表皮葡萄球菌耐氟喹諾酮機制的初步探討.pdf

1、目的：初步探討耐氟喹諾酮類藥物的表皮葡萄球菌與其主動外排蛋白的相關(guān)性，以揭示表皮葡萄球菌對氟喹諾酮類藥物的耐藥機制，為臨床耐藥性表皮葡萄球菌的防治提供實驗依據(jù)。 方法：⑴收集臨床分離表皮葡萄球菌菌株，用紙片擴散法（Kirby-Bauer）檢測50株表皮葡萄球菌對氟喹諾酮藥物的敏感性，篩選出耐藥菌株和敏感菌株，以標準菌株ATCC12228作為對照；⑵PCR法擴增norA基因并測序。⑶提取表皮葡萄球菌的總RNA，應用實時熒光定量PC

2、R檢測表皮葡萄球菌多藥轉(zhuǎn)運蛋白norA的mRNA表達水平，分析norA在敏感菌株和耐藥菌株中的表達情況。⑷應用熒光法檢測氧氟沙星在表皮葡萄球菌內(nèi)的累積量，以及加入疊氮化鈉后對氧氟沙星累積量的影響。 結(jié)果：①表皮葡萄球菌耐藥率較高，80％以上對一種或一種以上氟喹諾酮類藥物產(chǎn)生耐藥。②50株臨床分離表皮葡萄球菌有48株檢測到NorA基因，陽性率為98％；對norA基因啟動子區(qū)測序分析發(fā)現(xiàn)，5株耐藥菌株中有3株在386位點有堿基C的缺

3、失。③臨床分離耐藥菌株norA基因mRNA表達水平明顯高于敏感菌株，差異有顯著性（P<0.05）。④氧氟沙星在表皮葡萄球菌內(nèi)的累積量耐藥組低于敏感組，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；加入能量抑制劑疊氮化鈉后氧氟沙星在菌體內(nèi)的累積量有所增加，菌株SE40尤為明顯。 結(jié)論：表皮葡萄球菌對氟喹諾酮類藥物存在明顯的交叉耐藥，臨床醫(yī)生在應用該類藥物時應予以注意，減少耐藥菌株的產(chǎn)生；表皮葡萄球菌norA基因的轉(zhuǎn)錄水平的增加使norA基因介