用于腫瘤治療的不同形貌的聚醚-聚酯膠束的研究.pdf

1、納米載體在體內(nèi)循環(huán)中的迅速清除目前仍是腫瘤治療中面臨的一大挑戰(zhàn)。受到自然界中一些具有不對(duì)稱形貌的病毒和細(xì)菌病原體對(duì)特異性的細(xì)胞具有很強(qiáng)的感染能力，尤其是一些桿狀病毒如革蘭氏陰性菌沙門菌和革蘭氏陽性菌李斯特菌能夠進(jìn)入哺乳動(dòng)物細(xì)胞中的啟發(fā)，考慮將納米載體制備成類似于細(xì)菌病原體的形貌，從而能夠更好的應(yīng)用于藥物傳遞領(lǐng)域。
　　在本論文中，我們通過在mPEG-CL41聚醚-聚酯共聚物膠束制備過程中，加入一系列不同濃度的鹽溶液，制備出不同形貌

2、的膠束，通過原子力顯微鏡AFM、透射電鏡TEM和激光共聚焦顯微鏡CLSM等對(duì)其形貌進(jìn)行表征。選擇類似桿狀細(xì)菌病原體結(jié)構(gòu)的兩種不同長(zhǎng)度的棒狀膠束:短棒狀SR和長(zhǎng)棒狀LR，并以球形形貌的膠束S作對(duì)照，用納米激光粒度儀DLS考察其在0.9％生理鹽水中隨時(shí)間變化的穩(wěn)定性。在所考察的120h內(nèi)，三種形貌的膠束的平均粒徑和粒徑分布均沒有明顯變化，說明其穩(wěn)定性很好。選用抗癌藥物阿霉素作為藥物模型，長(zhǎng)棒狀膠束的載藥量達(dá)到8.4％，短棒狀和球形依次為7.

3、3％和4.5％。體外模擬藥物釋放結(jié)果顯示，在酸性條件下，棒狀膠束能夠?qū)崿F(xiàn)藥物快速穩(wěn)定的釋放。
　　然后，對(duì)三種不同形貌的載藥膠束進(jìn)行系列體外生物學(xué)評(píng)價(jià)，結(jié)果表明:聚醚-聚酯載體材料具有良好的生物相容性;三種不同形貌的載藥膠束均能抑制腫瘤細(xì)胞HeLa/HepG2的增殖，并能誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生凋亡，以短棒狀載藥膠束組的抑制效果最佳;在細(xì)胞的吞噬研究中，發(fā)現(xiàn)棒狀膠束相比球形膠束更容易被我們所研究的兩種腫瘤細(xì)胞HeLa/HepG2所攝取，并且從

4、TEM超薄切片中發(fā)現(xiàn)膠束通過內(nèi)在化方式進(jìn)入細(xì)胞后形貌仍然保持完整，說明細(xì)胞內(nèi)在化過程對(duì)膠束的形貌不會(huì)產(chǎn)生影響;考察細(xì)胞對(duì)不同形貌膠束的內(nèi)在化機(jī)理發(fā)現(xiàn):(1)同一種形貌的膠束在不同種類的細(xì)胞中，其內(nèi)在化方式不完全相同;(2)同一種細(xì)胞中，不同形貌的膠束的內(nèi)在化方式也不盡相同;(3)細(xì)胞對(duì)同一種形貌的膠束的內(nèi)在化方式并不是唯一的，膠束進(jìn)入細(xì)胞可能是多種內(nèi)在化方式協(xié)同作用的結(jié)果。
　　最后，在Balb/c小鼠皮下建立小鼠肝癌細(xì)胞H22腫

5、瘤模型，通過尾靜脈注射三種不同形貌的載藥膠束，進(jìn)行體內(nèi)實(shí)驗(yàn):藥物血液清除曲線和藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)表明長(zhǎng)棒狀的載藥膠束顯著延長(zhǎng)了藥物在血液中的循環(huán)時(shí)間;藥物體內(nèi)分布顯示，長(zhǎng)棒狀膠束顯著增加藥物在腫瘤部位的富集量，減少在正常組織的聚集濃度;另外，考察21天治療期內(nèi)小鼠體重、腫瘤體積和腫瘤重量變化來研究體內(nèi)抗腫瘤效果，均發(fā)現(xiàn):長(zhǎng)棒狀載藥膠束組具有最高的安全性及最佳的抗腫瘤效果。TUNEL組織學(xué)染色分析也表明，該組的腫瘤細(xì)胞凋亡特征最明顯，凋亡率也