低濃度一氧化碳對(duì)視神經(jīng)不完全損傷保護(hù)作用的研究.pdf

1、視網(wǎng)膜作為中樞神經(jīng)系統(tǒng)的延伸，損傷后常不可逆轉(zhuǎn)。多種眼科疾病如青光眼、糖尿病性視網(wǎng)膜病變、老年性黃斑變性等都會(huì)對(duì)視網(wǎng)膜產(chǎn)生進(jìn)行性的神經(jīng)性損傷，造成視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞和軸突退行性病變，最終導(dǎo)致視功能喪失。低濃度一氧化碳（CO）氣體是指濃度低于中毒劑量的CO混合氣，已在多種疾病模型中證實(shí)了其強(qiáng)大的抗炎、抗增殖、抗凋亡、減少排斥免疫反應(yīng)以及神經(jīng)保護(hù)效應(yīng)。由于CO氣體濃度較低，安全性可控，若機(jī)體吸入后對(duì)神經(jīng)損傷確有保護(hù)效益，應(yīng)用前景將十分可觀。

2、r>　　目的：
　　研究低濃度CO吸入在大鼠視神經(jīng)不完全損傷模型中對(duì)視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞（RGC）的保護(hù)作用。
　　方法：
　　運(yùn)用視神經(jīng)鉗夾（ONC）法制作大鼠視神經(jīng)不完全損傷模型。模型隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組（ONC+CO組）和損傷組（ONC組），實(shí)驗(yàn)組在造模成功后立即給予低濃度CO（250 ppm）吸入1小時(shí)，損傷組不予以處理。另設(shè)假手術(shù)組（Control組）作為陰性對(duì)照。建模2周后采用閃光視覺誘發(fā)電位和瞳孔對(duì)光反射來評(píng)價(jià)動(dòng)物

3、模型的視功能改變。通過蘇木精伊紅（HE）染色和熒光金示蹤標(biāo)記RGC密度來觀察視網(wǎng)膜的形態(tài)學(xué)變化。用TUNEL染色法標(biāo)記凋亡細(xì)胞，分光光度法檢測(cè)視網(wǎng)膜組織caspase-3酶活性，以探究凋亡途徑在CO保護(hù)視神經(jīng)損傷中的作用。
　　結(jié)果：
　　損傷組相較于假手術(shù)組，可見明顯的視功能降低和RGC丟失。低濃度CO處理能顯著改善受損的視功能，實(shí)驗(yàn)組閃光視覺誘發(fā)電位P波振幅和潛伏期分別為395.83±172.52μV和148.04±20

4、.73 ms，相對(duì)于損傷組（振幅162.33±70.47μV，p<0.05；潛伏期211.22±19.56 ms，p<0.001）有顯著改善；瞳孔對(duì)光反射檢測(cè)中實(shí)驗(yàn)組比損傷組更靈敏。HE染色結(jié)果顯示，ONC可致視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層中細(xì)胞存活率顯著下降至48.2%，但經(jīng)低濃度CO處理后的細(xì)胞存活率為65.3%，即CO治療顯著改善了ONC誘導(dǎo)的RGC存活率下降（p<0.001，實(shí)驗(yàn)組 vs損傷組）；熒光金標(biāo)記RGCs結(jié)果顯示，實(shí)驗(yàn)組和損傷組視

5、網(wǎng)膜鋪片熒光標(biāo)記細(xì)胞平均密度分別為每平方毫米2247.33±232.30個(gè)和1448.44±290.91個(gè)（p<0.05，實(shí)驗(yàn)組 vs損傷組）。此外，低濃度CO處理明顯減少視神經(jīng)損傷后視網(wǎng)膜節(jié)細(xì)胞層中 TUNEL染色陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)以及視網(wǎng)膜組織中的caspase-3酶活性。
　　結(jié)論：
　　低濃度CO吸入處理能顯著改善視神經(jīng)損傷后的視功能紊亂和RGC丟失率，即低濃度CO治療在視神經(jīng)不完全損傷中發(fā)揮顯著的神經(jīng)保護(hù)效應(yīng)，并且抑制ca