佛手寧神方對失眠模型大鼠行為學(xué)及腦內(nèi)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)含量和5-HT1AR表達(dá)的影響.pdf

1、目的:
　　探討佛手寧神方的改善睡眠作用及其作用機(jī)制，為佛手寧神方在功能性食品、藥品等相關(guān)領(lǐng)域的應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法:
　　1.雄性昆明小鼠隨機(jī)分成5組，分別為空白組，艾司唑侖組(0.4mg·kg-1·d-1)，佛手寧神方低、中、高劑量組(12，24，48g·kg-1·d-1)，連續(xù)給藥1周。末次給藥后腹腔注射閾上或閾下劑量戊巴比妥鈉，記錄各組小鼠睡眠潛伏期、睡眠持續(xù)時間及入睡只數(shù)。
　　2.雄性SD大鼠

2、隨機(jī)分成6組，分別為空白組，模型組，艾司唑侖組(0.2mg·kg-1·d-1)，佛手寧神方低、中、高劑量組(6，12，24g·kg-1·d-1)，每組8只;采用腹腔注射PCPA350mg·kg-1·d-1制作失眠大鼠模型;造模完成后第1天開始灌胃給藥，連續(xù)1周。觀察大鼠精神狀態(tài)及體重變化;曠場實(shí)驗(yàn)檢測各組大鼠站立次數(shù)、糞便粒數(shù)和運(yùn)動總路程;酶聯(lián)免疫吸附法測定大鼠腦內(nèi)5-HT、DA和NE的含量;實(shí)時熒光定量PCR檢測各組大鼠海馬5-HT1

3、AR mRNA的表達(dá)水平;Westem blot和免疫組化法檢測各組大鼠海馬5-HT1AR蛋白的表達(dá)水平。
　　結(jié)果:
　　1.與空白組相比，佛手寧神方高劑量組和艾司唑侖組能提高閾下劑量戊巴比妥鈉致小鼠入睡率(P＜0.05，P＜0.01)，縮短閡上劑量戊巴比妥鈉致小鼠睡眠潛伏期(P＜0.01)，延長閾上劑量戊巴比妥鈉致小鼠睡眠持續(xù)時間(P＜0.01)。
　　2.模型組體重增長較空白組緩慢(P＜0.01);佛手寧神方中、

4、高劑量組體重增長較模型組快(P＜0.05)。曠場實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，模型組大鼠運(yùn)動總路程較空白組增加(P＜0.05)，站立次數(shù)和糞便粒數(shù)增加不明顯，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。艾司唑侖組和佛手寧神方中、高劑量組大鼠運(yùn)動總路程較模型組減少(P＜0.05，P＜0.01)。佛手寧神方高劑量組大鼠站立次數(shù)和糞便粒數(shù)減少不明顯，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。
　　3.與空白組相比，模型組海馬5-HT含量下降(P＜0.01)，下丘腦NE和

5、DA含量上升(P＜0.01);艾司唑侖組和佛手寧神方高劑量組海馬5-HT含量較模型組增加(P＜0.05);佛手寧神方高劑量組下丘腦NE和DA含量較模型組減少(P＜0.05)。
　　4.免疫組化結(jié)果顯示與空白組相比，模型組5-HT1AR蛋白在海馬CA1區(qū)表達(dá)顏色淺(P＜0.01);艾司唑侖組和佛手寧神方中、高劑量組5-HT1AR蛋白表達(dá)顏色較模型組深(P＜0.01)。Western blot結(jié)果顯示，模型組海馬5-HT1AR蛋白表達(dá)

6、較空白組降低（P＜0.01），艾司唑侖組和佛手寧神方中、高劑量組海馬5-HT1AR蛋白表達(dá)較模型組上升(P＜0.05)。
　　5.實(shí)時熒光定量PCR結(jié)果顯示，模型組海馬5-HT1A R mRNA表達(dá)較空白組降低(P＜0.01);艾司唑侖組和佛手寧神方中、高劑量組海馬5-HT1AR mRNA表達(dá)較模型組上升(P＜0.05)。
　　結(jié)論:
　　佛手寧神方具有改善睡眠的作用，其機(jī)制可能與調(diào)節(jié)腦內(nèi)5-HT、NE和DA含量的平衡