電擊傷（死）后心肌PEG-3表達的法醫(yī)學(xué)研究.pdf

1、目的：電擊傷(electrical injury)和電擊死(electrouction)是法醫(yī)實踐工作中常遇的案例，但其診斷有一定的困難，因此對電擊傷和電擊死的研究具有重要意義。盡管已經(jīng)有很多學(xué)者對其進行了大量的相關(guān)研究，但是在沒有典型的電擊損傷標(biāo)志(如皮膚電流斑、金屬化)出現(xiàn)時仍然沒有哪一個指標(biāo)可以直接對電擊傷和電擊死進行診斷。在實際工作中，研究發(fā)現(xiàn)只有約1/3的案例出現(xiàn)典型的電擊標(biāo)志，故對未出現(xiàn)典型電擊標(biāo)志的疑似電擊傷和電擊死的診斷

2、尤為重要。有文獻報道在對電擊傷進行心臟組織基因芯片研究時發(fā)現(xiàn)PEG-3在電擊傷案例中有顯著增高，本實驗采用了免疫組織化學(xué)和原位雜交的方法，旨在觀察： 1．PEG-3在電擊傷和電擊死中的診斷價值； 2．PEG-3在電擊傷后的時間表達相關(guān)性； 3．PEG-3在死后電擊和電擊死中的表達情況。 方法：將250-300g的Wister大鼠分成隨機分成兩大組：陰性對照組和實驗組，陰性對照組又按照斷頸處死后取材時間的不

3、同分為6個亞組(0 h，0.5h，1h，3h，6h，12h)實驗組又分為3個小組，即：電擊傷組(0h，3h，6h，12h，24h，3d，6d，12d)、電擊死組(0h，1h，3h，6h，12h)和死后電擊組(0 h，0.5h，1h，3h)，共計23組(n=3)。建模的方法分別是： 1．陰性對照組采用斷頸處死； 2．電擊傷組是將老鼠電擊30秒；電擊死組則是將老鼠直接電死；死后電擊組是在斷頸處死后分別于相應(yīng)的時間進行電擊，電

4、擊時間60s；模型建立后分別在相應(yīng)的時間取心臟組織(取材的部位均為左心室前壁中央部)。進行 HE、免疫組織化學(xué)和原位雜交染色，然后進行半定量分析。 結(jié)果： 1．HE 染色可見電擊傷組在3-6h期間，心肌多灶性壞死，廣泛心肌斷裂、缺血，部分心肌細(xì)胞呈波紋狀排列及收縮帶壞死；心肌胞漿凝聚、均質(zhì)變和嗜酸變，部分心肌橫紋不清，胞核固縮、深染、扭曲，部分核伸長，部分核染色質(zhì)邊集、核膜增厚、呈空泡狀；心肌間隙增寬，水腫，部分區(qū)域散在

5、出血；細(xì)小血管擴張，紅細(xì)胞聚集，血管內(nèi)皮細(xì)胞細(xì)胞核固縮、深染，平滑肌變性。12h-3d期間，心肌變性壞死的范圍擴大，心肌細(xì)胞渾濁腫脹更加明顯，心肌細(xì)胞內(nèi)小肌束間隙增寬使心肌橫斷面呈篩狀；心肌細(xì)胞橫紋不清，部分心肌細(xì)胞呈肌溶解、肌漿淡染，部分心肌細(xì)胞核消失；心肌間細(xì)小血管擴張，內(nèi)皮細(xì)胞腫脹、壞死、脫落，平滑肌層疏松腫脹，大量紅細(xì)胞黏附于血管壁，管腔內(nèi)嗜中性粒細(xì)胞聚集，僅個別炎癥細(xì)胞游出血管外。6d-12d期間，心肌變性壞死范圍仍在擴大，大

6、片心肌溶解壞死，肌間隙明顯增寬。電擊死組也可以看到心肌細(xì)胞的變性壞死，死后電擊組只在死后即刻電擊可以看到心肌的缺血性改變，而陰性對照組則未見異常。 2．免疫組織化學(xué)染色和原位雜交染色可見直接電擊死組和電擊傷組心肌細(xì)胞內(nèi)有很強的陽性染色，位于肌漿內(nèi)，在電擊傷后即刻即開始增加，在12h時達到高峰，而后逐漸減少，在12d時其值仍高于對照組，但與對照組接近；電擊致死組也呈強陽性表達，在電擊致死后即刻表達就開始增加,3h時達到高峰，而后逐

7、漸減少，12h時其值仍高于對照組，但與對照組接近；而陰性對照組和死后電擊組只有極其微弱的陽性染色。以上這一變化規(guī)律可推斷心肌電損傷所經(jīng)過的時間。 結(jié)論：在電擊傷和直接電擊死早期即可見大量的心肌纖維斷裂，胞漿凝聚以及嗜酸性變；細(xì)胞核的固縮、深染、扭曲以及部分核伸長和空泡樣變化，這些改變與急性心肌梗死及其他心肌疾病、損傷的病理改變不盡相同，說明這些損傷是電流作用的結(jié)果。免疫組化和原位雜交的強陽性染色也說明電流對心肌造成了損傷．