胞分裂素。
　　 (3)啟動(dòng)培養(yǎng):培養(yǎng)基Anderson+KT1

4、2.0 mg·L-1+IAA1.0 mg·L-1最適宜于高山杜鵑‘粉冠博士'花苞外植體的啟動(dòng)培養(yǎng)，60 d時(shí)芽誘導(dǎo)率達(dá)到75.0％;培養(yǎng)基WPM+2-ip8.0 mg·L-1+IAA1.0 mg·L-1最適宜于高山杜鵑‘粉冠博士'莖段外植體的啟動(dòng)培養(yǎng)，60 d時(shí)芽誘導(dǎo)率達(dá)到64.4％。
　　 (4)叢芽增殖培養(yǎng):最適宜繼代增殖的培養(yǎng)基為Anderson+ KT3.0 mg·L-1+ IAA1.0 mg·L-1，增殖系數(shù)可達(dá)6.1

5、1。
　　 (5)無(wú)菌苗莖段培養(yǎng)和愈傷組織的誘導(dǎo)及分化培養(yǎng):無(wú)菌苗莖段培養(yǎng)和愈傷組織誘導(dǎo)的最適宜培養(yǎng)基為WPM+2-ip8.0 mg·L-1+ IAA1.0 mg·L-1，40d時(shí)啟動(dòng)率最高，達(dá)到80.00％，平均再生芽數(shù)5.33;最適宜莖段愈傷組織分化的培養(yǎng)基為WPM+2-ip3.0mg·L-1+ IAA1.0 mg·L-1，再生頻率達(dá)到72.22％，平均出芽數(shù)4.11。
　　 (6)無(wú)菌苗葉片愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng):同一葉

6、片的不同部位再生愈傷組織的能力不相同。葉片不同部位愈傷組織的再生能力依次為:葉尖＞葉基＞葉中;葉片接種方式選擇正面向上的接種方式進(jìn)行誘導(dǎo);葉片愈傷組織誘導(dǎo)的最適培養(yǎng)基為Anderson+6-BA2.0 mg·L-1+2,4-D0.5 mg·L-1。
　　 (7)葉片的直接分化培養(yǎng):無(wú)菌苗葉片直接分化培養(yǎng)的最適宜培養(yǎng)基為WPM+2-ip8.0 mg·L-1+ IAA1.0 mg·L-1，再生頻率最高達(dá)70.00％。
　　

7、(8)壯苗培養(yǎng):在不附加任何生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的Anderson壯苗培養(yǎng)基上長(zhǎng)勢(shì)最好，葉色濃綠，葉面積增大，莖變粗，有部分處理產(chǎn)生了不定根。
　　 (9)生根培養(yǎng):最適宜高山杜鵑‘粉冠博士'生根的培養(yǎng)基為1/2 Anderson+IAA4.0 mg·L-1+AC3.0 mg·L-1，生根率最高達(dá)96.7％。
　　 (10)煉苗移栽:最有利于高山杜鵑‘粉冠博士'組培苗移栽存活的基質(zhì)類(lèi)型為進(jìn)口草炭和珍珠巖3∶1的混合物，成活率達(dá)86