綠豆枯萎病病原菌小種鑒定及抗源篩選.pdf

1、綠豆是我國的主要食用豆類作物之一。由尖鐮孢菌引起的綠豆枯萎病是一種為害性極大的土傳病害，嚴重制約著綠豆的生產(chǎn)。本文以綠豆枯萎病為研究對象，獲得了以下結果:
　　1、建立了綠豆枯萎病抗性評價方法。對影響苗期抗病性鑒定結果的因素進行優(yōu)化，結果表明，苗期抗病性鑒定最有效的接種方法為剪根浸根法，最適宜接種體濃度為106孢子/mL，接種最佳植株生育期為2葉期，接種體浸根最短時間為2min，最適宜發(fā)病溫度為25～30℃，接種后調查病情最短時間

2、為14d。該方法能準確有效評價綠豆對枯萎病的抗性水平，適用于對綠豆枯萎病的抗源篩選以及品種的抗性鑒定。
　　2、發(fā)現(xiàn)綠豆枯萎病菌存在致病性分化，建立了一套鑒別寄主。首先在苗期用分離物F08對105個綠豆品種進行抗性鑒定，從中選擇8個抗病品種和3個感病品種與25個分離物進行互作研究，發(fā)現(xiàn)3個感病品種對25個分離物均表現(xiàn)為感病，8個抗病品種分別抗7～20分離物，對25個分離物共產(chǎn)生6個抗性反應型。結果表明，尖鐮孢枯萎病菌和綠豆的互作符

3、合“基因對基因”關系。最終，根據(jù)遺傳背景不同選擇6個品種作為綠豆枯萎病菌鑒別寄主。
　　3、發(fā)現(xiàn)了12個綠豆尖鐮孢枯萎病菌小種。用6個鑒別寄主對84個不同來源的分離物進行小種鑒定。結果表明，84個分離物被鑒定為12個小種。其中，3號小種出現(xiàn)頻率最高為227％，分布于吉林、內(nèi)蒙古、陜西、山西和河南綠豆產(chǎn)區(qū)，為我國綠豆枯萎病菌的優(yōu)勢小種。5號和11號小種致病性最強，毒力型分別為RSSSSS和SSRSSS，0號小種致病性最弱，對6個鑒別

4、寄主均無致病性;另外，除5號小種僅分布在吉林外，其它小種均分布于不同省份（自治區(qū)），表明綠豆枯萎病菌小種的分布與地理來源無關。
　　4、比較分析了分離物效應子SIX6和SIX11基因序列及其特異性，初步探究了效應子基因與綠豆枯萎病菌致病性的關系。結果表明，在綠豆枯萎病菌所有分離物中均檢測到SLX6和SIX11基因，而在無致病性分離物中沒有檢測到目的條帶，表明SIX6和SIX11基因可能與綠豆枯萎病菌的致病性相關。序列分析表明，SI