微米中藥功能襯材對家兔骨折愈合的影響.pdf

1、[背景]
　　 骨折是臨床上的常見病多發(fā)病,骨折愈合是一個極其復雜的骨組織再生修復過程,受到全身和局部許多因素的影響和調節(jié)。約5％～10％的骨折由于各種因為發(fā)生延遲愈合或不愈合,嚴重影響人們的生存質量。如何加速骨折愈合,提高愈合質量一直是醫(yī)學界共同關注的重大課題之一。
　　 中藥外治法是指運用非口服藥物刺激經絡、穴位、皮膚、粘膜、肌肉、筋骨等以達到防病治病目的的一種傳統(tǒng)醫(yī)學療法。中藥外治法治療骨折,歷史悠久,療效顯著。目

2、前已被研究證實的作用機制主要有如下幾方面:改善血液循環(huán)；促進血腫的吸收和機化；增加膠原的合成；促進鈣鹽沉積；增加細胞數(shù)量、促進細胞活性；調節(jié)內分泌系統(tǒng)；促進骨痂生成,提高骨痂質量；干預骨形成調節(jié)因子的作用；提高微量元素的含量等。
　　 伴隨著科技的發(fā)展,皮膚給藥已成為第三大給藥途徑,中醫(yī)在這個領域可謂獨具特色,中藥外治的優(yōu)勢在于；藥物的作用力直接、集中,能直達病所,使其病變局部內的藥物濃度顯著高于血藥濃度,故發(fā)揮作用充分,奏效迅

3、捷。且所用藥量和副反應遠小于內服藥。將傳統(tǒng)中醫(yī)外治與現(xiàn)代透皮技術結合,形成中藥透皮治療系統(tǒng)必將是今后中藥外治研究的發(fā)展趨勢。
　　 目前中藥外治骨折的劑型主要有中藥加工制成的膏劑、酊劑和現(xiàn)代氣壓罐裝的噴霧劑等,文獻已有報道,但均各自有其不足和局限性。如何選用有效的方藥和采用科學合理的劑型治療骨折,是中醫(yī)藥現(xiàn)代化發(fā)展的趨勢。本課題運用目前中藥現(xiàn)代化最前沿的創(chuàng)新成果-微納米中藥技術,將中藥驗方微米化并與紡織工業(yè)重整技術結合,制作成一

4、種新型醫(yī)用材料-微米中藥功能襯材。目的是把復位、固定和局部用藥有機地結合起來,除了作為石膏繃帶或小夾板固定時的內層襯墊使用外,還具有消炎鎮(zhèn)痛,減輕創(chuàng)傷反應,加快組織的修復,加速骨折愈合及功能恢復的作用。
　　 微米中藥是指采用現(xiàn)代高科技與傳統(tǒng)炮制技術和制劑技術相結合而研制的能保持傳統(tǒng)中藥固有藥效學物質基礎的粒度為微米級(平均直徑≤15 μm)的新型中藥。它是中藥微米化后的產物,不是一種新的藥種。微米中藥可大幅度提高藥物的活性和生

5、物利用度,降低用藥量,減少毒副作用,與中藥現(xiàn)代化的核心“安全、有效、可控、穩(wěn)定”息息相關。利用超微粉碎技術制備的中藥微米顆粒,既能保持中藥的有效成分不被破壞,同時由于制得的顆粒比表面積增大,能有效增進藥物有效成分的溶出,提高藥物的生物利用度；其次它可以提高藥物的靶向性,有助于控制藥物在體內的分布等；本研究產品-微米中藥功能襯材,既便于給藥劑量的標準化、規(guī)范化,同時又便于制劑生產工藝、質量控制的標準化、規(guī)范化。這種新型的醫(yī)用功能復合材料可

6、作為石膏繃帶或小夾板固定時的內層襯材使用,使骨折在外固定的基礎上,與局部用藥有機結合,將有效地促進骨折愈合及功能的恢復。本實驗將從血清生化指標、血液流變學指標、X線及組織形態(tài)學四個方面探討微米中藥功能襯材對家兔骨折愈合的影響。
　　 [目的]
　　 研究微米中藥功能襯材對家兔骨折愈合的影響,為其臨床應用和成果轉化提供依據(jù)。
　　 [方法]
　　 1.實驗分組和模型制作:24只普通級雄性新西蘭兔隨機分為4組

7、:微米組、中藥對照組、襯材對照組和模型對照組,每組6只。參照柴本甫造模方法,將全部家兔造成右側橈骨中段骨缺損骨折模型。
　　 2.襯材制作:利用高能球磨法制備微米三七粉,加入冰片等其它藥物,結合紡織工業(yè)的重整技術制作出微米中藥功能襯材。
　　 3.處理方式:所有家兔均造模成功,微米組給予外敷微米中藥功能襯材后加石膏外固定,中藥對照組給予外敷普通中藥功能襯材后加石膏外固定,襯材對照組給予外敷普通襯材(無中藥)后加石膏外固定

8、,模型對照組不予任何治療。每周換1 次襯材,連續(xù)觀察6周。
　　 4.指標檢測方式:三七粉微米化前后在掃描電鏡下行粒徑對比；于造模前和造模后第 2,4,6 周行血清堿性磷酸酶活性,血鈣、血磷濃度及血液流變學指標(全血高切、中切、低切粘度及血漿粘度)的檢測；造模后第2,4,6周各組X射線下觀察骨折愈合情況,并行外骨痂和骨痂線模糊程度評分；造模后第 6 周末將所有家兔處死,以骨折斷端為中心0.5cm 為取樣部位,行脫鈣固定、脫水及石

9、蠟包埋后,連續(xù)切片,行蘇木精-伊紅染色(HE 染色),光學顯微鏡下觀察骨折區(qū)修復情況。
　　 [統(tǒng)計學方法]
　　 實驗數(shù)據(jù)計量資料以均數(shù)±標準差(x±s)表示。采用 SPSS13.0 軟件進行統(tǒng)計分析。多組間計量資料比較使用單因素方差分析(one-way ANOVA 方法),組內不同時間點的血清堿性磷酸酶活性、血鈣、血磷濃度、血液流變學指標(全血高切、中切、低切粘度及血漿粘度)及外骨痂和骨痂線模糊程度評分比較采用重復測

10、量的方差分析。檢驗標準 α定為0.05。
　　 [結果]
　　 1.血清生化指標檢測:結果顯示組間家兔的血清堿性磷酸酶活性、血鈣含量、血磷含量在骨折愈合過程的不同時間點中均存在顯著差異(F 值分別為3.147,3.427和6.452,P 值分別為0.048,0.037和0.003),造模后第2周微米組血清堿性磷酸酶活性值達到高峰,和模型對照組、中藥對照組比較均存在顯著差異(P值分別為 0.001,0.000)；微米組血鈣

11、含量和模型對照組、中藥對照組比較均存在顯著差異(P 值分別為0.001,0.002)；4組動物血磷值均有所降低,微米組血磷含量和模型對照組比較存在顯著差異(P=0.042)。造模后第4周各組血鈣含量開始下降,其中微米組下降較多,和模型對照組、中藥對照組比較均存在顯著差異(P 值均為 0.000)；血磷值開始升高,其中微米組尤為明顯,微米組和模型對照組、中藥對照組比較均存在顯著差異(P 值分別為0.002,0.048)。造模后第6周微米組

12、血清堿性磷酸酶活性及血鈣含量均降至正常值附近,微米組血清堿性磷酸酶活性及血鈣含量和模型對照組、中藥對照組比較均存在顯著差異(P<0.05)；4組動物血磷均持續(xù)在較高水平,微米組和模型對照組、中藥對照組比較存在顯著差異(P 值分別為 0.000,0.014)。同一時間點襯材對照組所有血清生化指標和模型對照組比較均無顯著差異(P>0.05)。
　　 2.血液流變學指標檢測:微米組幾乎所有指標均低于對照組,第2周時微米組全血低切粘度、

13、全血高切粘度及血漿粘度和模型對照組相比存在顯著差異(P 值分別為 0.000,0.017,0.000)；第4周時微米組四個指標和模型對照組相比存在顯著差異(P =0.000),微米組全血低切粘度、血漿粘度與中藥對照組比較存在顯著差異(P 值分別為 0.000,0.001)；第6周時微米組四個指標和模型對照組相比存在顯著差異(P =0.000),微米組全血低切粘度、血漿粘度與中藥對照組比較存在顯著差異(P 值分別為 0.001,0.036

14、)。
　　 3.X 射線檢查及外骨痂和骨折線模糊程度評分:造模后第6周顯示微米組外骨痂接近完全吸收,骨折處皮質骨密度接近正常皮質骨,骨髓腔完全再通；中藥對照組骨折線消失,外骨痂開始吸收,骨髓腔仍未通；模型對照組中有出現(xiàn)斷端硬化不愈合現(xiàn)象。外骨痂和骨折線模糊程度評分結果顯示造模后第 2 周時襯材對照組和模型對照組比較無顯著差異(P=0.819),微米組和模型對照組比較存在顯著差異(P=0.001)；造模后第4周時襯材對照組和模型對

15、照組比較無顯著差異(P=0.778),微米組和模型對照組比較存在顯著差異(P=0.000),微米組與中藥對照組比較存在顯著差異(P=0.010)；造模后第6周時襯材對照組和模型對照組比較無顯著差異(P=0.293),微米組和模型對照組、中藥對照組比較均存在顯著差異(P 值分別為 0.000,0.027)。
　　 4.組織形態(tài)學:造模后第6周時,微米組骨折端小梁間血管擴張,數(shù)目較多,軟骨內成骨完成,可見大量成骨細胞,編織骨開始塑形