大葉性肺炎患兒血清和支氣管肺泡灌洗液中TNF-α、IL-6、IL-8、IL-10、HMGB1的水平變化及意義.pdf

1、大葉性肺炎是一種常見的兒童下呼吸道感染性疾病,是常見的社區(qū)獲得性肺炎（community-acquired pneumonia,CAP)之一。據(jù)世界衛(wèi)生組織（World Health Organization,WHO)統(tǒng)計,CAP是全世界5歲以下兒童死亡的第一位原因,約占兒童死亡人數(shù)的19％[1]。近年來大葉性肺炎發(fā)病率明顯增高,且病情遷延不愈,給臨床治療帶來困難。其致病菌主要由細菌、病毒、支原體等引起,主要臨床表現(xiàn)為高熱、咳嗽,甚至呼

2、吸困難,并可導致多系統(tǒng)的肺外并發(fā)癥。盡管新的強有力的抗生素不斷出現(xiàn),但其發(fā)病率和死亡率并未明顯下降[1-3]。
　　到目前為止,兒童大葉性肺炎發(fā)病機制還不十分清楚,免疫學機制已受到廣大學者的關注,而在這一過程中,細胞因子起著重要作用[4,5]。一方面機體產生促炎因子,如:早期促炎因子─腫瘤壞死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白細胞介素-6(Interleukins-6,IL-6)、白細胞介素

3、-8(Interleukins-8,IL-8)、高遷移率族蛋白B1(High mobility group protein B1,HMGB1)等,促進炎癥反應,引起組織損傷;另一方面機體通過釋放抑炎因子,如:白細胞介素-4(Interleukins-4,IL-4)、白細胞介素-10(Interleukins-10,IL-10)等,抑制炎癥反應,使炎癥局限化。若促炎與抑炎反應平衡,則肺內環(huán)境穩(wěn)定,一旦失去平衡,則機體出現(xiàn)代償性抗炎癥反應綜

4、合征(Compensatory anti-inflammatory response syndrome,CARS)或全身炎癥反應綜合征(Systemic inflammatory response syndrome,SIRS)。然而,關于細胞因子在兒童大葉性肺炎發(fā)病中的作用研究報道較少,其作用機制尚不明確。因此,本課題通過研究細胞因子在兒童大葉性肺炎血清、支氣管肺泡灌洗液(Bronchoalveolar lavage fluid,BAL

5、F)中的變化及其相關性,探討不同細胞因子在兒童大葉性肺炎疾病進展過程的變化特征,評價支氣管肺泡灌洗術在兒童大葉性肺炎治療中的作用,為進一步理解細胞因子在兒童大葉性肺炎發(fā)病中作用機制提供理論依據(jù),同時為病情判斷、療效評價提供新的實驗室指標。
　　實驗目的：
　　1.觀察不同程度大葉性肺炎患兒血清中TNF-α、IL-6、IL-8、IL-10和HMGB1水平的變化,探討細胞因子與大葉性肺炎嚴重程度的關系,為理解大葉性肺炎發(fā)病機制提

6、供理論依據(jù)。
　　2.動態(tài)觀察大葉性肺炎患兒血清和BALF中 TNF-α、IL-6、IL-8、IL-10和HMGB1水平隨病程的變化,分析局部和系統(tǒng)中細胞因子的水平與大葉性肺炎病情發(fā)展及預后的關系,為疾病進展、病情判斷和療效評價提供參考依據(jù)。
　　3.通過比較灌洗組和非灌洗組患兒的臨床癥狀和體征、住院日、住院費用、并發(fā)癥等指標,評價支氣管肺泡灌洗術在兒童大葉性肺炎治療中的作用及安全性。
　　實驗方法:
　　本研究

7、以唐都醫(yī)院兒科2012年10月-2014年1月期間收住的大葉性肺炎患兒76例,均符合《諸福棠實用兒科學》中大葉性肺炎診斷標準。診斷標準為:①有發(fā)熱、咳嗽、氣急等臨床表現(xiàn);②體檢肺部呼吸音增粗,可聞及濕性啰音,局部呼吸音減低或消失,叩診病灶部位濁音或者為實音;③胸部X線或胸部CT提示:一個肺段以至一葉肺甚至一側全肺顯示大片狀致密實變影。患兒納入標準:①符合上述大葉性肺炎的診斷標準,入院前病程均小于1周且未曾正規(guī)使用過靜脈抗生素;②未診斷呼

8、吸系統(tǒng)其他疾病如肺結核、支氣管哮喘等;③近2個月無發(fā)熱、關節(jié)痛等癥狀;④未診斷免疫系統(tǒng)疾病,未服用糖皮質激素、免疫球蛋白、干擾素等;⑤家長同意患兒參加本研究。排除標準:不符合上述納入標準的患兒。入選患兒在入院當天按臨床肺部感染評分(Clinical Pulmonary Infection Score,CPIS)標準進行評分,將CPIS評分>6分的患兒歸為重度組(CPIS高分組)41例,CPIS評分≤6分的患兒為輕度組(CPIS低分組)3

9、5例;入選患兒根據(jù)是否同意行支氣管肺泡灌洗術,分為灌洗組46例和非灌洗組30例。將入選灌洗CPIS高分組患兒經10天綜合治療后分為兩組,好轉組18例,惡化組7例。通過雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附分析法(enzyme-linked-immunosorbent serologic assay,ELISA),檢測入選患兒血清和(或) BALF中TNF-α、IL-6、IL-8、IL-10、HMGB1濃度。
　　實驗結果:
　　1.重度組、

10、輕度組患兒血清中TNF-α、IL-6、IL-8、IL-10和HMGB1水平明顯高于健康對照組,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05);重度組患兒血清中TNF-α、IL-6、IL-8、IL-10和HMGB1水平明顯高于輕度組,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。血清中TNF-α、IL-6、IL-8水平與HMGB1水平呈中度正相關關系(P<0.05),相關系數(shù)分別為0.444,0.365和0.466;IL-10水平與 HMGB1水平呈中度負相關

11、關系(P<0.05),相關系數(shù)為-0.485。
　　2.灌洗組與非灌洗組患兒血清中TNF-α、IL-6、IL-8、IL-10和HMGB1水平隨病程延長均呈下降趨勢,且灌洗組患兒血清中各細胞因子水平隨著病程延長下降速度更快。兩組間TNF-α、IL-6、IL-8、IL-10和HMGB1水平隨時間變化的差異均具有統(tǒng)計學意義(P均<0.05)。BALF中TNF-α、IL-6、IL-8、IL-10和HMGB1水平較血清中明顯升高,差異均具有

12、統(tǒng)計學意義(P均<0.05)。血清中TNF-α、IL-6、IL-8、IL-10、HMGB1水平分別與BALF中水平呈正相關關系(P均<0.05),相關系數(shù)分別為0.905、0.805、0.900、0.908、0.921。在 CPIS高分組、CPIS低分組 BALF中TNF-α、IL-6、IL-8、IL-10、HMGB1水平較血清中明顯增高,差異均具有統(tǒng)計學意義(P<0.05);血清或BALF組內比較,CPIS高分組中TNF-α、IL-6

13、、IL-8、IL-10、HMGB1水平明顯高于 CPIS低分組,差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。灌洗 CPIS高分組患兒血清、BALF中TNF-α、IL-8、IL-10水平在惡化組明顯高于好轉組,差異均有統(tǒng)計學意義﹙P<0.05﹚;患兒在好轉組血清、BALF中IL-6水平隨病程延長高于惡化組,差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05﹚;患兒在好轉組和惡化組血清、BALF中HMGB1水平均隨病程延長呈下升趨勢,兩組間差異無統(tǒng)計學意義﹙P>0.0

14、5﹚。
　　3.灌洗組患兒體溫恢復時間、肺部羅音消失時間、住院時間均低于非灌洗組,兩組差異均具有統(tǒng)計學意義(P<0.05),住院費用較非灌洗組降低,差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),胸部CT恢復時間在兩組間差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)46例灌洗組中8例術中出現(xiàn)出血(17.39%);10例術后再次出現(xiàn)發(fā)熱(21.73%);46例(100%)術后出現(xiàn)一過性咳嗽;1例術中出現(xiàn)紫紺(2.17%)。未出現(xiàn)肺出血、氣胸、呼吸心跳驟停、麻醉

15、意外等情況。
　　結論:
　　1.早期炎性因子TNF-α、IL-6、IL-8、IL-10及晚期炎性因子HMGB1均參與兒童大葉性肺炎的發(fā)病過程。HMGB1作為晚期炎性因子,可為大葉性肺炎病情判斷提供新的參考指標。
　　2.血清和BALF中TNF-α、IL-6、IL-8、IL-10和HMGB1水平與大葉性肺炎病情嚴重程度密切相關,TNF-α、IL-6、IL-8、IL-10和HMGB1水平越高,肺炎病情越嚴重,BALF中各