一體式PCR激發(fā)探測(cè)系統(tǒng)的研究.pdf

1、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Polymerase Chain Reaction，PCR)是由美國(guó)Mullis于1985年發(fā)明，是一種用于體外放大擴(kuò)增特定DNA片段的分子生物技術(shù)。根據(jù)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)理論發(fā)明了PCR儀，PCR儀經(jīng)過(guò)定性到定量的發(fā)展過(guò)程。當(dāng)前的PCR技術(shù)已經(jīng)可以實(shí)現(xiàn)對(duì)反應(yīng)物中的DNA進(jìn)行準(zhǔn)確的定量計(jì)算，熒光檢測(cè)系統(tǒng)是實(shí)現(xiàn)該方法的核心部件之一，通過(guò)系統(tǒng)熒光強(qiáng)度的變化來(lái)監(jiān)測(cè)PCR反應(yīng)。
　　本文首先主要從熒光出發(fā)，通過(guò)熒光的發(fā)光原理以

2、及特性，利用熒光分析法和一般定量PCR中的熒光試劑的激發(fā)光譜與發(fā)射光譜特性，用直插LED作為激發(fā)光光源、濾光片來(lái)分離波段、PIN光電二極管作為探測(cè)器，并基于斜射式熒光檢測(cè)方法的基礎(chǔ)上，初步設(shè)計(jì)了一個(gè)四通道、多波段的實(shí)時(shí)熒光檢測(cè)系統(tǒng)。
　　然后根據(jù)非成像光學(xué)原理，利用仿真軟件Tracepro仿真模擬，通過(guò)建立模型、設(shè)置光源、設(shè)置材料與屬性之后對(duì)熒光檢測(cè)系統(tǒng)的激發(fā)光路與探測(cè)光路進(jìn)行仿真與優(yōu)化，使得光能利用率達(dá)到一個(gè)理想的效果。