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文檔簡介
1、臨床上由于腫瘤、創(chuàng)傷等各種原因造成的大節(jié)段骨缺損修復(fù)一直是骨科臨床治療上的難題之一。目前常用于臨床骨缺損修復(fù)的生物支架材料主要是以羥基磷灰石(hydroxyapatite,HA,分子式[Ca10(PO4)6(OH)2])為主的人工骨。但該材料存在著力學(xué)性能差,脆性大,抗壓、抗折強度低等缺點。與此同時,作為另一種治療策略的骨組織工程研究也存在著支架材料的力學(xué)性能改善和骨修復(fù)體血管化等問題。其中,血管化是骨組織工程的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。組織工程骨的血
2、管化對促進(jìn)骨修復(fù)體中新骨形成至關(guān)重要,而新骨形成又有效的提高了骨修復(fù)體的力學(xué)性能,并最終反映了其修復(fù)骨缺損的能力。
本研究中,為了加快支架材料的血管化,設(shè)計并制備了C型多孔HA支架。接著選擇四種不同的體內(nèi)植入方式,分別是:A組:背脊肌肌袋內(nèi)(dorsalmuscle)植入;B組:腹股溝淺動脈(SuperficialFemoralArtery)植入;C組:腹股溝無名動末端結(jié)扎(Inguinalanonymousarteryl
3、igation)植入;D組:腹股溝神經(jīng)束(inguinalneurovascularbundle)植入。目的是考察材料的血管化及新骨形成面積跟體內(nèi)不同植入部位的生理環(huán)境之間的關(guān)系。探索一種支架材料快速血管化的方法。而且進(jìn)一步考察了材料血管化與其力學(xué)性能提高之間的關(guān)系。
體內(nèi)骨組織工程是指應(yīng)用具有骨誘導(dǎo)性的生物材料,不外加任何生長因子或細(xì)胞,以自身作為生物反應(yīng)器,在非骨環(huán)境直接構(gòu)建具有生命活力的骨修復(fù)體,移植后修復(fù)骨缺損。為
4、了提高支架的力學(xué)性能,本課題組在前期的研究中得出,將支架材料在腹腔大網(wǎng)膜培養(yǎng),不僅能夠提高材料的力學(xué)性能,而且能夠獲得具有生命活性的骨修復(fù)體。此方法的優(yōu)點是對動物的創(chuàng)傷小,而且術(shù)后不影響動物的正常機能。固本研究接著采用堆積法制備多孔HA支架,首先將支架在動物腹腔大網(wǎng)膜中培養(yǎng)6個月,然后把獲得的骨修復(fù)體植入原位進(jìn)行大節(jié)段骨缺損修復(fù)實驗,評價這種通過體內(nèi)組織工程,獲得的具有生物活性的骨修復(fù)體,對大段骨缺損的修復(fù)效果。本研究主要結(jié)論如下:
5、r> 1.通過顆粒造孔法制備出了C型多孔HA支架(Φ22mm×12mm,外徑12mm,內(nèi)徑6mm),多孔HA支架的平均孔徑為550μm~650μm、連通孔孔徑為150μm~200μm、總孔隙率為78.2%、抗壓強度為0.8MPa;C型多孔HA支架凹槽的設(shè)計與用相同方法(即蠟球造孔法)制備的圓柱型支架比較其優(yōu)點是支架的凹槽設(shè)計宏觀上適應(yīng)了血管束的埋入、在支架植入體內(nèi)后增加了材料與組織液的接觸面積。
2.體內(nèi)四種不同植入
6、方式的動物實驗結(jié)果顯示,所制備的C型多孔HA支架材料具有良好的生物相容性,無細(xì)胞毒性;材料的血管化及新骨形成面積跟體內(nèi)不同植入部位的生理環(huán)境有著密切的關(guān)系。組織學(xué)染色和統(tǒng)計結(jié)果顯示:(1)四種植入方式均能使材料血管化和誘導(dǎo)成骨,支架材料的血管化與體內(nèi)異位誘導(dǎo)成骨之間呈正相關(guān)性;(2)四種植入方式中,腹股溝無名動末端結(jié)扎能夠加快材料的血管化,從而增加異位成骨量。
3.對四種植入部位獲得骨修復(fù)體的抗壓強度分析顯示,各植入部位培
7、育的骨修復(fù)體其抗壓強度相對植入前均有顯著提高。所獲得骨修復(fù)體的抗壓強度與植入部位的生理特征密切相關(guān)。本章實驗結(jié)果顯示:各個時間點所獲得骨修復(fù)體,腹股溝無名動末端結(jié)扎組抗壓強度的提高較其他組有顯著性的差異。組織形態(tài)統(tǒng)計學(xué)分析結(jié)果表明新生血管密度與抗壓強度的相關(guān)系數(shù)為r=0.86,p<0.05,二者之間存在較強的正相關(guān)性。
4.使用前期以堆積法制備的多孔HA支架(總孔隙率為67.79%,具有100%的貫通性,平均孔徑為300μ
8、m)植入動物腹腔培育骨修復(fù)體,并植入股骨缺損進(jìn)行修復(fù)。在體內(nèi)雜化6個月后,骨修復(fù)體的抗壓強度增加到2.43±0.296MPa,達(dá)到了松質(zhì)骨(2.73MPa)的89.3%。植入股骨缺損處分別修復(fù)1個月、3個月后,生物力學(xué)檢測結(jié)果顯示:相同修復(fù)時間內(nèi)實驗組抗彎強度明顯優(yōu)于空白對照組和支架直接植入修復(fù)組,實驗組在修復(fù)3個月后股骨的抗彎強度為83.57±6.85MPa,達(dá)到了正常骨的91%左右。組織學(xué)檢測及X線觀察結(jié)果均顯示,大節(jié)段骨缺損不能通
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