三參方對慢性萎縮性胃炎大鼠的治療作用及其機(jī)制研究.pdf

1、目的：三參方（由黨參、丹參、玄參、黃連、清半夏、炒白芍、炙甘草、陳皮、炒白術(shù)組成）具有益氣養(yǎng)陰，健脾和胃，柔肝理氣的功效，為臨床觀察篩選的效方，對慢性萎縮性胃炎(CAG)具有較好的治療效果。為了進(jìn)一步探討其作用機(jī)制，參考相關(guān)文獻(xiàn)采用脫氧膽酸鈉和熱鹽水交替灌胃、并結(jié)合饑飽失常的方法復(fù)制CAG大鼠模型，并施加藥物干預(yù)，觀察了其對CAG大鼠胃泌素、胃動(dòng)素、超氧化物歧化酶、丙二醛、內(nèi)皮素-1、6-酮-前列腺素F1α含量的變化；運(yùn)用免疫組織化學(xué)方

2、法觀察了大鼠表皮生長因子表達(dá)的變化；并運(yùn)用HE染色方法觀察了胃組織形態(tài)學(xué)的變化。
　　 方法：選用Wistar大鼠60只，體重180～200g，雄性。大鼠自由飲水進(jìn)食，飼養(yǎng)于18℃～22℃明暗各12小時(shí)的清潔級(jí)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室內(nèi)，正常喂養(yǎng)一周后，隨機(jī)分為6組，每組10只。具體分組情況如下：(1)正常對照組（簡稱正常組）；(2)模型對照組（簡稱模型組）；(3)三九胃泰對照組（簡稱三九胃泰組）；(4)維霉素對照組（簡稱維霉素組）；(5)三

3、參飲低劑量組（簡稱低劑量組）；(6)三參飲高劑量組（簡稱高劑量組）。除正常組外，其余各組參考相關(guān)文獻(xiàn)，以0.2％的脫氧膽酸鈉溶液灌胃，1.5ml/只/d，與脫氧膽酸鈉溶液灌胃間隔5h，用50℃熱水2ml/只/d灌胃，并且加用饑飽失常（即2d喂食，保證足量，1d停食），持續(xù)造模共8周。正常組大鼠則每天灌服等量的蒸餾水，普通飼料喂養(yǎng)，自由飲水。從實(shí)驗(yàn)第9周開始，正常組和模型組大鼠均灌服等量的蒸餾水；其余各組大鼠分別給予相應(yīng)的藥物灌胃，給藥劑

4、量按藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)計(jì)算，三參飲高、低劑量組分別按3.67g/kg、1.83g/kg體重的標(biāo)準(zhǔn)灌服，兩個(gè)對照組均按1g/kg給藥。各組大鼠均1次/d，每次用藥體積均按1ml/100g計(jì)算。實(shí)驗(yàn)13周末，于最后1次給藥禁食12h后麻醉狀態(tài)下股動(dòng)脈取血，分離血漿或血清，檢測GAS、MTL、SOD、MDA、ET、6-Keto-PGF1α含量的變化。同時(shí)迅速剖開腹部，分離胃組織，沿胃竇近幽門口至胃大彎方向取1cm×0.5cm大小的組織塊，將組織塊

5、用預(yù)冷的0.9％Nacl注射液沖洗，濾紙吸濕后，用4％的多聚甲醛固定，常規(guī)制作組織切片，運(yùn)用免疫組化法觀察了胃組織EGF表達(dá)的變化，運(yùn)用HE染色法觀察了胃組織形態(tài)學(xué)變化。
　　 所有數(shù)據(jù)均采用SPSS13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
　　 結(jié)果：
　　 1.三參方對CAG大鼠血清GAS和血漿MTL含量的影響模型組大鼠的血清GAS和血漿MTL的含量較正常組明顯下降(P＜0.01)。經(jīng)藥物治療后，各治療組與模型組比較，GA

6、S和MTL的含量明顯升高（P＜0.01或P＜0.05）；其中，高劑量組GAS和MTL的含量高于低劑量組、維霉素組和三九胃泰組(P＜0.05)；而低劑量組、維霉素組和三九胃泰組之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 2.三參方對CAG大鼠胃組織形態(tài)學(xué)的影響正常組大鼠胃黏膜厚度正常，上皮完整，腺體排列整齊，固有腺體及黏膜層毛細(xì)血管無擴(kuò)張，未見炎癥反應(yīng)。細(xì)胞呈單層柱狀，腺上皮和腺管分界清楚。模型組大鼠上皮細(xì)胞變性、壞死、脫落，腺體有

7、不同程度的萎縮，黏膜下小血管清晰可見，間質(zhì)內(nèi)有大量炎性細(xì)胞浸潤。各治療組大鼠胃黏膜均有不同程度的改善，三九胃泰治療組上皮細(xì)胞部分變性、脫落，腺體排列比模型組整齊，有少量炎性細(xì)胞浸潤。維霉素治療組胃黏膜有少量炎性細(xì)胞浸潤，腺體排列較整齊。低劑量組腺體排列較整齊，紊亂程度變化較模型組輕。高劑量組胃黏膜結(jié)構(gòu)較清晰，上皮排列整齊，細(xì)胞無明顯變性壞死，腺體大小形態(tài)較一致，基本接近正常組。
　　 3.三參方對CAG大鼠血清SOD和MDA含量

8、的影響模型組大鼠SOD的活性較正常組明顯減弱(P＜0.01)，MDA的含量較正常組明顯升高(P＜0.01)。經(jīng)藥物治療后，各用藥組與模型組比較，均能增強(qiáng)SOD的活性(P＜0.01)，降低MDA的含量；高劑量組SOD的活性高于其他治療組、MDA的含量低于其他治療組（P＜0.01或P＜0.05）：在增強(qiáng)SOD的活性方面，其他治療組之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)；而在降低MDA的含量方面，三九胃泰組與低劑量組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)

9、。
　　 4.三參方對CAG大鼠血漿ET-1和6-Keto-PGF1α含量的影響模型組大鼠ET-1的含量高于正常組、6-Keto-PGF1a的含量明顯低于正常組(P＜0.01)。經(jīng)藥物治療后，各用藥組ET-1的含量均低于模型組，6-Keto-PGF1a的含量均高于模型組(P＜0.01或(P＜0.05)；高、低劑量組ET-1的含量低于于三九胃泰組和維霉素組(P＜0.05)；高劑量組6-Keto-PGF1a的含量高于三九胃泰組和維霉

10、素組(P＜0.01或P＜0.05)，低劑量組與三九胃泰組和維霉素組之間比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。而高、低劑量組之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 5.三參方對CAG大鼠EGF表達(dá)的影響模型組大鼠胃組織EGF表達(dá)（0.363±0.035）較正常組（0.181±0.043）增強(qiáng)(P＜0.01)。經(jīng)藥物干預(yù)后，各用藥組大鼠EGF表達(dá)減弱(P＜0.01或P＜0.05)。其中，高劑量組(0.208±0.042)在減弱EGF表

11、達(dá)方面優(yōu)于其他治療組(P＜0.01)，低劑量組（0.268±0.050）和維霉素組（0.278±0.045）在減弱EGF表達(dá)方面優(yōu)于三九胃泰組（0.321±0.017）（P＜0.01或P＜0.05），而低劑量組與維霉素組在減弱EGF表達(dá)方面比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 1.三參方能夠促進(jìn)血中GAS和MTL的分泌，改善胃的分泌和運(yùn)動(dòng)功能，以達(dá)到治療CAG的目的。
　　 2.三參方能明顯改善