端粒酶及其相關(guān)因子在結(jié)直腸癌中的研究.pdf

1、本文主要從以下幾個部分展開論述：
　　第一章 端粒酶活性在結(jié)直腸癌中預(yù)后作用的meta分析
　　目的:評價端粒酶(telomerase)或端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶(hTERT)活性與結(jié)直腸癌患者臨床病理特征之間的相關(guān)性。
　　方法:制定納入和排除標(biāo)準(zhǔn)，檢索PubMed、EMBASE、web ofscience、google scholar、CNKI、萬方等數(shù)據(jù)庫（截止2014年3月），收集并篩選自1989年以來公開發(fā)表的關(guān)于端粒

2、酶或端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶在結(jié)直腸癌(CRC)患者中表達(dá)及與預(yù)后相關(guān)的文獻(xiàn)，評價文獻(xiàn)質(zhì)量及提取相關(guān)資料后采用Revman5.0軟件進(jìn)行Meta分析，合并OR值及95％置信區(qū)間，并檢測發(fā)表偏倚。
　　結(jié)果:共納入17篇文獻(xiàn)（1015例CRC患者），meta分析結(jié)果表明端粒酶或端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶活性的高表達(dá)分別與浸潤深度（435例患者）（OR=2.40，95％CI=1.44-4.02，P=0.0008），淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移（689例患者）(OR=3.28

3、，95％CI=2.0-4.90，P＜0.00001)，遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移（388例患者）(OR=2.09，95％CI=1.11-3.92，P=0.02)，臨床分期（995例患者）(OR=2.54，95％CI=1.82-3.55，P＜0.00001)等相關(guān)，而與腫瘤大小、分化程度和腫瘤位置等無關(guān)。
　　結(jié)論:端粒酶活性的高表達(dá)可以促進(jìn)結(jié)直腸癌的浸潤和轉(zhuǎn)移，在預(yù)測結(jié)直腸癌患者預(yù)后中可能起到重要作用。
　　第二章 hTERT在結(jié)直腸癌組織中

4、的表達(dá)及其臨床意義
　　目的:探討端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶(humantelomerase reverse transcriptase，hTERT)在結(jié)直腸癌(colorectalcancer，CRC)和對應(yīng)正常組織mRNA的表達(dá)情況，分析hTERT mRNA與結(jié)直腸癌患者臨床病理參數(shù)及預(yù)后的關(guān)系。
　　方法:使用實時熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(qRT-PCR)法檢測42例結(jié)直腸癌組織及其對應(yīng)的正常組織中hTERTmRNA的表達(dá)，分析該基因

5、mRNA的表達(dá)情況與CRC患者臨床病理參數(shù)之間的關(guān)聯(lián)，并結(jié)合臨床隨訪資料分析其與結(jié)直腸癌患者預(yù)后的關(guān)系。
　　結(jié)果:hTERT mRNA在結(jié)直腸癌組織和正常組織均可表達(dá)，但結(jié)直腸癌組織中hTERTmRNA的表達(dá)水平明顯高于相應(yīng)正常組織，兩者差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.011);在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的結(jié)直腸癌中hTERTmRNA高表達(dá)率比無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移結(jié)直腸癌明顯增高（92.0％ vs52.9％，P=0.011）;在結(jié)直腸癌臨床TNMⅢ/Ⅳ期

6、中hTERTmRNA的高表達(dá)率明顯高于Ⅰ期/Ⅱ期（92.3％ vs50.0％，P=0.006）。通過Kaplan-Meier分析，結(jié)直腸癌患者h(yuǎn)TERTmRNA的低表達(dá)組和高表達(dá)組之間的生存曲線差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.014)，提示hTERT mRNA的高表達(dá)可能與預(yù)后不良相關(guān)。
　　結(jié)論:hTERT不僅在結(jié)直腸癌的發(fā)生、發(fā)展中起重要作用，而且可能促進(jìn)結(jié)直腸癌的浸潤、轉(zhuǎn)移，有望成為結(jié)直腸癌的預(yù)后標(biāo)志物及治療靶點。
　　第

7、三章 hTERT調(diào)控相關(guān)的microRNA在結(jié)直腸癌組織中的表達(dá)及其臨床意義
　　目的:在結(jié)直腸癌(CRC)中驗證與端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶(human telomerasereverse transcriptase，hTERT)調(diào)控相關(guān)的微小RNA(microRNA，miRNA)的表達(dá)水平，并分析其臨床意義。
　　方法:(1)利用我們課題組前期工作篩選出在結(jié)構(gòu)上可能調(diào)控hTERT的miRNA進(jìn)行初步實驗;(2)采用實時熒光定量PCR

8、(qRT-PCR)驗證預(yù)測hTERT調(diào)控相關(guān)的miRNA在CRC組織中的真實表達(dá)情況;(3)分別探討各miRNA的表達(dá)水平與結(jié)直腸癌患者臨床病理參數(shù)間的關(guān)系;(4)通過生存分析評估各miRNA在CRC中的預(yù)后作用。
　　結(jié)果:(1)經(jīng)qRT-PCR在CRC組織和相應(yīng)正常組織中驗證，除了miR-29c-3p(P=0.260)，其余7條miRNA(miR-124-3p,miR-133a-3p,miR-133b, miR-138-5p,

9、miR-150-5p,miR-378a-3p,miR-422a)均在CRC組織中表達(dá)下調(diào)（P均＜0.0001）。(2) miR-138-5p和miR-378a-3p的表達(dá)水平在CRC遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移陽性組和陰性組中存在差異(P＜0.000和P=0.008);此外，miR-378a-3p的表達(dá)水平在直腸癌組和結(jié)腸癌組也存在差異(P=0.008);而miR-422a的表達(dá)水平則在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陽性組和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陰性組中存在差異（P=0.023）。(3)

10、通過Kaplan-Meier生存分析表明miR-422a高、低表達(dá)組的CRC患者總生存率存在統(tǒng)計學(xué)差異(P=0.024)，相對于高表達(dá)組，低表組的CRC患者預(yù)后較差。
　　結(jié)論:miR-124-3p,miR-133a-3p,miR-133b,miR-138-5p,miR-150-5p,miR-378a-3p，miR-422a在CRC中表達(dá)下調(diào)，符合了miRNA調(diào)控hTERT的基本條件，下一步有必要分析這7個miRNA的表達(dá)水平與h