彗星試驗(yàn)方法的初步研究.pdf

1、彗星試驗(yàn)(Comet assay)又稱單細(xì)胞凝膠電泳試驗(yàn)(SCGE),是一種快速、靈敏的檢測(cè)單個(gè)細(xì)胞DNA斷裂的新技術(shù),由于其具備其它試驗(yàn)無可比擬的優(yōu)越性,因此應(yīng)用前景十分廣泛.為了在該實(shí)驗(yàn)室建立該方法,擴(kuò)展該方法在農(nóng)藥安全性評(píng)價(jià)中的應(yīng)用,該研究采用公認(rèn)的DNA斷裂劑重鉻酸鉀溶液為試驗(yàn)材料,設(shè)5個(gè)試驗(yàn)劑量,分別為12.5、25.0、50.0、100.0、500.0μmol/L,處理CHL細(xì)胞2個(gè)小時(shí),然后對(duì)CHL細(xì)胞進(jìn)行單細(xì)胞凝膠電泳試

2、驗(yàn).從細(xì)胞的彗星圖和試驗(yàn)數(shù)據(jù)分析可以看出,隨著重鉻酸鉀溶液濃度的增大,彗星尾長(zhǎng)明顯增長(zhǎng),說明重鉻酸鉀溶液劑量越大,對(duì)CHL細(xì)胞DNA的損傷越嚴(yán)重,且不同濃度重鉻酸鉀溶液與CHL細(xì)胞DNA損傷之間存在著明顯的劑量-效應(yīng)關(guān)系.這些結(jié)果表明在該實(shí)驗(yàn)室條件下基本建立起來了該方法,并且找出了適合該實(shí)驗(yàn)室條件下的CHL細(xì)胞彗星試驗(yàn)方法的條件:最合適的制片條件,改良的細(xì)胞染毒方式,受試物處理CHL細(xì)胞時(shí)間至少為2小時(shí),細(xì)胞裂解時(shí)間為2~2.5小時(shí),D