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1、作為替代傳統(tǒng)能源的一種新型生物能源,微藻生物柴油因其具備可再生性,可持續(xù)性以及潔凈性在世界范圍內(nèi)獲得了一致認(rèn)可。近年來(lái),作為一種刺激微藻細(xì)胞含油量提高的方法,氮缺乏和氮限制引起了人們的廣泛關(guān)注。然而,伴隨著含油量的提高,生物量產(chǎn)率往往比較低,由此導(dǎo)致最終的產(chǎn)油率往往得不到提高甚至出現(xiàn)降低的現(xiàn)象。因此,許多研究人員認(rèn)為用完全營(yíng)養(yǎng)的培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)微藻以生產(chǎn)生物柴油更具經(jīng)濟(jì)性。然而,微藻在環(huán)境壓力條件下通常會(huì)吸收更多的磷,這一現(xiàn)象在微藻生產(chǎn)生物
2、柴油的研究中常常被忽略。因此,元素磷對(duì)于氮缺乏條件下微藻生物柴油產(chǎn)率提高的作用也因此沒(méi)有得到足夠的重視。
為了研究氮缺乏條件下,元素磷對(duì)于微藻脂質(zhì)提高的作用,實(shí)驗(yàn)采用五種含有不同氮和磷濃度的培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)Chlorella vulgaris FACHB-1072。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,生物量的產(chǎn)率在氮缺乏磷充足條件下和營(yíng)養(yǎng)元素完全(對(duì)照)的情況下是差不多的,而且由于氮缺乏刺激含油量的提高,最大的產(chǎn)油率58.39 mg L-1 day-1
3、出現(xiàn)在氮缺乏磷充足的情況下。31P NMR顯示培養(yǎng)基中的磷被轉(zhuǎn)移到了細(xì)胞內(nèi)以聚磷的形式儲(chǔ)存下來(lái)。氮缺乏條件下磷的吸收速率是營(yíng)養(yǎng)元素完全時(shí)的3.8倍。這些結(jié)果表明元素磷在氮缺乏條件下小球藻的產(chǎn)油過(guò)程中扮演了重要的角色。
不僅如此,實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步優(yōu)化了兩個(gè)重要參數(shù)二氧化碳濃度以及光照強(qiáng)度以獲得小球藻在氮缺乏條件下的最大生物柴油產(chǎn)率以及磷吸收速率。結(jié)果表明在4%的CO2濃度以及200μmol photons m-2 s-1的光照強(qiáng)度條件
4、下獲得了最大的生物柴油產(chǎn)率34.56 mg L-1 day-1,該數(shù)值是營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)完全情況下的2.7倍。磷的最大吸收速率2.08 mg L-1 day-1是對(duì)照情況下的2倍,磷被吸收后以聚磷的形式儲(chǔ)存在細(xì)胞里。經(jīng)優(yōu)化,氮缺乏條件下的產(chǎn)油率和磷吸收速率都明顯高于那些氮充足的環(huán)境,而這種現(xiàn)象卻少見(jiàn)報(bào)道。
小球藻在重新提供氮源后會(huì)出現(xiàn)返綠現(xiàn)象。實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步研究了細(xì)胞里聚磷的利用對(duì)于這種返綠過(guò)程尤其是生物柴油產(chǎn)率增加的作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明返
5、綠過(guò)程在3-5天內(nèi)完成,無(wú)論是否有外源磷的供應(yīng),細(xì)胞內(nèi)的聚磷都在返綠的3天內(nèi)降解了。在提供外源磷的情況下,聚磷的降解是先于磷的吸收過(guò)程的,在沒(méi)有外界磷供應(yīng)時(shí),當(dāng)細(xì)胞內(nèi)部的聚磷降解完之后,細(xì)胞對(duì)于氮元素的吸收明顯受到影響,緊接著生物量以及生物柴油的生產(chǎn)嚴(yán)重受阻。因此,以上結(jié)果可以得出的結(jié)論是在細(xì)胞的返綠過(guò)程中,同時(shí)提供外界的氮源和磷源對(duì)于小球藻生物柴油的生產(chǎn)恢復(fù)過(guò)程是非常重要的。
為了研究氮缺乏條件下磷的供應(yīng)對(duì)于微藻生物柴油產(chǎn)率
6、提高的作用是否具有普遍性,實(shí)驗(yàn)采用了另一種常見(jiàn)的綠藻斜生柵藻作為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,并選擇了不同氮磷濃度組合起來(lái)的六種培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)該藻。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明相比較于氮充足的條件,氮缺乏能促進(jìn)生物柴油產(chǎn)率的提高,不僅如此,生物柴油產(chǎn)率還進(jìn)一步隨著磷濃度的提高而提高。在氮缺乏磷充足的條件下,獲得了最大的生物柴油產(chǎn)率,該產(chǎn)率是營(yíng)養(yǎng)元素完全情況下的兩倍,與此同時(shí),磷被大量的吸收到細(xì)胞內(nèi),但是并沒(méi)有發(fā)現(xiàn)聚磷的形成。
該研究表明對(duì)于許多的藻種,氮缺乏外加磷
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