乳源蠟樣芽孢桿菌電化學(xué)納米免疫傳感器的研究.pdf

1、本研究結(jié)合電化學(xué)分析可實(shí)現(xiàn)在線檢測(cè)，不受樣品的濁度、顏色的影響，所需設(shè)備儀器相對(duì)簡單的特點(diǎn)以及酶促反應(yīng)的高效性、免疫分析無需對(duì)樣品進(jìn)行純化、富集等預(yù)處理的特點(diǎn)，以玻碳電極為基體電極，采用共價(jià)鍵合、靜電吸附和自組裝單分子層等生物分子固定技術(shù)，并借助納米金的吸附能力強(qiáng)、比表面積大、良好的生物相容性和隧道效應(yīng)等特性以及殼聚糖良好的成膜性、機(jī)械性能、生物相容性等特性構(gòu)建了性能良好的過氧化氫、牛IgG及蠟樣芽孢桿菌電化學(xué)傳感器應(yīng)用于食品安全檢測(cè)分

2、析中。
　　本研究主要內(nèi)容包括：⑴以交聯(lián)有辣根過氧化物酶的電子媒介體硫堇的殼聚糖為橋聯(lián)劑，吸附納米金于玻碳電極，借助納米金吸附固定HRP制備了過氧化氫生物傳感器。利用光譜掃描、生物薄膜干涉技術(shù)、循環(huán)伏安法及交流阻抗法表征了吸附、組裝的各個(gè)階段。利用計(jì)時(shí)電流法對(duì)H2O2進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果表明該生物傳感器檢測(cè)的線性范圍為1×10-7～1×10-4 mol/L，檢測(cè)限為5.0×10-8 mol/L。并對(duì)其壽命、穩(wěn)定性、重現(xiàn)性及選擇性進(jìn)行了研

3、究，結(jié)果證實(shí)該傳感器具有一定的使用價(jià)值。⑵以殼聚糖作為橋聯(lián)劑連接金納米顆粒于玻碳電極，用納米金固定HRP標(biāo)記的兔抗牛IgG構(gòu)建了檢測(cè)牛免疫球蛋白 G的電化學(xué)免疫傳感器。通過交流阻抗法和循環(huán)伏安法表征電極組裝的各個(gè)過程電化學(xué)特性，用電流-時(shí)間法測(cè)定PBS緩沖液稀釋的標(biāo)準(zhǔn)牛免疫球蛋白 G。結(jié)果免疫反應(yīng)前后穩(wěn)態(tài)電流的變化率與牛 IgG的質(zhì)量濃度的對(duì)數(shù)在10-1～104 ng/mL范圍內(nèi)線性相關(guān)，相關(guān)系數(shù)為0.9976。該傳感器重現(xiàn)性及穩(wěn)定性良

4、好，成本較低，操作方便簡單，可用于含牛免疫球蛋白G制品中牛IgG含量的定量檢測(cè)。⑶以殼聚糖為橋聯(lián)劑固定第一層納米金于玻碳電極并吸附固定抗蠟樣芽孢桿菌單克隆抗體，以滴電極方式將硫堇-殼聚糖/納米金-HRP復(fù)合物固定于上述電極并吸附抗蠟樣芽孢桿菌單克隆抗體構(gòu)建了雙層納米金修飾的蠟樣芽孢桿菌電化學(xué)免疫傳感器。利用循環(huán)伏安法、交流阻抗法表征電極組裝的各個(gè)階段，利用計(jì)時(shí)電流法對(duì)蠟樣芽孢桿菌進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果該傳感器的響應(yīng)電流與菌濃度在5×101～5×