纖維素降解菌群的純化鑒定及其誘變育種.pdf

1、秸稈的資源化利用已成為我國的研究熱點，而選育高效及活性穩(wěn)定的纖維素降解菌是影響纖維素物質(zhì)應用的關鍵。
　　 本實驗分為三部分對纖維素降解菌進行研究，包括纖維素降解菌的分離純化、單菌株的誘變育種以及突變菌株的培養(yǎng)條件優(yōu)化。
　　 首先，纖維素降解菌的分離純化。從實驗室前期馴化的纖維素降解菌群5號菌群中分離篩選出4株具有降解纖維素能力的菌株，命名為F1、F2、F3和F4，通過染色實驗以及16SrDNA鑒定，四株菌分別是蘇云金

2、芽孢桿菌、生淀粉糖化酶產(chǎn)生菌、糞產(chǎn)堿菌和蠟樣芽孢桿菌。
　　 其次，單菌株的誘變育種。本研究對分離篩選出的菌株F2進行物理單因素誘變——紫外線誘變，以及物理化學復合因素誘變——紫外線-氯化鋰誘變。共長出菌落7280個左右，其中紫外線誘變后長出3510個左右，紫外線-氯化鋰誘變后長出菌落3770個左右。經(jīng)革蘭氏碘液初篩共篩出154株正突變株，酶活力復篩篩出8株，通過酶活穩(wěn)定性分析，最終確定—株由紫外線-氯化鋰誘變產(chǎn)生的穩(wěn)定性較好的

3、菌株——69號菌株，其酶活力值為0.31mg/ml，為出發(fā)菌株的1.4倍。
　　 最后，突變菌株培養(yǎng)條件優(yōu)化。通過分別測定最佳氮源、碳源含量、氮源含量，以及碳源和氮源、溫度的正交試驗，確定了本試驗誘變菌株69號的最佳培養(yǎng)條件。優(yōu)化后的產(chǎn)酶活力達到0.081mg/mL是出發(fā)菌株的3.7倍。69號誘變株的最佳培養(yǎng)條件如下:培養(yǎng)基是Na2HPO43.0g，MgSO4·7H2O0.5g，CaCl20.5g，F(xiàn)eSO4·7H2O7.5mg