合用得力生注射液與柔紅霉素的藥代動力學研究.pdf

1、得力生注射液由人參、黃芪、斑蝥、蟾酥4味中藥組成,配合放化療具有協(xié)同增效作用,并能夠預防化療導致的骨髓抑制。柔紅霉素(dauno rubicin,DNR)是第一代抗腫瘤抗生素,主要用于各種類型的白血病、惡性淋巴瘤,其不良反應主要是骨髓抑制反應與心臟毒性。兩藥合用能顯著增強療效,減少不良反應。但兩藥合用是否存在藥動學相互影響國內外尚無報道。本課題擬通過建立一種有效、快速的高效液相色譜(high performance liquid chr

2、omatogram,HPLC)法,測定生物樣品中柔紅霉素與酯蟾毒配基的濃度,并對兩藥在大鼠體內藥動學相互影響進行了實驗研究,為合理使用兩藥提供理論依據(jù)。
　　 目的:建立測定大鼠血清中柔紅霉素與酯蟾毒配基濃度的高效液相色譜法,研究大鼠尾靜脈給藥后酯蟾毒配基與柔紅霉素血藥濃度的動態(tài)變化以及對合用得力生注射液后柔紅霉素藥代動力學的變化,觀察合用得力生注射液后柔紅霉素的藥動學參數(shù)是否有影響,影響程度如何,為臨床合理用藥、制定提高柔紅霉

3、素安全性和有效性提供依據(jù)。方法:將清潔級SD大鼠隨機分為柔紅霉素注射液組,得力生注射液組,合用得力生與柔紅霉素組(注射得力生0.5h后再注射柔紅霉素)三組。柔紅霉素注射液組、合用得力生與柔紅霉素組在給藥后3、15、30、60、120、240、480min取血:得力生注射液組在給藥后3、10、20、30、60、90、120、180、240 min取血,測定不同時間的血藥濃度,檢測大鼠血清中柔紅霉素與酯蟾毒配基的線性范圍、檢測限、定量限、樣

4、品回收率、樣品穩(wěn)定性等指標,并采用DAS2.1.1軟件擬合藥動學參數(shù)。柔紅霉素含量測定使用戴安HPLC色譜儀,色譜柱:phenomenex C18(250mm×4.6mm,5μm)；柱溫:35℃；流動相:甲醇-01.01mol·L-1磷酸二氫銨溶液(pH4.65)-冰醋酸(V:V:V=30:20:0.1)；流速:1.0ml·min-1；紫外檢測波長:233nm:內標:多柔比星。酯蟾毒配基含量測定使用戴安HPLC色譜儀,色譜柱:pheno

5、menex C18(250mm×4.6mm,5μm)；柱溫:35℃；流動相:乙腈-水(55:45)；流速:1.0ml·min-1；紫外檢測波長:296nm；內標:炔諾酮。結果:柔紅霉素在0.1478～14.778(mg·L-1)(r==0.9984,n=7)范圍內線性良好,檢測限為5ng。酯蟾毒配基在55～8800(μg·L-1)(r=0.9997,n=8)范圍內線性良好,檢測限為1.3ng。所測成分與內標物,血清中雜質之間的峰分離度好

6、,相互無干擾。血清中柔紅霉素、酯蟾毒配基的萃取回收率均值分別為84.1％,84.7％；空白加樣回收率均值分別為:100.6％,99.3％；柔紅霉素、酯蟾毒配基儲備液放置穩(wěn)定性結果分別為:RSD<3.0％,RSD<3.2％；血清處理后4℃放置的穩(wěn)定性結果:RSD<5.0％,RSD<4.5％；血清短期室溫放置穩(wěn)定性結果:RSD<3.1％,RSD<3.3％；血清長期冰凍穩(wěn)定性結果分別為:RSD<2.5％,RSD<2.9％；血清凍融穩(wěn)定性結果分

7、別為:RSD<2.2％,RSD<3.3％。動物實驗結果表明:藥動學參數(shù)柔紅霉素注射液組、柔紅霉素聯(lián)用得力生注射液組、得力生注射液組的二室模型分布相半衰期t1/2α均數(shù)分別為0.546、0.286、0.093h,二室模型消除相的半衰期t1/2β均數(shù)分別為19.577、22.327、1.131h,峰濃度Cmax均數(shù)分別為1.788、2.496、0.941mg·L-1,血漿藥物總清除率CL分別為0.372、0.155、12.875L·kg-1

8、·h-1,血藥濃度-時間曲線下面積AUC(0-t)分別為6.307、7.836、1.256 mg·h·L-1,中央室表觀分布容積V1均數(shù)為1.782、1.188、11.603L·kg-1。結論:通過本實驗,(1)建立了以高效液相色譜法測定生物樣品中柔紅霉素、酯蟾毒配基在大鼠血清中濃度的方法。(2)柔紅霉素、酯蟾毒配基皆符合靜脈注射二房室開放模型。(3)柔紅霉素單劑量組和混合組在t1/2β、CL、AUC(0-∞)、Cmax差異有統(tǒng)計學意義