芍根方安全實(shí)用性研究及相關(guān)藥對(duì)配伍的中醫(yī)藥理論探求和藥理學(xué)作用實(shí)驗(yàn)觀察.pdf

1、目的:研究芍根方的急性毒性，確定其安全范圍，為臨床安全用藥提供依據(jù);對(duì)比芍根方水煎劑與顆粒劑的藥效學(xué)作用，為芍根方劑型轉(zhuǎn)換提供實(shí)驗(yàn)參考;研究芍根方復(fù)方中不同藥物配伍的藥理學(xué)作用及相關(guān)中醫(yī)藥理論依據(jù)。
　　 方法:
　　 1使用不同濃度的芍根方給小鼠灌胃，觀察小鼠的毒性反應(yīng)，記錄死亡情況，測(cè)定小鼠的最大給藥量。
　　 2分別采用小鼠耳腫脹法、熱板致痛法觀察并比較芍根方不同劑型的抗炎消腫及鎮(zhèn)痛作用。
　　 小

2、鼠耳腫脹法:將80只雄性小鼠按體重隨機(jī)分為8組，每組10只。A組:顆粒劑高濃度組;B組:顆粒劑中濃度組;C組:顆粒劑低濃度組;D組:水煎劑高濃度組;E組:水煎劑中濃度組;F組:水煎劑低濃度組;G組:陽(yáng)性對(duì)照組（給予云南白藥）;H組:空白對(duì)照組（給予蒸餾水）。各組每日分別給藥一次，每次給藥體積均為0.2ml/10g，連續(xù)給藥7天。末次給藥后30min，將二甲苯均勻涂于各組小鼠右耳，每只0.02～0.05ml，15min后脫頸處死小鼠，用9

3、mm鼠耳打孔器在左右耳同部位鑿圓片，分別稱重。以腫脹百分率(％)即（右-左）/左×100％為指標(biāo)統(tǒng)計(jì)處理。熱板致痛法:選用雌性小鼠，將熱板測(cè)痛儀溫度調(diào)節(jié)到55±0.5℃作為熱刺激源，用秒表記錄雌性小鼠自投入熱板至出現(xiàn)舔后足的潛伏期時(shí)間(s)作為該小鼠痛閾值。給藥前測(cè)定每只備用小鼠的痛閾，閾值小于5s或大于30s的剔除，篩選出符合實(shí)驗(yàn)條件的小鼠80只。24h后進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，將小鼠置于55℃的熱板上，首先測(cè)定每只小鼠的基礎(chǔ)痛閾，給藥前測(cè)兩次（間

4、隔10min），取其平均值，然后按體重、基礎(chǔ)痛閾值將小鼠隨機(jī)分為8組，每組10只。A組:顆粒劑高濃度組;B組:顆粒劑中濃度組;C組:顆粒劑低濃度組;D組:水煎劑高濃度組;E組:水煎劑中濃度組;F組:水煎劑低濃度組;G組:陽(yáng)性對(duì)照組;H組:空白對(duì)照組。分組24h后開始灌胃給藥，各組分別每日給藥一次，每次給藥體積均為0.2ml/10g，連續(xù)給藥7天（陽(yáng)性對(duì)照組給予云南白藥等體積，空白對(duì)照給予蒸餾水等體積）。末次給藥1h后開始，分別于之后的第

5、30、60、90、120min時(shí)測(cè)定小鼠痛覺反應(yīng)時(shí)間，為防止足部燙傷，若痛閾值超過60s，即停止測(cè)試而按60s計(jì)。
　　 3采用小鼠耳腫脹法，通過比較各組小鼠耳腫脹率來反映芍根方中魚腥草絡(luò)石藤及乳香公英兩藥對(duì)的抗炎消腫作用及組間差異;采用熱板致痛法，通過小鼠痛閾值提高程度來反映芍根方中乳香山豆根及乳香公英兩藥對(duì)的鎮(zhèn)痛作用及組間差異（兩種方法操作同2中所述）;采用小鼠扭體法，通過觀察不同組別小鼠扭體次數(shù)來反映芍根方中所選藥對(duì)的鎮(zhèn)痛

6、作用及組間差異，并計(jì)算各組疼痛抑制率;分別運(yùn)用化學(xué)比色法及TBA比色法檢測(cè)小鼠扭體實(shí)驗(yàn)中各組血清NO與MDA含量，探求芍根方復(fù)方及所選藥對(duì)的鎮(zhèn)痛機(jī)制。
　　 小鼠扭體法:將80只昆明小鼠（雌雄各半），按性別、體重隨機(jī)分為8組，每組10只。A組:芍根方復(fù)方組;B組:乳山低濃度組;C組:乳山中濃度組;D組:乳山高濃度組;E組:乳三低濃度組;F組:乳三中濃度組;G組:乳三高濃度組;H組:空白對(duì)照組。各組分別每日給藥一次，每次給藥體積均

7、為0.2ml/10g，連續(xù)給藥7天（空白對(duì)照組給予蒸餾水等體積）。末次給藥1h后，腹腔注射0.6％冰醋酸0.1ml/10g，觀察注射致痛劑后20min內(nèi)各組小鼠扭體次數(shù)（伸展后肢、腹部?jī)?nèi)凹或臀部抬高），并做詳細(xì)記錄，以公式:（空白對(duì)照組扭體次數(shù)-各給藥組扭體次數(shù)）/空白對(duì)照組扭體次數(shù)，計(jì)算各組疼痛抑制率。
　　 4運(yùn)用中醫(yī)藥理論分析急性放射性食管炎中醫(yī)病機(jī)治法，探求芍根方相關(guān)藥對(duì)配伍依據(jù)。
　　 結(jié)果:
　　 1

8、急性毒性試驗(yàn)小鼠未出現(xiàn)明顯毒性反應(yīng)，與對(duì)照組比較，體重變化差異不顯著（P＞0.05），最大給藥量為460g/(kg·d)，相當(dāng)于60kg體重成人臨床推薦劑量的180倍。
　　 2芍根方水煎劑與顆粒劑對(duì)小鼠耳腫脹均有抑制作用，并均可提高熱板致小鼠疼痛閾值（P＜0.05），同等濃度組間無差異(P＞0.05);兩種劑型不同濃度之間，高濃度作用優(yōu)于中、低濃度（P＜0.05）;抗炎消腫方面，陽(yáng)性對(duì)照組與兩種劑型高濃度比較，無顯著差異（P＞

9、0.05），鎮(zhèn)痛方面，兩種劑型高濃度組優(yōu)于陽(yáng)性對(duì)照組（P＜0.05）。
　　 3所選兩組藥對(duì)中、高濃度組對(duì)小鼠耳腫脹有明顯抑制作用（P＜0.05），且魚腥草絡(luò)石藤組優(yōu)于乳香公英組(P＜0.05)，芍根方復(fù)方對(duì)小鼠耳腫脹抑制作用最強(qiáng);另兩組藥對(duì)中、高濃度組均可提高熱板致小鼠疼痛閾值(P＜0.05)，且乳香山豆根組優(yōu)于乳香三七組（P＜0.05），芍根方復(fù)方提高小鼠痛閾值作用最強(qiáng);芍根方復(fù)方組，乳山中、高濃度組，乳三高濃度組均能使疼痛

10、模型小鼠扭體次數(shù)明顯減少（P＜0.05），其中復(fù)方組與乳山高濃度組，小鼠扭體次數(shù)減少更為明顯（P＜0.01），二者相比，復(fù)方組作用更加明顯（P＜0.05），同等濃度組間，乳山中、高濃度組疼痛抑制效果優(yōu)于乳三中、高濃度組(P＜0.05);復(fù)方組與乳山高濃度組小鼠扭體實(shí)驗(yàn)血清中NO含量與MDA含量明顯降低(P＜0.05)，二者相比，復(fù)方組作用更為顯著（P＜0.05）。其余各組在數(shù)值上亦存在降低趨勢(shì)，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）。同等濃度組

11、間，乳山高濃度組與乳三高濃度組相比，前者小鼠血清中NO含量與MDA含量降低更為明顯(P＜0.05)。
　　 4放射性食管炎急性期中醫(yī)病機(jī)特點(diǎn)為“熱毒壅盛，瘀腫并重”，針對(duì)食管粘膜充血水腫的客觀之征，提出當(dāng)以解決“毒”“瘀”為重，而患者疼痛甚至吞咽困難的主觀之象，則當(dāng)以緩解“痛”“腫”為要。本研究所選藥對(duì)中，魚腥草絡(luò)石藤及乳香公英解毒祛瘀，乳香分別與山豆根、三七相配，消腫止痛，既符合“七情和合”的配伍原則，亦融入“中醫(yī)病機(jī)為據(jù)、中

12、西結(jié)合”的“多元化”配伍思想。
　　 結(jié)論:
　　 1芍根方的臨床劑量服用安全。
　　 2芍根方水煎劑與顆粒劑型在抗炎消腫、鎮(zhèn)痛作用方面無明顯差異;與云南白藥相比，芍根方高濃度組作用顯著。
　　 3芍根方所選取四組藥對(duì)中，魚腥草絡(luò)石藤組與乳香公英組均有不同程度的抗炎消腫作用，但魚絡(luò)組優(yōu)于乳公組;乳香山豆根組與乳香三七組均有不同程度的鎮(zhèn)痛作用，但乳山組優(yōu)于乳三組;四組藥對(duì)所觀察的相應(yīng)的藥理學(xué)作用與復(fù)方相比，