IL-27在炎癥性腸病炎癥腸黏膜中的表達及意義.pdf

1、背景及目的：
　　 炎癥性腸病(IBD)是發(fā)生在胃腸道的慢性炎癥疾病,包括克羅恩病(CD)和潰瘍性性結腸炎(UC)。其中UC主要發(fā)生在直腸和結腸,而CD的病變多見于末端回腸和鄰近結腸。它們的主要表現(xiàn)為腹瀉、腹痛、體重下降及腹部包塊等。UC常伴有膿血便,同時也是結腸癌的高危因素；而CD常有瘺管形成和腸梗阻。另外炎癥性腸病常有多種腸外表現(xiàn),包括外周關節(jié)炎、結節(jié)性紅斑、壞疽性膿皮病、鞏膜外層炎、前葡萄膜炎、口腔復發(fā)性潰瘍等。此病常反復

2、發(fā)作,治病花費巨大,在病變后期,常常要通過手術切除病變結腸,給患者的生理和心理上造成巨大的負擔。
　　 IBD在西方國家相當常見,患病率達100～200/10萬,而在我國比較少見。但據(jù)近幾年國內(nèi)統(tǒng)計資料報道,患病人數(shù)逐年增加,近十年文獻資料累計病例已逾14萬,推測CD的患病率達1.4/10萬,UC的發(fā)病率為11.6/10萬。根據(jù)四川大學華西醫(yī)院的統(tǒng)計資料,近10年的患病人數(shù)較過去同期增加了5倍。盡管多年來對IBD進行了大量的研究

3、,但是其病因和發(fā)病機制仍尚未明確,目前大多學者認為腸壁黏膜免疫調(diào)節(jié)異常、持續(xù)腸道感染、腸壁黏膜屏障缺損、以及遺傳和環(huán)境等因素共同參與該疾病的發(fā)生和發(fā)展。其中免疫反應異常在IBD的發(fā)病中的重要作用越來越受到人們的重視。由于免疫系統(tǒng)出現(xiàn)不正常的、持續(xù)性免疫應答,引起基因易感者腸道黏膜炎性損傷而致病。其中一些促炎癥因子可能在IBD炎癥發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮著至關重要的作用。早期研究認為TNF-a、IL-12在IBD的發(fā)病中發(fā)揮著重要的作用,而近年

4、研究發(fā)現(xiàn)一些新的細胞因子才是IBD發(fā)病的關鍵。
　　 白細胞介素-27(IL-27)是新近發(fā)現(xiàn)的一種IL-6/IL-12家族的異源二聚體細胞因子,由IL-12p40亞單位相關蛋白IL-27p28和IL-12p35亞單位相關蛋白EB13(EBV-induced gene3)組成。在炎癥刺激下表達在巨噬細胞、樹突狀細胞和上皮細胞。其受體由IL-12Rβ2同源蛋白WSX-1/TCCR(T-cell eytokine receptor)

5、和gp130受體構成的信號傳導的異源二聚體。其中gp130為IL-6、IL-1l和IL-27共用的受體亞單位,WSX-1則是IL-27特有的受體亞單位。IL-27通過和其受體結合激活JAK1、JAK2、INK2、STAT1、STAT2、STAT3、STAT4和STAT5等轉(zhuǎn)錄因子并且誘導幼稚性CD4+T的分化,但對記憶性CD4+T沒有作用。并且IL-27還可以激活Thl特異轉(zhuǎn)錄因子T-bet,并在IL-12RB2和IL-12的協(xié)同作用下

6、,誘導Th1的分化產(chǎn)生INF-γ,發(fā)揮促炎癥作用。而在炎癥后期IL-27可通過誘導Th1、Th2和Th17向Treg分化,分泌IL-10,抑制炎癥的進展。IL-27的這些作用證實了IL-27在一些自身免疫性疾病、抗感染及抗腫瘤中發(fā)揮了重要的調(diào)節(jié)作用。
　　 韓國學者研究發(fā)現(xiàn)IL-27在IBD患者基因多態(tài)性分析中與正常明顯不同；另外,Schmidt等研究證實了IL-27mRNA在CD患者腸黏膜組織中表達明顯增高。但是就目前查閱的國

7、內(nèi)外文獻中沒有發(fā)現(xiàn)IL-27蛋白及受體在IBD炎癥腸黏膜中表達的相關研究。為了研究國人中IL-27在炎癥性腸病中所起到的免疫病理作用,進一步了解炎癥性腸病的發(fā)病機制,現(xiàn)通過實驗證明IL-27特異性亞單位p28基因和IL-27受體基因及IL-27蛋白在IBD活動期患者炎癥腸黏膜中的表達情況,以揭示IL-27與IBD的關系,為將來臨床上找到一種新的、有效的治療IBD的方法提供了理論依據(jù)。
　　 材料和方法：
　　 通過結腸鏡

8、下收取結腸黏膜標本48例,其中活動期的CD患者18例、活動期的UC患者15例和健康對照者15例。所有患者診斷符合《2007我國炎癥性腸病診斷治療規(guī)范的共識意見標準》,有完整的結腸鏡及病理學診斷資料。健康對照者為同期結腸鏡檢查未見異常者。所有患者未用過或復發(fā)前3個月未用過水楊酸制劑、糖皮質(zhì)激素及免疫抑制劑。術中通過活檢鉗取標本8-10塊,立即置入液氮中冷凍,以備Reverse Transcription-PCR(RT-PCR)和Weste

9、rn-blot用。通過RT-PCR和Western-blot方法對IBD患者活動期炎癥腸黏膜進行進行基因和蛋白水平進行檢測,同時取同期結腸鏡檢查未見異常的患者作為對照。
　　 結果：
　　 1.RT-PCR結果顯示IL-27p28mRNA在CD患者中表達明顯增高,在UC患者中少量表達,而在健康對照組中未見表達,各組間差異具有顯著性。
　　 2.RT-PCR結果顯示IL-27RmRNA在CD中的表達明顯增高,在UC

10、和健康對照組微弱表達,CD與UC和健康對照組有明顯統(tǒng)計學意義,而UC和健康對照組表達沒有明顯統(tǒng)計學差異。
　　 3.Western-blot結果示IL-27蛋白在CD患者中表達明顯增高,在UC患者中少量表達,而在健康對照組中未見表達,各組間差異具有顯著性。
　　 結論：
　　 1.IL-27p28、IL-27R基因和IL-27蛋白在活動期CD患者炎癥腸黏膜中表達明顯上調(diào)。
　　 2.CD患者中IL-27p