少根根霉直接發(fā)酵木薯粉產(chǎn)富馬酸的研究.pdf

1、富馬酸別名延胡索酸，化學名稱為反丁烯二酸。作為一種四碳二元酸，富馬酸在醫(yī)藥、食品、化工、樹脂等領域有廣泛應用。本文以實驗室保藏的少根根霉作為發(fā)酵的原始菌株，通過溴甲酚綠和丙烯醇平板的復壯篩選得到優(yōu)良菌株少根根霉（Rhizopusarrhizus）RH-7-13。利用該菌的糖化淀粉能力，省去常規(guī)發(fā)酵的原料糖化處理，開發(fā)了以廉價原料木薯粉為碳源的兩步發(fā)酵工藝。通過氣升式發(fā)酵罐的小試發(fā)酵實驗，得到了較高的富馬酸產(chǎn)量，達42.32g/L。

2、>　　 通過對種子培養(yǎng)條件的正交試驗，找到了少根根霉種子培養(yǎng)階段形成小球的最佳條件:尿素濃度1.5g/L，接種的孢子密度為6.2×107個/mL，pH2.5。
　　 由于菌種退化，原始菌株的富馬酸產(chǎn)量不足20g/L。因此，對原始菌株進行了復壯篩選。經(jīng)過溴甲酚綠和丙烯醇平板篩選，得到菌株少根根霉（Rhizopusarrhizus）RH-7-13，富馬酸的產(chǎn)量可達39.63g/L。
　　 木薯乃世界三大薯類之一，在我國廣西

3、地區(qū)廣泛種植。干木薯的淀粉含量高，可達75％。少根根霉的糖化能力強，工業(yè)上可作為釀酒的固體曲。本文采用實驗室所存少根根霉（Rhizopusarrhizus）RH-7-13直接發(fā)酵木薯粉產(chǎn)富馬酸。通過對發(fā)酵培養(yǎng)基的六種成分(木薯粉、尿素、KH2PO4、MgSO4·7H2O、ZnSO4·7H2O、FeSO4)Plackeet-Burman(PB)實驗，篩選出木薯粉和KH2PO4是影響富馬酸產(chǎn)量的顯著影響因素。采用CCD設計，對木薯粉和KH2

4、PO4進行了響應面優(yōu)化。最佳的培養(yǎng)基組成如下:木薯粉84.14g/L、尿素0.05g/L、KH2PO41.55g/L、MgSO4·7H2O0.5g/L、ZnSO4·7H2O0.025g/L、FeSO45.0×10-4g/L。并研究了木薯粉細度、接種量、裝液量、中和劑碳酸鈣添加量對富馬酸發(fā)酵的影響。富馬酸產(chǎn)量可以達到46.36g/L，時空產(chǎn)率可以達到0.32g/L/h。
　　 少根根霉菌絲發(fā)達，在攪拌式反應器中容易結(jié)團并纏繞攪拌槳