基于UPLC-MS的冠心病患者血清代謝輪廓研究.pdf

1、目的: 本研究利用液-質(zhì)聯(lián)用代謝組學(xué)研究平臺對不同病理階段冠心病患者的血清標(biāo)本分別進行代謝組學(xué)分析，尋找能夠預(yù)測心肌梗死患者預(yù)后的特異性代謝物離子，篩選出能夠有效診斷心絞痛及心肌梗死的代謝標(biāo)志物群，同時從代謝水平探究冠心病新的治療靶點;通過觀察心梗好轉(zhuǎn)患者住院期間不同時間段血清標(biāo)本的代謝物群的動態(tài)變化，驗證篩選出的代謝標(biāo)志物;對篩選出的標(biāo)志物進行深入分析，研究冠心病發(fā)生發(fā)展的病理機制。
　　方法: 運用超高效液相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用(U

2、PLC-MS)代謝組學(xué)研究平臺分析健康對照組28例，無斑塊組17例，有斑塊組27例，心梗好轉(zhuǎn)組17例，心梗死亡組14例，采用Mzmine2.0軟件對實驗數(shù)據(jù)進行數(shù)據(jù)提取及歸一化處理，運用SIMCA-P+12.0.1.0軟件進行主成分分析(PCA)及正交偏最小二乘(OPLS-DA)聚類分析，對代謝輪廓數(shù)據(jù)的變異性進行分析，構(gòu)建疾病區(qū)分模型，然后運用非參數(shù)檢驗篩選出區(qū)分健康人、無斑塊患者、有斑塊患者、心梗好轉(zhuǎn)患者及心梗死亡患者的特征離子，并

3、對它們進行鑒定;篩選特征代謝物，利用SPSS17.0軟件進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析，同時利用ROC曲線對特征代謝物的臨床診斷效能進行評估。
　　結(jié)果: 本研究成功得構(gòu)建了“健康對照組-無斑塊組-有斑塊組-心梗好轉(zhuǎn)組-心梗死亡組”的主成分分析(R2X=40.2％，Q2=13.9％)及正交偏最小二乘代謝輪廓分析模型(R2X=79％，R2Y=83.2％，Q2=65％)，驗證結(jié)果模型的預(yù)測準(zhǔn)確度達到100％，篩選了10個幫助臨床大夫預(yù)測心?；颊哳A(yù)后

4、的特征離子，其中有3個不僅可以判斷預(yù)后，還可以診斷急性心梗。差異代謝物主要涉及體內(nèi)磷脂類物質(zhì)的代謝通路，篩選并鑒定出10種判斷急性心梗預(yù)后的代謝離子，其中4-Hydroxy-6-docosanone、N-乙酰-白三烯(N-Acetyl-leukotriene E4)、LysoPC(18∶2(9Z,12Z))、LysoPC(18∶0)、LysoPC(P-16∶0)、LysoPC(P-18∶1(9Z))、LysoPC(20∶1(11Z))、

5、LysoPC(20∶2(11Z，14Z))在心梗死亡組水平下降， L-蘇氨酸(L-Threonine)、3-Methyl-2-butene-1-thiol在心梗死亡組水平升高;其中，L-蘇氨酸、3-Methyl-2-butene-1-thiol和4-Hydroxy-6-docosanone不僅可以判斷心?；颊哳A(yù)后，還可以早期診斷急性心梗;L-蘇氨酸、3-Methyl-2-butene-1-thiol、N-乙酰-白三烯和4-Hydroxy

6、-6-docosanone可能是急性心肌梗死新的治療靶點;LysoPC(18∶0)、LysoPC(P-18∶1(9Z))、質(zhì)荷比是341.30的代謝離子具有早期診斷心絞痛的價值;疾病在由無斑塊、心絞痛進展為心梗時，溶血磷脂酰膽堿類物質(zhì)水平下降，由治療過程中的動態(tài)監(jiān)進一步證實急性心梗發(fā)生早期溶血磷脂酰膽堿類物質(zhì)會有上升趨勢，如果在此期間就診，該類物質(zhì)可以被糾正到相對穩(wěn)定水平，上升趨勢之后就會進入到下降期，患者在此期間就診則可能因為錯過了最

7、佳治療時期而無法得到很好的預(yù)后。
　　結(jié)論利用代謝組學(xué)分析方法所找到的特征代謝物具有很好的預(yù)測易損斑塊破裂及急性心肌梗死患者預(yù)后的能力，可以作為潛在的疾病診斷標(biāo)志物及新的治療靶點在臨床領(lǐng)域做進一步研究。通過對鑒別出來的代謝物進行分析，我們發(fā)現(xiàn)基于液質(zhì)聯(lián)用平臺檢測血清中L-蘇氨酸、3-Methyl-2-butene-1-thiol和4-Hydroxy-6-docosanone的變化可能成為檢測冠心病發(fā)展進程和預(yù)測急性心肌梗死患者預(yù)后