細菌上清對酵母合成PHB能力的影響.pdf

1、聚羥基脂肪酸酯（polyhydroxyalkanoates，簡稱PHA）是微生物在碳源過剩其他營養(yǎng)不均衡條件下發(fā)酵生成的一種儲存碳源和能量的胞內(nèi)聚酯，是應用廣泛的生物可降解塑料。其中聚羥基丁酸酯(PHB)是PHA家族中的研究熱點，它與石化塑料相似但又具有生物可降解，生物相容性、表面可修飾性等優(yōu)良性狀，被稱為“綠色塑料”，前景廣闊。從活性污泥馴化得到的高產(chǎn)PHB菌群中篩選出高產(chǎn)PHB的細菌和酵母，通過“人工復配”的方法分析細菌的上清液對酵

2、母合成PHB的促進作用。為挖掘酵母合成PHB的潛力奠定實驗基礎，對酵母單菌株、菌群中酵母合成PHB代謝機理具有參考價值。
　　通過尼羅藍平板染色法初篩和氣相色譜法測定PHB含量復篩，從活性污泥馴化得到的高產(chǎn)PHB菌群中篩選出高產(chǎn)PHB的10株細菌和8株酵母菌。經(jīng)細菌的16SrRNA和酵母的26SrRNA菌種鑒定及系統(tǒng)發(fā)育樹分析，分離獲得的細菌主要有Kurthia、Bacillus、Acinetobacter、Enterobacte

3、r4個屬。另外，獲得多株酵母，其中優(yōu)勢酵母為Rhodotorula、Candida、Geotrichum klebahnii，菌群中還存在酵母Pichia guilliermondii和Meyerozyma guilliermondii。分離得到細菌和酵母菌群組成多樣性較豐富，經(jīng)鑒定都屬于已報道高效合成PHB的菌屬。
　　“人工復配”實驗表明細菌發(fā)酵上清液對大多數(shù)酵母積累PHB有促進作用，其中對酵母Y6影響最大，人工復配酵母Y6

4、PHB的產(chǎn)量是純酵母Y6的1.49倍。選取酵母Y1（Rhodotorula mucilaginosa）和酵母Y6（Pichia guilliermondii）作為出發(fā)菌株，分析添加細菌上清液后酵母在發(fā)酵過程中pH值、COD、細胞干重、總磷含量的動態(tài)變化與PHB合成的關系，結(jié)果表明酵母高產(chǎn)PHB的最佳培養(yǎng)時間是54-56h，此時酵母Y1高產(chǎn)PHB達干重的5.941％，Y6為5.203％。添加細菌上清液后酵母Y6也是54-56 h時達到最高