磺酸化絲素蛋白-羥基磷灰石多孔支架的制備及評價.pdf

1、近年來,隨著全球老齡化社會進程的進一步加劇,骨質疏松等相關疾病越來越嚴峻,嚴重影響人們的生活質量。自體、異體骨移植骨源有限給治療帶來較大的困難和風險。因此,制備出高生物學活性的骨組織工程支架材料成為治療骨組織疾病的首要任務之一。
　　本文應用偶氮鹽法對絲素蛋白進行磺酸化修飾,利用衰減全反射傅里葉變換紅外光譜儀(ATR-FTIR)獲取磺酸化絲素蛋白及不同有機溶劑處理后樣品的光譜圖,通過對光譜傅里葉自退卷積、二階導數及曲線擬合等方法測

2、算磺酸化絲素蛋白各二級結構比率的變化。結果表明,β-折疊、無規(guī)卷曲、α-型、轉角的比率分別為10.97％±1.32%、59.92%±2.72%、17.50%±2.13%、11.61%±1.17%;經90%甲醇、乙醇、異丙醇處理后,三種醇誘導二級結構改變的速率依次減緩。該過程中二級結構首先從無規(guī)卷曲轉變成SilkⅠ型的α-型,然后轉變成較穩(wěn)定的SilkⅡ型(β-折疊),且在不同溶劑中無規(guī)卷曲和α-型之間相互轉化。小鼠脾細胞(T、B細胞)的

3、刺激反應性試驗表明,磺酸化絲素蛋白的免疫原性較低。
　　通過共沉淀法制備羥基磷灰石,TEM結果表明羥基磷灰石呈棒狀,顆粒大小為100～500nm×20～50nm。將羥基磷灰石與磺酸化絲素蛋白混合,通過冷凍干燥法制備具有較好性能的多孔支架,結果表明多孔支架的理想比例為SSF:SF為1:1～0:1,蛋白濃度為5~10%,羥基磷灰石為5~10%。
　　體外降解試驗結果提示,在三種降解體系中多孔支架的降解速率依次為胰蛋白酶、α-糜蛋

4、白酶和PBS,且隨著酶濃度的增加降解速率顯著增加;在PBS中主要是水解機制,酶溶液中為水解和酶解協同作用。模擬體液和交替礦化結果表明,多孔支架具有較好的仿生礦化能力,在礦化基質上分別形成針狀和長方體形的結晶。體內評價結果表明:SD大鼠皮下包埋試驗發(fā)現該支架具有較好的組織相容性;家兔骨缺損模型修復試驗表明,在支架材料中添加不同濃度的BMP-2,均具有一定的成骨誘導性,且隨著BMP-2濃度的增加誘導新骨生成越明顯。
　　為了提高機體對

5、活性因子的利用效率,利用聚氨酯海綿填充法將不同孔徑(5~10nm、10～20nm、15~30nm)的介孔SiO2添加到多孔支架中,結果表明,添加不同孔徑介孔SiO2的多孔支架,熒光材料FITC的釋放時間都有不同程度的增加,且包含介孔SiO2孔徑越小的多孔支架緩釋能力越明顯。以熒光標記羊抗小鼠IgG抗體作為模型藥物,研究結果也表明多孔支架對大分子蛋白也具有較好的緩釋能力。SD大鼠皮下包埋表明包含介孔SiO2的多孔支架材料具有較好的組織相容