一種基于魚(yú)膠原的抗菌止血醫(yī)用敷料的制備及其性能研究.pdf

1、膠原蛋白具有止血效果、能夠促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)、具有生物可降解性，因而可以用來(lái)制備止血敷料。出血傷口易感染病菌，若向該敷料中添加具有廣譜抗菌效果的抗菌劑Ag4O4，則可有效防止傷口被微生物感染?，F(xiàn)在實(shí)際應(yīng)用的膠原蛋白大都來(lái)自于陸生動(dòng)物，然而近年來(lái)由于瘋牛病、口蹄疫等傳染病的發(fā)生使人們對(duì)于陸生動(dòng)物來(lái)源的膠原蛋白的安全性產(chǎn)生了懷疑，同時(shí)由于陸生動(dòng)物在信仰伊斯蘭教的地區(qū)還受到限制，因此研究魚(yú)類膠原蛋白的提取和應(yīng)用顯得非常重要。青魚(yú)是我國(guó)淡水養(yǎng)殖的“四

2、大家魚(yú)”之一，是重要的經(jīng)濟(jì)魚(yú)類，易于飼養(yǎng)，產(chǎn)量高。此外，青魚(yú)體長(zhǎng)，含有的魚(yú)皮、魚(yú)鱗、魚(yú)鰾較多，膠原蛋白含量豐富。出于此目的，本論文展開(kāi)了以下研究：
　　 1.以青魚(yú)為原材料研究了膠原的提取、表征和應(yīng)用。首先探索了從青魚(yú)的魚(yú)皮、魚(yú)鱗、魚(yú)鰾中分離純化得到膠原蛋白的方法，以酸法和胃蛋白酶法提取相應(yīng)得到酸溶性膠原(ASC)和酶溶性膠原(PSC)，確定提取方案-從青魚(yú)魚(yú)鰾中以酶法分離純化得到膠原，然后優(yōu)化該方案，最后膠原的提取率為8.67

3、％。為了有效地利用膠原，還對(duì)該膠原進(jìn)行了表征，通過(guò)核磁氫譜、紅外光譜、SDS-PAGE電泳可以看出提取的膠原純度較高，具有三螺旋結(jié)構(gòu)，分子量約為100kDa～200kDa，通過(guò)差示掃描量熱法可以看出其熱變性溫度為40～60℃，具有代替陸生動(dòng)物膠原的潛力。
　　 2.研究了靜電紡絲制備膠原纖維敷料的工藝及紡絲前后膠原蛋白性質(zhì)的變化。通過(guò)大量的實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，當(dāng)膠原濃度為5%(質(zhì)量分?jǐn)?shù)，溶劑為六氟異丙醇)，紡絲電壓為20kV，接收距離為1

4、2cm，紡絲原液的流速為0.6ml/h時(shí)，可得到粗細(xì)均勻的平均直徑僅100nm的膠原纖維。靜電紡絲并用25%的戊二醛蒸汽交聯(lián)后，膠原纖維具有一定的疏水效果，而膠原的其他性質(zhì)基本無(wú)改變。說(shuō)明靜電紡絲是一種制備生物納米纖維的良好方法。
　　 3.通過(guò)軟化學(xué)方法制備得到Ag4O4，對(duì)比制備條件的影響設(shè)計(jì)出最佳實(shí)驗(yàn)方案，并對(duì)產(chǎn)物進(jìn)行了表征。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，獲得的Ag4O4的粒徑為微納米級(jí)別，是Ag2O和Ag2O3的混合物。由于Ag4O4中的A

5、g+/Ag3+電位不平衡，使其對(duì)表面裸露-N基(NH，-NH2)和-S基(S-S，-SH)的蛋白質(zhì)具有親和性，能與-N基和-S基發(fā)生熱力學(xué)吸附并觸發(fā)氧化還原反應(yīng)，從而產(chǎn)生致使蛋白質(zhì)構(gòu)象改變的電殺作用和鰲合作用。定性和定量的抗菌測(cè)試顯示，0.1% Ag4O4對(duì)大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、白色念珠菌及銅綠假單胞菌具有顯著的抗菌效果。
　　 4.最終產(chǎn)品的制備及性質(zhì)研究。通過(guò)化學(xué)沉降法將Ag4O4添加到膠原纖維中去，結(jié)合有抗菌劑的膠原纖