基于導(dǎo)電聚合物膜的電化學(xué)免疫傳感器的研究.pdf

1、電化學(xué)免疫傳感器是將免疫分析技術(shù)與電化學(xué)傳感器相結(jié)合的一種新型免疫分析方法，是基于測量電流、電位變化來進(jìn)行免疫分析的生物傳感器。電化學(xué)免疫傳感器在臨床醫(yī)學(xué)、環(huán)境和食品工業(yè)等方面都有重要應(yīng)用，并以其體積小、專一度強、靈敏度高、檢測快速方便、成本低和容易實現(xiàn)實時在線活體檢測等優(yōu)點，成為當(dāng)前研究的熱點之一。
　　 在電化學(xué)免疫傳感器的構(gòu)建中，如何有效地利用生物分子固定化技術(shù)及固定化材料決定著生物傳感器的穩(wěn)定性、靈敏度和選擇性等主要性能

2、。此外，將抗原/抗體之間結(jié)合所產(chǎn)生的電化學(xué)信號進(jìn)行放大在制備高靈敏電化學(xué)免疫傳感器方面也具有相當(dāng)重要的意義。正是基于以上考慮，本文結(jié)合導(dǎo)電聚合物膜良好的電子傳遞特性，酶的化學(xué)放大作用，以及納米金大的比表面積和良好的生物兼容性，構(gòu)建了三種電化學(xué)免疫傳感器。主要內(nèi)容如下：
　　 1．用循環(huán)伏安法在玻碳電極(GCE)上電聚合一層穩(wěn)定的中性紅聚合物膜，通過戊二醛的共價鍵合作用將癌胚抗體(anti-CEA)固定到電極表面上，進(jìn)而用牛血清白

3、蛋白(BSA)封閉電極上的非特異性吸附位點，采用雙抗體夾心的方法制得高靈敏電流型癌胚抗原免疫傳感器。實驗結(jié)果表明，該傳感器對癌胚抗原具有良好的電流響應(yīng)，該傳感器的線性范圍為0.50～10.0ngmL-1和10.0～80.0ngmL-1，檢出限(3σ)為0.20ngmL-1。該方法制備的電化學(xué)免疫傳感器對CEA的檢測較為理想，有一定的應(yīng)用價值。
　　 2．以聚合物膜電極為基體，通過戊二醛的共價鍵合作用將甲胎蛋白抗體自組裝到電極表面

4、上，最后用辣根過氧化物酶封閉電極上的非特異性吸附位點，并同時起到放大響應(yīng)電流信號的作用，制得高靈敏伏安型甲胎蛋白抗原免疫傳感器。實驗結(jié)果表明，該傳感器對甲胎蛋白抗原具有良好的電流響應(yīng)，該傳感器的線性范圍為1.00～10.0ngmL-1和10.0～200ngmL-1，檢出限(3σ)為0.40ngmL-1。該方法中電極制備簡單，操作簡便，有較高的靈敏度，實現(xiàn)了對甲胎蛋白的免疫分析。
　　 3．基于免疫反應(yīng)對聚硫堇在光激發(fā)下氧化底物H

5、2O2的阻礙而產(chǎn)生的光致電化學(xué)響應(yīng)，制備了無標(biāo)記癌胚抗原免疫傳感器。將硫堇聚合到玻碳電極表面形成帶正電的多孔聚硫堇(PTH)復(fù)合膜，通過靜電吸附固定納米金，利用納米金大的比表面積和強的吸附能力將癌胚抗體固定到電極表面，通過循環(huán)伏安法和光電流法考察了修飾電極的光電化學(xué)行為，并對免疫傳感器的性能進(jìn)行了詳細(xì)研究。在優(yōu)化的實驗條件下，該傳感器的響應(yīng)電流值與癌胚抗原濃度的對數(shù)值在1.00～80.0ngmL-1的范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系，檢出限(3σ