Galectin-3、MMP-2及MUC-1蛋白在大腸癌中的表達(dá)及臨床意義.pdf

1、目的：大腸癌是一種常見的消化道惡性腫瘤，是危害人類健康的主要惡性腫瘤之一。在西方發(fā)達(dá)國家，其發(fā)病率居惡性腫瘤的第二位。在我國，隨著人民生活水平的提高和飲食習(xí)慣的改變，大腸癌的發(fā)病率有逐年上升的趨勢。盡管治療手段有了很大的進(jìn)步，但五年生存率仍然很低。腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移是患者死亡的主要原因之一，因此，研究大腸癌轉(zhuǎn)移的相關(guān)因素，對于揭示腫瘤轉(zhuǎn)移的本質(zhì)具有十分重要的科學(xué)意義。 腫瘤轉(zhuǎn)移是一個多步驟、多階段的復(fù)雜過程，包括細(xì)胞脫落、遷徙、粘

2、附、血管生成和逃逸機體免疫反應(yīng)等。研究表明有多種蛋白參與腫瘤轉(zhuǎn)移的各個過程，并對其有一定的調(diào)控和促進(jìn)作用。Galectins(β-半乳糖苷結(jié)合蛋白)是生物體內(nèi)廣泛存在的一大類糖結(jié)合蛋白，屬于凝集素家族。Galectins不僅存在于細(xì)胞質(zhì)，也存在于細(xì)胞核內(nèi)，具有多種生物功能。迄今，人們己經(jīng)在生物體內(nèi)發(fā)現(xiàn)了14個Galectins家族成員，其中Galectin-3廣泛表達(dá)于上皮細(xì)胞和免疫細(xì)胞，參與多種生物學(xué)過程，如細(xì)胞生長、粘附、分化、血管

3、生成和凋亡等。研究顯示，Galectin-3與腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移的某些過程相關(guān)，如血管生成、細(xì)胞基質(zhì)相互作用、腫瘤細(xì)胞沿血道播散及逸出。因此，檢測Galectin-3水平可能對了解一些腫瘤的轉(zhuǎn)移及預(yù)后判斷具有一定的價值?；|(zhì)金屬蛋白酶-2(MMP-2)是基質(zhì)金屬蛋白酶家族成員之一，能夠降解細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)和基底膜(BM)，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞向周圍組織擴散，從而對腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移產(chǎn)生影響。MUC-1作為一種粘蛋白能加強腫瘤細(xì)胞與基底膜蛋白，如層

4、粘連蛋白、纖維連接素和Ⅳ型膠原的粘附力，促進(jìn)腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移。本研究采用免疫組織化學(xué)法，檢測Galeetin-3、MMP-2及MUC-1在大腸正常黏膜、癌旁組織、大腸癌組織中的表達(dá)情況，研究Galectin-3、MMP-2及MUC-1的表達(dá)與大腸癌的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移及其臨床病理分期的關(guān)系，初步探討它們在大腸癌發(fā)病和轉(zhuǎn)移中的作用及它們之間的相關(guān)性，希望為闡明大腸癌轉(zhuǎn)移的機制提供研究資料，為大腸癌的臨床治療以及判斷預(yù)后提供有價值的參考指標(biāo)。

5、 方法：本實驗采用白求恩國際和平醫(yī)院及河北醫(yī)科大學(xué)第四附屬醫(yī)院2007年3月至5月間住院行外科手術(shù)治療的大腸癌手術(shù)標(biāo)本54例。其中男性16例，女性38例。年齡從45～72歲，平均年齡57歲。其中低分化26例，中高分化28例。Dukes分期中AB期29例，CD期25例。同時隨機選取大腸癌旁組織12例，正常組織15例作為對照，癌旁組織在癌組織周圍5cm以內(nèi)進(jìn)行取材，正常組織取材于病理證實無異常的組織塊。所有患者術(shù)前均未接受化學(xué)藥物治

6、療或放射線治療。所有標(biāo)本經(jīng)10％中性福爾馬林液中固定，常規(guī)石蠟包埋、4μm超薄切片，行免疫組化二步法染色，分別檢測大腸癌組織、癌旁組織及正常組織中Galectin-3、MMP-2及MUC-1表達(dá)情況。結(jié)合臨床資料對測定數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析，通過SPSS10.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行四格表確切概率法、卡方檢驗、校正卡方檢驗、Spearman等級相關(guān)分析等統(tǒng)計學(xué)方法，以α=0.05為標(biāo)準(zhǔn)，P<0.05有統(tǒng)計學(xué)意義。 結(jié)果： 1.Gale

7、ctin-3在大腸癌組織中陽性表達(dá)率為81.48％(44/54)，癌旁組織Galectin-3陽性表達(dá)率為41.67％(5/12)，正常組織中Galectin-3陽性表達(dá)率為40.00％(6/15)。Galectin-3在大腸癌組織中的表達(dá)明顯高于相應(yīng)的大腸正常黏膜組織及癌旁組織，有統(tǒng)計學(xué)意義；在正常組織和癌旁組織中的表達(dá)無明顯差異。Galectin-3蛋白在大腸癌組織中的表達(dá)與患者年齡、性別、腫瘤大小無相關(guān)性；低分化大腸癌的表達(dá)比中高

8、分化大腸癌表達(dá)明顯增高(X2=5.402)；侵及漿膜大腸癌的表達(dá)比未侵及漿膜大腸癌的表達(dá)明顯增高(X2=7.364)；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移大腸癌的表達(dá)比無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移大腸癌的表達(dá)明顯增高(X2=4.835)；DukesCD期大腸癌的表達(dá)比DukesAB期大腸癌的表達(dá)明顯增高(X2=4.835)。 2.MMP-2在大腸癌組織中的陽性表達(dá)率為83.33％(45/54)，癌旁組織MMP-2陽性表達(dá)率為50.00％(6/12)，正常組織中MMP-

9、2陽性表達(dá)率為40.00％(6/15)。MMP-2在大腸癌組織中的表達(dá)明顯高于相應(yīng)的癌旁正常黏膜組織及癌旁組織，有統(tǒng)計學(xué)意義；在正常組織和癌旁組織中的表達(dá)無明顯差異。MMP-2蛋白在大腸癌組織中的表達(dá)與患者年齡、性別、腫瘤大小無相關(guān)性；低分化大腸癌的表達(dá)比中高分化大腸癌表達(dá)明顯增高(X2=4.287)；侵及漿膜大腸癌的表達(dá)比未侵及漿膜大腸癌的表達(dá)明顯增高(X2=5.134)；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移大腸癌的表達(dá)比無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移大腸癌的表達(dá)明顯增高(X

10、2=7.210)；DukesCD期大腸癌的表達(dá)比DukesAB期大腸癌的表達(dá)明顯增高(X2=7.210)。 3.MUC-1在大腸癌組織中陽性表達(dá)率為51.85％(28/54)。在癌旁組織的陽性表達(dá)率為16.67％(2/12)，在正常粘膜組織中陽性表達(dá)率為13.33％(2/15)。MUC-1在大腸癌組織中的表達(dá)明顯高于相應(yīng)的癌旁正常黏膜組織及癌旁組織，有統(tǒng)計學(xué)意義；在正常組織和癌旁組織中的表達(dá)無明顯差異。MUC-1蛋白在大腸癌組織

11、中的表達(dá)與患者年齡、性別、腫瘤大小無相關(guān)性；低分化大腸癌的表達(dá)比中高分化大腸癌表達(dá)明顯增高(X2=9.048)；侵及漿膜大腸癌的表達(dá)比未侵及漿膜大腸癌的表達(dá)明顯增高(X2=6.567)；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移大腸癌的表達(dá)比無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移大腸癌的表達(dá)明顯增高(X2=4.862)；DukesCD期大腸癌的表達(dá)比DukesAB期大腸癌的表達(dá)明顯增高(X2=4.862)。 4.Galectin-3和MMP-2在大腸癌組織中的表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.2

12、98)；Galectin-3和MUC-1在大腸癌組織中的表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.304)；而MMP-2和MUC-1在大腸癌中的表達(dá)無明顯相關(guān)關(guān)系(r=0.166)。 結(jié)論： 1.Galectin-3在大腸癌組織中的表達(dá)量明顯高于正常組織及癌旁組織，并且隨著腫瘤分化程度的降低、侵犯深度的加深、淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移以及Dukes分期的進(jìn)展而升高，提示Galectin-3在大腸癌的發(fā)生、發(fā)展、侵襲和轉(zhuǎn)移過程中發(fā)揮著重要的作用。

13、2.MMP-2在大腸癌組織中的表達(dá)量明顯高于正常組織及癌旁組織，同時隨著腫瘤分化程度的降低、侵犯深度的加深、淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移以及Dukes分期的進(jìn)展，其表達(dá)水平有升高趨勢，提示MMP-2也在大腸癌的發(fā)生、發(fā)展、侵襲和轉(zhuǎn)移過程中發(fā)揮著重要的作用。 3.MUC-1在大腸癌組織中的表達(dá)量高于正常組織及癌旁組織，隨著腫瘤分化程度的降低、侵犯深度的加深、淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移以及Dukes分期的進(jìn)展，其表達(dá)水平有升高趨勢，提示MUC-1同樣在大腸癌的發(fā)

14、生、發(fā)展、侵襲和轉(zhuǎn)移過程中發(fā)揮著重要的作用。 4.Galectin-3和MMP-2在大腸癌中的表達(dá)呈正相關(guān)。Galectin-3是MMP-2的底物，MMP-2的高表達(dá)使Galectin-3的表達(dá)上調(diào)，兩者共同參與了大腸癌的侵襲和轉(zhuǎn)移。Galectin-3和MUC-1在大腸癌中的表達(dá)也呈正相關(guān)。MUC-1作為Galectin-3的配體，通過上調(diào)Galectin-3的表達(dá)增加腫瘤細(xì)胞的粘附力和侵襲力，增大腫瘤的轉(zhuǎn)移潛能。目前的研究結(jié)