骨質疏松癥Ⅰ型膠原的變化及其與骨密度、骨生物力學的相關性研究.pdf

1、目的 通過對去卵巢雌性大鼠進行I型膠原代謝產(chǎn)物含量測定，應用骨膠原特殊染色觀察膠原纖維形態(tài)，以及對骨密度，骨生物力學特性等相關指標的測定，觀察I型膠原與骨密度、骨生物力學在骨質疏松大鼠模型中的變化及其相關性，探討I型膠原含量在絕經(jīng)后骨質疏松癥的發(fā)生發(fā)展所起的作用。同時應用鮭魚降鈣素、雌激素等治療手段對骨質疏松大鼠治療，探討不同治療方法對骨質疏松癥的療效，以及治療方法對骨質疏松大鼠I型膠原含量的影響，為臨床研究骨質疏松的病因及預防

2、、治療骨質疏松癥提供一定的依據(jù)及新的治療理念。 材料及方法 取7月齡未交配雌性SD大鼠60只，隨機分為4組，每組15只，分籠飼養(yǎng)，分別為A組：假手術組(sham組)；B組：手術組(OVX組)；C組：雌激素治組(雌激素組)；D組：降鈣素治療組(降鈣素組)。A組腹腔麻醉后開腹切除少量脂肪組織后縫合，B、C、D組腹腔麻醉后切除大鼠雙側卵巢，各組術后應用抗生素5天預防感染，C、D組分別給予皮下注射雌激素(苯甲酸雌二醇)和鮭魚降

3、鈣素(密蓋息)，各組正常標準飲食飼養(yǎng)。12周后處死大鼠，然后取大鼠L5椎體應用電子萬能材料試驗機進行腰椎壓縮力學實驗，分別測量L5椎體的最大壓縮力、彈性模量和抗壓強度；應用電子萬能材料試驗機對右側股骨進行股骨三點彎曲實驗，檢測彈性模量、最大應力、屈服點載荷和剛性系數(shù)；將完成生物力學測量的L5椎體烘干消化后，用分光光度計法測定羥脯氨酸含量：應用雙能x線骨密度儀，使用Rat Whole Body V5.73小動物分析軟件對第四腰椎行骨密度

4、測定；將L4椎體制作病理切片，用masson三色法染色法顯微鏡顯示骨膠原形態(tài)。用SAS9.0統(tǒng)計軟件對試驗結果進行組間比較和相關性分析。 結果 各試驗組與對照組在椎體羥脯氨酸(HYP)含量、骨生物力學、骨密度 (BMD)、骨膠原染色含量及形態(tài)上不同。 1、與A組相比，B組的L5椎體羥脯氨酸(HYP)含量及L4椎體骨密度均低于A組，有顯著性差異(P<0.05)；L5椎體壓縮力學實驗和股骨三點彎曲試驗的骨生物力學參數(shù)

5、均低于A組相關參數(shù)，統(tǒng)計學上有顯著性差異；骨膠原形態(tài)染色顯示膠原纖維排列稀疏，連續(xù)性差并有斷裂分層現(xiàn)象，著色淺并不均一。2、與A組相比，C組的L5椎體羥脯氨酸(HYP)含量及L4椎體骨密度低于A組，但均無統(tǒng)計學顯著性差異。L5椎體壓縮力學實驗及股骨三點彎曲試驗的骨生物力學參數(shù)部分低于A組，部分高于A組，無統(tǒng)計學顯著性差異；骨膠原形態(tài)染色顯示膠原纖維排列致密，連續(xù)性好無中斷現(xiàn)象，著色好均一。 3、與A組相比，D組的L5椎體羥脯氨酸

6、(HYP)含量及L4椎體骨密度低于A組，但均無統(tǒng)計學顯著性差異。L5椎體壓縮力學實驗及股骨三點彎曲試驗的骨生物力學參數(shù)與A組相比，部分降低，無統(tǒng)計學顯著性差異；骨膠原形態(tài)染色顯示膠原纖維排列規(guī)則，連續(xù)性好少見中斷現(xiàn)象，染色為鮮綠色，膠原排列致密，甚少見分層現(xiàn)象。 4、與B組相比，C組的L5椎體羥脯氨酸(HYP)含量及L4椎體骨密度均高于B組，有顯著性差異(P<0.05)；L5椎體壓縮力學實驗和股骨三點彎曲試驗的骨生物力學參數(shù)均高

7、于B組相關參數(shù)，統(tǒng)計學上有顯著性差異；骨膠原形態(tài)染色顯示膠原纖維排列致密，連續(xù)性好少見中斷現(xiàn)象，著色均一，鮮綠色。 5、與B組相比，D組的L5椎體羥脯氨酸(HYP)含量及L4椎體骨密度均高于B組，有顯著性差異(P<0.05)；L5椎體壓縮力學實驗和股骨三點彎曲試驗的骨生物力學參數(shù)均高于B組相關參數(shù)，統(tǒng)計學上有顯著性差異；骨膠原形態(tài)染色顯示膠原纖維排列規(guī)則，連續(xù)性好少見中斷現(xiàn)象，染色均一，鮮綠色。 6、與C組相比，D組的L

8、5椎體羥脯氨酸(HYP)含量及IA椎體骨密度無統(tǒng)計學差異；L5椎體壓縮力學實驗和股骨三點彎曲試驗的骨生物力學參數(shù)統(tǒng)計學上無顯著性差異；骨膠原形態(tài)染色顯示無顯著差異。 7、將所得數(shù)據(jù)應用SAS 9.0統(tǒng)計軟件行統(tǒng)計學分析發(fā)現(xiàn)，羥脯氨酸含量與骨密度及骨生物力學參數(shù)有直線相關性，表明Ⅰ型膠原含量降低與絕經(jīng)后骨質疏松(及骨質疏松骨折)有一定相關性。結論 1、切除雌性大鼠雙側卵巢后可致骨質疏松癥。 2、去勢后雌性大鼠骨質的