中草藥體外止血及抗菌活性的評價(jià)研究.pdf

1、近年來，人們不斷在消炎止血中草藥的藥用方面加大研發(fā)力度，選擇合適且有效的中草藥添加物，并評價(jià)其止血抗菌活性。體外評價(jià)指標(biāo)選擇較多，以往研究僅選擇幾種指標(biāo)進(jìn)行測試，其結(jié)果往往不能全面反映止血效果，因此選擇多種止血指標(biāo)進(jìn)行評價(jià)，建立對各指標(biāo)進(jìn)行綜合評價(jià)的評價(jià)模型，對篩選止血活性的中草藥添加物具有重要的意義。
　　本文選擇凝血酶時(shí)間(TT)、血小板聚集率(PAgR)和黏附率(PAdR)、抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)活性、血漿復(fù)鈣時(shí)間(RT)、

2、最低抑菌濃度(MIC)、最低殺菌濃度(MBC)7項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行體外止血活性評價(jià)，以艾葉等6種文獻(xiàn)報(bào)道或藥典有記載的具有體外止血及抗菌活性中草藥為評價(jià)對象，并對可能地活性成分總黃酮、總皂苷、有機(jī)酸進(jìn)行大孔吸附樹脂的富集純化，探討止血及抗菌成分。采用層次分析法建立體外止血模型，增加13種中草藥提取物進(jìn)行相同測試，以充實(shí)完善模型數(shù)據(jù)庫。利用模型對各中草藥進(jìn)行體外止血效果的比對。選取4種樣品，進(jìn)行小鼠出血及凝血實(shí)驗(yàn)，驗(yàn)證所得模型的可行性。
　

3、　止血實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，對粗提物，與生理鹽水相比，TT測試發(fā)現(xiàn)0.1～10mg·mL-1的三七、云南白藥與止血環(huán)酸對凝血酶活性的促進(jìn)作用最好;血小板聚集測試(PAgT)與粘附測試(PAdT)發(fā)現(xiàn)0.1～10mg·mL-1的側(cè)柏葉、云南白藥、止血環(huán)酸能顯著的促進(jìn)血小板聚集與粘附;RT測試發(fā)現(xiàn)0.1～10mg·mL-1的側(cè)柏葉、三七、云南白藥顯著的縮短RT;AT-Ⅲ測試發(fā)現(xiàn)0.1～10mg·mL-1的艾葉、側(cè)柏葉、止血環(huán)酸顯著的抑制AT-Ⅲ活性，影

4、響抗凝血酶對凝血酶的抑制作用。對純化物，艾葉總黃酮、金銀花有機(jī)酸及總黃酮含量的提高的提高能進(jìn)一步縮短TT與RT;側(cè)柏葉總黃酮濃度的提高會進(jìn)一步促進(jìn)其PAdR與PAgR，縮短TT;三七總黃酮及總皂苷含量的提高僅能夠縮短TT，其它指標(biāo)測試顯示純化前后凝血效果并無明顯好轉(zhuǎn);蒲黃由延長RT變?yōu)榭s短RT，而其它指純化后效果無明顯變化或更差;仙鶴草純化后各指標(biāo)均變差，僅在純化前對TT有一定的縮短作用?？咕鷮?shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，對粗提物，仙鶴草對變異鏈球菌抗菌效

5、果最好，其MIC與MBC均為125mg·mL-1;金銀花對兩株口腔細(xì)菌均存在較好的抑菌作用，對變異鏈球菌與牙齦卟啉單胞菌的MIC分別為62.5mg·mL-1、15.625mg·mL-1，但無殺菌作用;三七對兩株口腔細(xì)菌并未出現(xiàn)抗菌效果。對純化物，側(cè)柏葉對變異鏈球菌的MIC為37.5mg·mL-1;金銀花對變異鏈球菌出現(xiàn)殺菌作用，且MBC為7.813mg·mL-1;其它草藥對變異鏈球菌總體抗菌效果并無明顯好轉(zhuǎn)。金銀花提取物經(jīng)純化后對牙齦卟

6、啉單胞菌的MIC為3.906mg·mL-1，且MBC為37.5mg·mL-1;側(cè)柏葉MIC為300mg·mL-1;蒲黃MIC與MBC均為250mg·mL-1，仙鶴草MIC為62.5mg·mL-1;三七對牙齦卟啉單胞菌出現(xiàn)抑菌作用，其MIC為250mg·mL-1。增加白芨等13種中草藥體外凝血及抗菌實(shí)驗(yàn)，對21種樣品所得數(shù)據(jù)建立體外止血模型，止血效果較好的有:側(cè)柏葉、云南白藥、黃芪、丹參、銀杏葉、紫珠草、赤芍、當(dāng)歸。動物實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，3種中草

7、藥與空白組相比均可抑制小鼠出血和凝血時(shí)間，進(jìn)而達(dá)到止血的作用。此外動物實(shí)驗(yàn)還表明，三七低劑量(5g生藥·Kg-1)促進(jìn)止血，中高劑量(10、15g生藥·Kg-1)活血;兩面針高劑量(15g生藥·Kg-1)的止血效果較好;這均與模型的評價(jià)結(jié)果一致。
　　艾葉、側(cè)柏葉總黃酮成分，金銀花有機(jī)酸及總黃酮成分可能是其止血的有效成分;蒲黃總黃酮成分主要靠影響內(nèi)源性凝血系統(tǒng)發(fā)揮促凝作用;仙鶴草總黃酮，三七總皂苷與總黃酮濃度的提高反而有抗血栓的潛