基于四肽聚合物的SiO2色譜材料及其糖肽富集性能研究.pdf

1、糖/糖肽與生命體的活動(dòng)，新陳代謝有著極其緊密的聯(lián)系，糖蛋白上糖基的變化會(huì)導(dǎo)致其所修飾的蛋白的結(jié)構(gòu)和功能發(fā)生變化，甚至?xí)?dǎo)致疾病并惡化成腫瘤等，因此科學(xué)家們?cè)絹?lái)越重視對(duì)蛋白糖基化、糖基化位點(diǎn)以及糖/糖肽的研究。研究的重難點(diǎn)主要集中在對(duì)糖/糖肽的分離富集和糖基化位點(diǎn)鑒定，目前利用現(xiàn)代生物質(zhì)譜技術(shù)已經(jīng)對(duì)糖基化位點(diǎn)的鑒定和糖/糖肽的富集取得的初步的成效，但想要高容量的富集和有效的分離糖/糖肽還需要不斷的深入研究，另外糖/糖肽本身結(jié)構(gòu)以及特性也決

2、定了分離富集糖/糖肽需要更為有效的手段。
　　本實(shí)驗(yàn)就糖肽分離富集這一難點(diǎn)但同時(shí)也是研究的熱點(diǎn)開(kāi)展實(shí)驗(yàn)，利用仿生學(xué)的思路，以大部分凝集素本身就是糖蛋白同時(shí)對(duì)糖肽有特異性識(shí)別特性并結(jié)合聚合物所具有的多重結(jié)構(gòu)和多接觸位點(diǎn)為出發(fā)點(diǎn)，開(kāi)發(fā)一類(lèi)類(lèi)似凝集素特異性功能的聚合物材料來(lái)有效富集并能分離糖/糖肽。實(shí)驗(yàn)以L型氨基酸為研究對(duì)象合成多肽，分析篩選出四肽(N) DAPD，并通過(guò)熒光滴定法標(biāo)定四肽與糖的相互作用情況，根據(jù)與不同的糖的結(jié)合力的差異

3、大小為依據(jù)，利用ATRP聚合方法，將DAPA分別聚合接枝到介孔二氧化硅表面和Au表面，然后通過(guò)QCM-D來(lái)分析 Au-Poly-DAPD對(duì)糖的吸附情況以印證四肽與糖發(fā)生相互作用且能有效的吸附糖，同時(shí)通過(guò)質(zhì)譜技術(shù)，分析SiO2-Poly-DAPD材料對(duì)糖/糖肽的富集效果，建立一套多肽聚合物材料分離富集糖肽的評(píng)估體系。
　　研究表明，熒光滴定法說(shuō)明了 DAPD與糖存在結(jié)合力，并且與不同的糖的結(jié)合力有一定差異，為材料的成功開(kāi)發(fā)提供了良好

4、的開(kāi)端。另外通過(guò)熱重、BET、XPS和SEM等表征手段確定DAPD通過(guò)ATRP聚合法成功的接枝到硅球和Au表面，而QCM-D實(shí)驗(yàn)表明了Poly-DAPD能相對(duì)有效的吸附不同的糖，為材料的應(yīng)用奠定了良好的基礎(chǔ)。結(jié)合質(zhì)譜技術(shù)評(píng)估材料對(duì)糖/糖肽的分離富集效果表明，SiO2-Poly-DAPD材料能相對(duì)有效的富集糖/糖肽，并且抗干擾比例可達(dá)1:5，而且對(duì)分離不同的糖有一定的效果。鑒于以上分析可知，利用多肽材料與糖/糖肽發(fā)生多重弱相互作用，構(gòu)建氫