春柴胡化學(xué)成分研究.pdf

1、《中國藥典》2005年版收載的柴胡為傘形科植物柴胡Bupleurum chinense DC.或狹葉柴胡Bupleurum scorzonerifolium Willd.干燥根。柴胡是臨床上常用的傳統(tǒng)中藥之一，具有和解表里，疏肝、升陽等功效。柴胡主要以根入藥，也有以莖葉、全草為藥用部位，如江蘇的大部分地區(qū)和安徽的東部習(xí)用狹葉柴胡春季采收的帶根全草，俗稱“春柴胡”入藥，常替代藥典柴胡在臨床上應(yīng)用。但目前對春柴胡的化學(xué)成分尚未見系統(tǒng)研究和報(bào)

2、道，對春柴胡還沒有全面可行的質(zhì)量評價標(biāo)準(zhǔn)，因此本論文通過對春柴胡的化學(xué)成分的系統(tǒng)研究，以建立春柴胡的質(zhì)量評價指標(biāo)，為臨床安全用藥提供保障。主要研究內(nèi)容和結(jié)論如下：
　　 1、采用水蒸氣蒸餾法對不同采收期春柴胡揮發(fā)油的含量進(jìn)行了測定，結(jié)果表明：春柴胡揮發(fā)油含量以四月初至五月中旬為高，這與傳統(tǒng)的春柴胡采收期大體一致。采用GC-MS分析方法對不同采收期春柴胡揮發(fā)油成分進(jìn)行了分析比較，不同采收期的春柴胡揮發(fā)油中脂肪酸的含量均較高，尤以n

3、-十六烷酸的含量較高，可以作為春柴胡揮發(fā)油化學(xué)成分的特征。
　　 2、研究了春柴胡中總黃酮的提取工藝，以總黃酮含量為指標(biāo)，通過單因素和正交試驗(yàn)相結(jié)合的方法確定總黃酮最佳提取工藝：提取溶劑為70％乙醇，料液比為1：15，提取溫度為60℃，提取時間為1h，提取次數(shù)為3次。
　　 采用紫外分光光度法對不同的春柴胡樣品中總黃酮含量進(jìn)行了分析比較，研究結(jié)果表明：4、5月份期間采收的春柴胡均比其它采收期樣品總黃酮含量要高，表明春柴胡

4、最佳采收季節(jié)應(yīng)為四月至五月；對春柴胡不同藥用部位樣品中總黃酮含量的研究結(jié)果表明：總黃酮含量春柴胡葉＞全草＞莖＞根；同時測定了不同產(chǎn)地的狹葉柴胡地上部分藥材及柴胡藥材，結(jié)果狹葉柴胡地上部分藥材黃酮含量最高，其次為春柴胡，最后為柴胡藥材。
　　 3、采用中藥指紋圖譜研究技術(shù)對春柴胡及狹葉柴胡地上部分黃酮類化學(xué)成分進(jìn)行了指紋圖譜研究，并采用HPLC-ESI-TOFMS技術(shù)對其中的共有峰進(jìn)行了定性分析。結(jié)果表明：不同產(chǎn)地狹葉柴胡地上部分

5、樣品指紋圖譜中有14個共有峰，3～8號色譜峰區(qū)域?yàn)槠渲鞣鍏^(qū)，對共有峰中的10個色譜峰進(jìn)行了結(jié)構(gòu)確認(rèn)，其中3、5、8號色譜峰分別為蘆丁、槲皮苷和槲皮素，三者的相對含量為67%～78%，此特征可作為狹葉柴胡地上部分的主要特征。春柴胡HPLC指紋圖譜中有12個共有峰，并對共有峰中的8個色譜峰進(jìn)行了結(jié)構(gòu)確認(rèn)，其中4號峰為春柴胡中的主要指標(biāo)成分槲皮素-3-O-葡萄糖醛酸苷，是春柴胡藥材中最明顯的特征，相對含量在50%以上。在不同部位春柴胡指紋圖譜

6、分析中可以看出，春柴胡根、莖、葉三個部位的指紋圖譜差異較大，葉與全草指紋圖譜的相似程度較高，表明二者化學(xué)成分組成差別不大。
　　 4、首次從春柴胡中分離得到化合物槲皮素-3-O-葡糖醛酸苷，并建立了槲皮素-3-O-葡萄糖醛酸苷的高效液相色譜含量測定方法，該方法的線性范圍為4.375～140μg·mL-1(r=0.9998)，平均回收率為98.43%，RSD為2.26%，表明該方法靈敏度高、準(zhǔn)確、可靠。對不同采收期春柴胡中槲皮素-

7、3-O-葡糖醛酸苷的含量進(jìn)行了分析，研究結(jié)果表明不同采收期春柴胡中槲皮素-3-O-葡糖醛酸苷的含量差別很大，其中以四月中旬含量最高，不同部位春柴胡中葉的含量要明顯高于其莖和根；同時也發(fā)現(xiàn)北柴胡與狹葉柴胡地上部分均沒有槲皮素-3-O-葡糖醛酸苷，表明槲皮素-3-O-葡萄糖醛酸苷為春柴胡的特征成分，該發(fā)現(xiàn)可為春柴胡的質(zhì)量評價提供依據(jù)。
　　 5、從柴胡中制備得到柴胡皂苷d和柴胡皂苷b2兩個單體，建立了柴胡中柴胡皂苷d的HPLC-UV