南海珊瑚礁樣品中菌株分離及其活性代謝產(chǎn)物研究.pdf

1、海洋具有著陸地無法比擬的優(yōu)越性,首先其占地球總面積的70％以上,有著遼闊的表面積,為各種生物的生存提供了廣闊的空間。其次海洋還具有著生態(tài)環(huán)境多樣性的特點,具有低溫、高溫、高壓、高鹽、光照、黑暗、營養(yǎng)貧瘠或富積等特殊生境。再次,因為人類深入開展對海洋生物研究的時間相對較短,許多方面還有待發(fā)展,這就為對海洋生物的研究提供了很大的研究空間。南海作為中國四大海域中靠近赤道的海域,其與熱帶的雨林相似,具有著比其他海域更加豐富的物種和多樣性的生態(tài)環(huán)

2、境。
　　 本文以采自南海海域的珊瑚礁為樣品,通過對樣品中微生物的分離純化,得到放線菌、真菌等菌株。再通過相關的篩選機制,篩選出具有活性次級代謝產(chǎn)物的菌株,然后對其進行大規(guī)模發(fā)酵,利用活性追蹤的方法,如海蝦毒理實驗、抑菌實驗、HPLC檢測等,經(jīng)過分離純化等手段的運用,分離出其中的活性成分,再對其進行結構鑒定,最后將有研究價值的菌株進行分子生物學鑒定,確定其種屬。
　　 本研究利用二十種差異性較大的培養(yǎng)基,從四個珊瑚礁樣品

3、中分離出67株放線菌,7株真菌。通過活性篩選、產(chǎn)物HPLC檢測對比分析等,最終選取了其中兩株放線菌,一株真菌進行了進一步研究。經(jīng)過對菌株進行培養(yǎng)基等培養(yǎng)條件的篩選優(yōu)化、活性物質(zhì)追蹤、大型發(fā)酵生產(chǎn)、硅膠柱層析、HPLC制備等方法的運用,從中得到了一些化合物單體,經(jīng)1H,13C NMR波譜數(shù)據(jù)分析等,確定其中一個單體為利迪鏈霉素。最后對其中用于大型發(fā)酵的兩株放線菌和所分離菌株中表型較特殊、具有代表性的幾株放線菌進行了分子生物學鑒定,確定其為