發(fā)狀念珠藻中MAAs合成條件及性質(zhì)的研究.pdf

1、三苯甲咪唑氨基酸（MAAs）是一類存在于多種生物中的，最大吸收峰在310nm-362nm的水溶性化合物，具有紫外吸收、滲透調(diào)節(jié)、抗氧化等功能。以液體懸浮培養(yǎng)的發(fā)狀念珠藻細(xì)胞為研究對象，模擬野生發(fā)狀念珠藻的生境條件，探究細(xì)胞中MAAs對環(huán)境變化的響應(yīng)。同時(shí)測定其還原力、對羥自由基和超氧陰離子的清除能力及紫外吸收的能力，最后對MAAs可能的合成途徑進(jìn)行探討。本研究主要內(nèi)容包括：
　?、挪煌瑥?qiáng)度的UV-B輻射12h后，發(fā)狀念珠藻細(xì)胞合成

2、MAAs的量達(dá)到最大值，且輻射強(qiáng)度為5 W/m2時(shí)發(fā)狀念珠藻細(xì)胞合成MAAs達(dá)到最大值，32.26mg/g。長時(shí)間和高強(qiáng)度的紫外輻射后，發(fā)狀念珠藻細(xì)胞合成MAAs的量會減少，MAAs自身也會發(fā)生降解。對1W/m2和5W/m2處理12h的發(fā)狀念珠藻細(xì)胞中MAAs進(jìn)行高效液相色譜分析，譜圖顯示2、5、8、9峰的峰高和峰面積增大，出現(xiàn)了兩個新的峰：峰10和11，6和7兩個峰變小或消失。
　　⑵用25-600mmol濃度范圍的NaCl和N

3、H4Cl處理發(fā)狀念珠藻細(xì)胞，細(xì)胞內(nèi)MAAs的合成量隨鹽濃度的變化呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢。NaCl和NH4Cl濃度為50mmol時(shí)，MAAs濃度達(dá)到最大值，分別為45.09 mg/g和35.14 mg/g。高效液相色譜分析結(jié)果顯示圖譜第1個峰降低、3和5兩個峰消失，NH4Cl處理組中，4、6、7和9四個峰增高；NaCl處理組中，2、6、7和9四個峰增高。
　?、前l(fā)狀念珠藻細(xì)胞中MAAs的合成量因環(huán)境溫度不同而不同。45℃發(fā)狀念珠藻細(xì)

4、胞合成MAAs的能力變化不大，合成量由19.05mg/g降到16.00mg/g，4℃，發(fā)狀念珠藻中MAAs的含量由19.05mg/g降為7.19mg/g。高效液相圖譜表明：5℃和45℃處理后的發(fā)狀念珠藻細(xì)胞合成MAAs的能力與空白組相比均有下降的趨勢。5℃處理后，1、4、8三個峰降低；45℃處理后，1和8兩個峰的峰高降低，且5℃處理組中發(fā)狀念珠藻細(xì)胞合成MAAs的量降低的幅度要大于45℃處理組。
　?、葘l(fā)狀念珠藻細(xì)胞的甲醇提取物

5、進(jìn)行濃縮、冷凍干燥，得到MAAs粗提物，為白色粉末狀固體。對 MAAs粗提物的抗氧化能力進(jìn)行測定。結(jié)果表明，MAAs具有一定的抗氧化能力。MAAs粗品的濃度為0.32 mg/mL時(shí)，溶液體系在700 nm處的吸光度值為0.32。樣品濃度為7.05mg/mL時(shí)，超氧陰離子的清除率為59.01％。羥自由基的清除率在粗品濃度為30.78 mg/mL時(shí)，達(dá)到最大值為78.64%。樣品的還原力、對羥自由基和超氧陰離子的清除能力與其濃度成量效關(guān)系，

6、隨濃度的增加而增大。將MAAs粗提物與防曬系數(shù)為20的防曬乳霜按質(zhì)量比1:1和2:1的比例混合，在280nm-400 nm范圍內(nèi)進(jìn)行光譜掃描。結(jié)果表明，防曬霜主要的吸收波長是在280nm-350nm之間。當(dāng)防曬霜中添加MAAs粗提物后，所測波長范圍內(nèi)都有明顯的吸收，表明MAAs粗提物具有紫外吸收能力。
　?、商砑硬莞熟⒌腂G-11培養(yǎng)基中，發(fā)狀念珠藻細(xì)胞內(nèi)MAAs的合成受到抑制。添加芳香族氨基酸的BG-11培養(yǎng)基中，酪氨酸對MAA