聚合物納米顆粒的酶法降解測(cè)試及酶吸附機(jī)理的初探.pdf

1、聚合物納米顆粒的酶解測(cè)試,作為一個(gè)新方法,可以用來評(píng)價(jià)聚合物的生物降解性,用于生物降解機(jī)理的研究,該法具有降解速度快,測(cè)試時(shí)間規(guī)模短,數(shù)據(jù)重現(xiàn)性好等優(yōu)點(diǎn).在該文中,聚合物被制備成納米顆粒,并選取假絲酵母Candida cylindracea脂肪酶(CcL)和假單胞菌Pseudomonas species脂肪酶(PsL),用于酶解測(cè)試研究;降解產(chǎn)物通過pH-stat系統(tǒng)進(jìn)行檢測(cè).首先對(duì)聚合物納米顆粒酶解測(cè)試的實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行優(yōu)化,選擇適宜的測(cè)

2、試溫度、納米顆粒粒徑及聚合物上樣量.比較了聚合物納米顆粒的酶解測(cè)試同其它測(cè)試方法的時(shí)間規(guī)模;并對(duì)幾種合成聚酯的生物降解性進(jìn)行了檢測(cè),初步探討了聚酯的化學(xué)結(jié)構(gòu)、熔點(diǎn)對(duì)其生物降解性的影響.在此基礎(chǔ)上,選擇了兩種生物可降解聚酯用于深入的研究,一種是脂肪族飽和聚酯-聚四甲基己二酸酯(SP 4/6),另一種是芳香族飽和聚酯-聚間苯二甲酸丁二醇酯(PBI).選擇CcL-SP4/6,PsL-PBI體系用于酶降解聚合物反應(yīng)動(dòng)力學(xué)的研究,考察了在該實(shí)驗(yàn)條

3、件下酶濃度與降解速度的關(guān)系,以及聚合物的裂解程度,并闡述了脂肪酶不同于一般水解酶的催化降解特點(diǎn).再有,為了從理論上描述酶反應(yīng)動(dòng)力學(xué),相應(yīng)的動(dòng)力學(xué)方程被建立.此外也對(duì)GBF提供的嗜熱單胞菌Thermomonospora fusca水解酶(TfH)作了相應(yīng)的研究,對(duì)其降解聚合物的能力進(jìn)行了評(píng)價(jià).既然聚合物的生物降解是一個(gè)在聚合物表面發(fā)生的過程,有關(guān)生物降解過程中酶在聚合物表面上吸附的情況也被研究.選取生物降解較緩慢的芳香族聚酯作為脂肪酶Cc

4、L、PsL吸附的載體,可以保證在吸附實(shí)驗(yàn)過程中,沒有降解反應(yīng)的發(fā)生.酶在納米顆粒表面上的吸附在很短的時(shí)間即可發(fā)生.Langmuir吸附等溫線可以近似地描述較低的酶濃度下,酶在納米顆粒上的吸附行為,相應(yīng)的吸附參數(shù)能夠被得到.通過比較脂肪酶在不同聚酯上的吸附行為,發(fā)現(xiàn)CcL、PsL都較容易吸附在疏水性相對(duì)差的聚合物納米顆粒表面上.這似乎暗示著,在該實(shí)驗(yàn)的條件下,吸附的推動(dòng)力并非是以疏水性相互作用為主.TfH在PBT上的吸附也被研究,并與脂肪