電化學免疫傳感器的初步研制.pdf

1、分子診斷效果精確、快速而且簡便，是傳統(tǒng)的臨床、組織病理和流行病學等診斷方法不能相比的。目前除核酸探針、PCR技術等技術外，生物芯片、分子烙印技術以及生物傳感器等生命科學領域中的一些高技術也正在被開發(fā)應用于分子診斷領域，本研究對生物傳感器和生物芯片技術進行了初步探索。
　　 將靶標分子通過物理吸附或化學方法固定在某種固體材料上是制備生物芯片和生物傳感器的核心步驟，是制備高質量蛋白質芯片的關鍵問題。本實驗通過對PMMA表面進行化學處

2、理，然后用于蛋白分子的固定。結果表明處理后的PMMA不僅能固定蛋白質分子，而且固定后的蛋白質分子能保持活性，實驗獲得了良好的效果。結果還證明其固定蛋白分子效果還明顯優(yōu)于目前比較常用的醛基化玻片，說明有機玻璃這種可塑性很強的材料也用來固定蛋白分子，經(jīng)進一步的實驗測試有可能為蛋白質芯片研制提供新的優(yōu)良的基片材料。
　　 電化學免疫傳感器在檢測方面具有經(jīng)濟、靈敏度高、方法簡單、快速、操作簡便等諸多優(yōu)點。電化學免疫傳感器主要由生物分子識

3、別和信息轉換部件兩部分組合構成。研制生物傳感器的前提或核心問題是如何制備穩(wěn)定的生物傳感器的信息轉換部件即工作電極。本研究探索兩種方法制備傳感器的工作電極，并以此為基礎建立電化學免疫傳感器系統(tǒng)。
　　 方法一：參考前人非金屬化學鍍方法，在施鍍過程中通過對一些實驗條件進行優(yōu)化和改進，成功的在了PMMA和石墨兩種材料上進行了鍍鎳和鍍金，并用這些材料制作了傳感器的工作電極。方法二通過電化學方法，在鉑片表面快速電沉積聚苯胺膜，制作成工作電

4、極。
　　 實驗用鍍金電極進行了分子自組裝和連接，結果發(fā)現(xiàn)該電極不能耐受酸性環(huán)境，同時堿處理又不能活化該電極表面活性位點，而且其本身電化學特性很不穩(wěn)定。因此鍍金膜電極作為傳感器工作電極的免疫傳感器系統(tǒng)的建立還需要進一步的探討和研究。
　　 在鉑基聚苯胺膜上固定抗體，并用辣根過氧化物酶標記的二抗與一抗結合，制成免疫工作電極。使用該電極建立電化學免疫傳感器檢測系統(tǒng)進行免疫電化學測試實驗，經(jīng)過連續(xù)和穩(wěn)定性測試，結果證明該工作電