凹凸棒石負(fù)載姜精油的制備、表征與抗菌活性.pdf

1、本論文以凹凸棒石為載體，制備凹凸棒石負(fù)載姜精油復(fù)合物。應(yīng)用單因素和響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)方法，確定凹凸棒石負(fù)載姜精油的最佳試驗(yàn)工藝條件，并通過一系列表征對凹凸棒石負(fù)載姜精油復(fù)合物的性質(zhì)進(jìn)行研究。利用體內(nèi)和體外抗菌試驗(yàn)研究復(fù)合物對金黃色葡萄球菌的抑制作用，并從分子水平研究其抑菌機(jī)理。主要的研究內(nèi)容及結(jié)果如下:
　　1、凹凸棒石負(fù)載姜精油的制備:凹凸棒石用作姜精油的載體，成功制備凹凸棒石負(fù)載姜精油復(fù)合物。通過單因素試驗(yàn)和響應(yīng)面試驗(yàn)，對制備凹凸

2、棒石負(fù)載姜精油復(fù)合物的反應(yīng)條件進(jìn)行優(yōu)化。反應(yīng)的最佳條件為:反應(yīng)時(shí)間為150.44min，6-姜酚初始濃度為214.11mg·mL-1，反應(yīng)溫度為80.56℃，所得復(fù)合物負(fù)載6-姜酚的比率為0.93763％。
　　2、凹凸棒石負(fù)載姜精油復(fù)合物的表征:通過傅里葉紅外光譜儀、X射線光電子能譜儀、X射線衍射儀、同步熱分析儀、場發(fā)射掃描電子顯微鏡對凹凸棒石負(fù)載姜精油復(fù)合物的性質(zhì)進(jìn)行分析。紅外光譜和X射線光電子能譜分析結(jié)果表明凹凸棒石已經(jīng)負(fù)載

3、姜精油;X射線衍射分析表明姜精油以物理吸附的方式被吸附在凹凸棒石表面上，并未進(jìn)入凹凸棒石的晶格;熱失重分析再次證實(shí)了凹凸棒石成功負(fù)載姜精油，并且估算出凹凸棒石負(fù)載姜精油復(fù)合物中姜精油所占比率約為18.66％;場發(fā)射掃描電子顯微鏡觀察結(jié)果表明凹凸棒石負(fù)載姜精油后形態(tài)發(fā)生明顯的變化;分散性分析表明凹凸棒石負(fù)載姜精油后實(shí)現(xiàn)了有機(jī)化，復(fù)合物的性質(zhì)發(fā)生了變化，凹凸棒石負(fù)載姜精油復(fù)合物具有明顯的疏水性和親油性。
　　3、凹凸棒石負(fù)載姜精油復(fù)合

4、物的體外抗菌性能研究:通過二倍稀釋法，測得凹凸棒石負(fù)載姜精油復(fù)合物對金黃色葡萄球菌的最小抑菌濃度為3.5625 mg·ml-1，姜精油與凹凸棒石結(jié)合后，姜精油表現(xiàn)出更強(qiáng)的抗菌性能。復(fù)合物在細(xì)菌生長的延緩期和對數(shù)期均有較強(qiáng)的抑制細(xì)菌生長的作用。革蘭氏染色實(shí)驗(yàn)表明凹凸棒石負(fù)載姜精油復(fù)合物抗菌性能具有靶向性，復(fù)合物很好的結(jié)合了凹凸棒石的吸附細(xì)菌能力和姜精油的抗菌能力。同時(shí)姜精油以凹凸棒石作為載體，姜精油的耐熱性、耐候性、時(shí)效性和耐酸堿性得到明

5、顯提高。
　　凹凸棒石負(fù)載姜精油復(fù)合物的體內(nèi)抗菌性能研究:通過皮下注射金黃色葡萄球菌建立昆明小鼠皮膚感染模型。試驗(yàn)小鼠分為6組:正常對照組、模型組（甘油）、陽性對照組（百多邦）、姜精油組、凹凸棒石負(fù)載姜精油復(fù)合物低劑量組和高劑量組，連續(xù)給藥七天。結(jié)果表明，小鼠涂抹凹凸棒石負(fù)載姜精油復(fù)合物后的皮損面積減小，皮膚評分優(yōu)于模型組和姜精油組，體重逐漸恢復(fù)，皮膚病理組織學(xué)觀察表明細(xì)胞核的排列趨于規(guī)整，炎性細(xì)胞浸潤程度得到改善，并且毛細(xì)血管的

6、擴(kuò)張現(xiàn)象減緩。凹凸棒石負(fù)載姜精油復(fù)合物對金黃色葡萄球菌所引起的皮膚感染癥狀具有緩解、改善和治療的作用，并且相對于姜精油而言，凹凸棒石負(fù)載姜精油復(fù)合物的效果更佳，起效時(shí)間更短。
　　5、對凹凸棒石負(fù)載姜精油復(fù)合物抑菌作用的分子機(jī)理研究:檢測金黃色葡萄球菌感染小鼠皮膚組織的炎癥相關(guān)基因Toll樣受體2(Toll-like receptor2，TLR-2)、Toll樣受體4（Toll-like receptor4，TLR-4）、白介素1

7、β（interleukin-1β，IL-1β）、腫瘤壞死因子α（Tumor Necrosis Factor alpha，TNF-α）基因的表達(dá)。發(fā)現(xiàn)經(jīng)凹凸棒石負(fù)載姜精油復(fù)合物治療后，TLR-2、TLR-4、IL-1β、TNF-α基因表達(dá)量均有所降低。凹凸棒石負(fù)載姜精油復(fù)合物可以降低金黃色葡萄球菌感染所致的炎性細(xì)胞因子升高，從而對由于金黃色葡萄球菌感染導(dǎo)致的皮膚炎癥具有緩解作用。
　　綜上所述，凹凸棒石負(fù)載姜精油復(fù)合物在我們實(shí)驗(yàn)室被