細菌菌群降解石油的影響因素及應(yīng)用研究.pdf

1、隨著社會經(jīng)濟的發(fā)展，各國對石油的需求量日益增大，與此同時對生念環(huán)境也造成了極大的危害。生物修復(fù)技術(shù)，特別是微生物修復(fù)日益成為科學家研究的重點。本研究的主要目的是富集馴化獲得石油降解細菌菌群，進而研究其修復(fù)性能。旨在為石油降解細菌菌群的獲得方式提供理論依據(jù)，為將細菌菌群及其相應(yīng)生物菌肥應(yīng)用于實際的石油污染土壤修復(fù)提供基礎(chǔ)。
　　 本文從天津市大港油田采集石油污染土壤樣品，采用兩種典型的富集馴化培養(yǎng)基，篩選能夠降解石油的細菌菌群，并

2、對細菌菌的數(shù)量及結(jié)構(gòu)進行了分析;通過生長曲線試驗，了解細菌菌群的生長特性;選取影響微生物生長繁殖的環(huán)境因素設(shè)計實驗，從而獲得在搖瓶培養(yǎng)條件下，各影響因素對細菌菌群降解石油的影響特性;最后通過室內(nèi)試驗，研究了細菌菌群對石油污染土壤的修復(fù)效果。研究結(jié)果如下:
　　 1.經(jīng)過四個周期的富集馴化，從兩個石油污染土壤樣品中獲得四種石油降解細菌菌群。通過降解性能實驗得出，當初始石油濃度為5000mg/L時，采樣點2經(jīng)過無機鹽加石油培養(yǎng)基富集

3、馴化獲得的細菌菌群對石油的降解率最高。
　　 2.通過對采樣點2不同富集馴化培養(yǎng)基獲得的菌群進行微生物數(shù)量測定及PCR-DGGE實驗發(fā)現(xiàn)，無機鹽加石油培養(yǎng)基更有利于微生物數(shù)量的增長，且微生物多樣性高。
　　 3.對于同一石油污染土壤，不同富集馴化培養(yǎng)方式獲得的細菌菌群的優(yōu)勢菌不同。無機鹽加石油馴化得到的細菌菌群優(yōu)勢菌為鞘氨醇桿菌屬（Sphingobacterium）和地衣芽孢桿菌(Bacilluslicheniformi

4、s)，牛肉膏蛋白胨加石油馴化得到細菌菌群優(yōu)勢菌為噬幾丁質(zhì)菌屬（Chitinophaga）。
　　 4.通過影響因素試驗得出，采樣點2無機鹽加石油馴化獲得的細菌茵群在初始石油含量為3000～9000mg/L時，石油降解率較高(22.21％～28.08％);初始接種量為5％～11％，石油降解率為28.08％～31.36％;該細菌菌群有較強的耐鹽性，在初始鹽分含量為12g/L時，石油降解率為25.60％;該細菌菌群能夠在中性偏堿性的條

5、件下降解石油，有良好的應(yīng)用前景。
　　 5.石油污染土壤修復(fù)實驗表明，通過兩種富集馴化獲得的細菌菌群，當以菌液的形式投加到土壤中時，經(jīng)過58d的修復(fù)，石油降解率達到40.9％～56.56％，高出CK滅菌組和CK未滅菌組28.69％～50.67％。說明外源細菌菌群的投加對石油污染土壤的修復(fù)起到了關(guān)鍵作用。
　　 6.土著微生物對外源微生物的影響與初始微生物的投加量有關(guān)。第二次投加外源細菌菌群后，并沒有增大對石油的降解作用，