鐵皮石斛高效快繁技術(shù)體系研究.pdf

1、鐵皮石斛(Dendrobium officinale)是蘭科(Orchidaceae)石斛屬Dendrobium多年生草本植物，別名黃草，也叫黑節(jié)草，為我國(guó)特有的寶貴中草藥。鐵皮石斛含有石斛多糖、氨基酸、生物堿、微量元素等營(yíng)養(yǎng)成分，具有很高的應(yīng)用價(jià)值。但鐵皮石斛常附生在懸崖峭壁上，且種子中無(wú)胚乳，天然條件下很難萌發(fā)，所以野生鐵皮石斛資源正在銳減。為了保護(hù)和利用這一名貴中藥，采用植物組織培養(yǎng)這一現(xiàn)代科技技術(shù)進(jìn)行快速繁殖正在成為這一領(lǐng)域研究

2、熱點(diǎn)。
　　本文主要以鐵皮石斛實(shí)生種子和莖段為外植體，研究了鐵皮石斛原球莖誘導(dǎo)、增殖、分化、生根壯苗等組織培養(yǎng)的條件，分別建立了以原球莖和莖段為外植體的高效快繁體系。主要研究結(jié)果如下：
　　1.以鐵皮石斛實(shí)生種子為外植體，直接誘導(dǎo)原球莖，通過(guò)添加不同的添加劑，得出鐵皮石斛種子萌發(fā)誘導(dǎo)原球莖最佳培養(yǎng)基：1/2MS+白糖25g/L+NAA1.0mg/L+蛋白胨2.0g/L+瓊脂7.0g/L+活性炭1.0g/L。在此培養(yǎng)基上，鐵皮

3、石斛實(shí)生種子經(jīng)過(guò)45天的誘導(dǎo)后，長(zhǎng)成了顏色碧綠、球狀飽滿的原球莖。
　　添加不同濃度的植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑，以及通過(guò)不同濃度的植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑組合來(lái)使鐵皮石斛原球莖增殖。經(jīng)過(guò)實(shí)驗(yàn)得出鐵皮石斛原球莖增殖的最適培養(yǎng)基為：1/2MS+白糖25g/L+1.0mg/L6-BA+0.5mg/L NAA+瓊脂7.0g/L+活性炭1.0g/L。最高增殖系數(shù)達(dá)23。
　　對(duì)增殖后的鐵皮石斛原球莖進(jìn)行分化培養(yǎng)，添加不同濃度的植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑組合后，發(fā)現(xiàn)鐵

4、皮石斛原球莖最佳分化培養(yǎng)基為：1/2MS+白糖25g/L+2.0mg/L6-BA+0.2mg/LNAA+瓊脂7.0g/L+活性炭1.0g/L。平均分化率最高達(dá)95％。
　　對(duì)鐵皮石斛分化后得到的叢生芽進(jìn)行誘導(dǎo)生根。經(jīng)過(guò)實(shí)驗(yàn)得出鐵皮石斛叢生芽最佳生根培養(yǎng)基為：1/2MS+白糖25g/L+0.3mg/L N AA+100g/L馬鈴薯泥+瓊脂7.0g/L+活性炭1.0g/L，生根率達(dá)100%。
　　2.用一年生鐵皮石斛的帶節(jié)莖段誘

5、導(dǎo)腋芽是鐵皮石斛快速繁殖的另一種方法，試驗(yàn)中添加不同濃度的6-BA、NAA、TDZ等植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑，得出鐵皮石斛帶節(jié)莖段誘導(dǎo)腋芽的最佳培養(yǎng)基為：1/2MS+白糖20g/L+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L+瓊脂7.0g/L+活性炭1g/L。
　　鐵皮石斛莖段誘導(dǎo)出的腋芽進(jìn)行生根壯苗誘導(dǎo)，添加不同的添加劑可以促進(jìn)鐵皮石斛幼苗的生長(zhǎng)。經(jīng)過(guò)實(shí)驗(yàn)得出鐵皮石斛腋芽最佳壯苗培養(yǎng)基為：1/2MS+白糖25g/L+0.3mg/L NA