南海珊瑚礁樣品中菌株分離及其活性代謝產(chǎn)物研究.pdf

1、海洋具有著陸地?zé)o法比擬的優(yōu)越性,首先其占地球總面積的70％以上,有著遼闊的表面積,為各種生物的生存提供了廣闊的空間。其次海洋還具有著生態(tài)環(huán)境多樣性的特點(diǎn),具有低溫、高溫、高壓、高鹽、光照、黑暗、營(yíng)養(yǎng)貧瘠或富積等特殊生境。再次,因?yàn)槿祟惿钊腴_(kāi)展對(duì)海洋生物研究的時(shí)間相對(duì)較短,許多方面還有待發(fā)展,這就為對(duì)海洋生物的研究提供了很大的研究空間。南海作為中國(guó)四大海域中靠近赤道的海域,其與熱帶的雨林相似,具有著比其他海域更加豐富的物種和多樣性的生態(tài)環(huán)

2、境。
　　 本文以采自南海海域的珊瑚礁為樣品,通過(guò)對(duì)樣品中微生物的分離純化,得到放線菌、真菌等菌株。再通過(guò)相關(guān)的篩選機(jī)制,篩選出具有活性次級(jí)代謝產(chǎn)物的菌株,然后對(duì)其進(jìn)行大規(guī)模發(fā)酵,利用活性追蹤的方法,如海蝦毒理實(shí)驗(yàn)、抑菌實(shí)驗(yàn)、HPLC檢測(cè)等,經(jīng)過(guò)分離純化等手段的運(yùn)用,分離出其中的活性成分,再對(duì)其進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定,最后將有研究?jī)r(jià)值的菌株進(jìn)行分子生物學(xué)鑒定,確定其種屬。
　　 本研究利用二十種差異性較大的培養(yǎng)基,從四個(gè)珊瑚礁樣品

3、中分離出67株放線菌,7株真菌。通過(guò)活性篩選、產(chǎn)物HPLC檢測(cè)對(duì)比分析等,最終選取了其中兩株放線菌,一株真菌進(jìn)行了進(jìn)一步研究。經(jīng)過(guò)對(duì)菌株進(jìn)行培養(yǎng)基等培養(yǎng)條件的篩選優(yōu)化、活性物質(zhì)追蹤、大型發(fā)酵生產(chǎn)、硅膠柱層析、HPLC制備等方法的運(yùn)用,從中得到了一些化合物單體,經(jīng)1H,13C NMR波譜數(shù)據(jù)分析等,確定其中一個(gè)單體為利迪鏈霉素。最后對(duì)其中用于大型發(fā)酵的兩株放線菌和所分離菌株中表型較特殊、具有代表性的幾株放線菌進(jìn)行了分子生物學(xué)鑒定,確定其為