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文檔簡介
1、目的:CyclinD1蛋白是重要的細胞周期調(diào)節(jié)蛋白,在G1/S轉(zhuǎn)換處發(fā)揮重要的作用,它的編碼基因CCND1在轉(zhuǎn)錄水平可以產(chǎn)生長短兩種轉(zhuǎn)錄本,CCND1基因這種轉(zhuǎn)錄變異對腫瘤發(fā)生發(fā)展的生物學(xué)作用以及兩種轉(zhuǎn)錄本的拷貝數(shù)異常是否與cyclinD1蛋白的異常表達相關(guān)目前還不是很清楚。為此本實驗研究了CCND1基因長短兩種轉(zhuǎn)錄本及其蛋白產(chǎn)物cyclinD1在宮頸癌組織中的表達情況,并分析了兩種轉(zhuǎn)錄本之間拷貝數(shù)的異常是否與cyclinD1蛋白的異常
2、表達相關(guān)。
實驗材料與方法:
一、實驗資料病例組標本來自于中國醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院婦產(chǎn)科2009年1月至2009年10月間宮頸活檢、全子宮切除術(shù)或?qū)m頸癌根治性手術(shù)的35例宮頸癌患者,同時收集30例因子宮肌瘤行全子宮切除術(shù)并經(jīng)病理證實無宮頸病變的正常宮頸組織作為對照組,并從存檔的宮頸標本蠟塊中選取相對應(yīng)的石蠟標本。
二、實驗方法
采用實時定量PCR檢測35例宮頸癌組織和30例正常宮頸
3、組織中CCND1基因兩種轉(zhuǎn)錄本mRNA的表達同時應(yīng)用免疫組化技術(shù)(SP)檢測cyclinD1蛋白在兩種組織中的表達。
三、統(tǒng)計學(xué)分析采用SPSS16.0軟件進行統(tǒng)計學(xué)分析,兩獨立樣本Mann-Whitney U檢驗分析CCND1基因長短轉(zhuǎn)錄本在宮頸癌與正常組織中表達水平的差異,獨立樣本t檢驗分析不同分化程度的富頸癌組織的平均光密度值,實驗數(shù)據(jù)用(?)±s表示,P<0.05有統(tǒng)計學(xué)意義。
實驗結(jié)果:
4、 一、宮頸癌組織與正常宮頸組織中長短轉(zhuǎn)錄本轉(zhuǎn)錄的相對差異CCND1基因長、短轉(zhuǎn)錄本在宮頸癌組織中的表達均較在正常宮頸組織中降低,其中短轉(zhuǎn)錄本降低更加明顯。
二、宮頸癌組織中,不同分化程度組織間長短轉(zhuǎn)錄本表達的相對差異在不同分化程度的宮頸癌組織間,短轉(zhuǎn)錄本在低分化組織中較高、中分化組明顯下降,而長轉(zhuǎn)錄本在低分化組中轉(zhuǎn)錄量高于高、中分化組,但無統(tǒng)計學(xué)意義。
三、宮頸癌組織與正常宮頸組織中cyclinD1蛋白表達
5、的相對差異在宮頸癌組cyclinD1蛋白在細胞核和細胞漿中均有所表達但以細胞核表達為主,陽性表達率為57.14%;正常宮頸組織中一般無cyclinD1蛋白的表達或僅有個別在基底層細胞中呈現(xiàn)陽性表達,表達率13.33%;cyclinD1蛋白在宮頸癌組的陽性表達率高于正常宮頸組。
四、宮頸癌組織中,不同分化程度組織間cyclinD1蛋白表達的相對差異宮頸癌組織中,高、中分化組的平均光密度值為0.16,高于低分化組的平均光密度值
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