氡及其子體對(duì)大鼠靶器官的損傷效應(yīng)及氡防護(hù)劑防護(hù)效果的研究.pdf

1、目的：
　　 研究高氡暴露對(duì)大鼠肺、外周血細(xì)胞的影響并探討其機(jī)制，在此基礎(chǔ)上篩選氡對(duì)機(jī)體危害的早期分子標(biāo)志物，并觀察自主研制的中藥復(fù)方制劑一氡防護(hù)劑對(duì)染氡大鼠損傷的防護(hù)效果。
　　 方法：
　　 (1)染氡大鼠模型的建立：將30只雄性SD大鼠，隨機(jī)分為5組，分別為：對(duì)照組、60工作水平月(working level month，WLM)組、90WLM組、120WLM組、氡防護(hù)劑組，每組6只。除對(duì)照組外，其各組整體

2、暴露于多功能生態(tài)氡室；其中，氡防護(hù)劑組于每次染氡前灌服氡防護(hù)劑3ml/只，累積氡暴露劑量為120WLM，對(duì)照組大鼠置于動(dòng)物房正下常環(huán)境中飼養(yǎng)，除環(huán)境本底氡濃度小于80Bq/m3外，其它條件與氡暴露組大鼠相同。
　　 (2)肺組織病理學(xué)觀察：達(dá)到氡暴露劑量后，麻醉大鼠，快速取出氣管及肺組織，觀察大體結(jié)構(gòu)，用福爾馬林中性液固定，病理學(xué)常規(guī)取材、脫水、浸蠟、包埋、切片、HE染色，封片后顯微鏡下觀察肺組織病理學(xué)形態(tài)。
　　 (3

3、)以黃嘌呤氧化酶一羥胺法測(cè)定各組大鼠肺組織中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)活性，硫代巴比妥酸法(thiobarbituric acid，TBA)測(cè)定丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量變化。
　　 (4)采用五分類血液分析儀檢測(cè)外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)及分類變化。
　　 (5)采用酶聯(lián)免疫吸附（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）技術(shù)

4、定量測(cè)定大鼠血清腫瘤標(biāo)志物癌胚抗原（carcino-embryonic antigen，CEA）、神經(jīng)元特異性烯醇化酶(neuron specific enolase，NSE)、細(xì)胞角蛋白片段21-1(cytokeratin 19 Fragment，CYFRA21-1)及p53抗體（p53 antibody）水平變化。
　　 (6)采用SASV8進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差((x)±s)表示，組間差異進(jìn)行方差分析，P＜0.0

5、5為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)果：
　　 (1)肺組織形態(tài)學(xué)觀察：各種劑量氡暴露大鼠肺組織主要病理變化為：肺間質(zhì)充血、水腫、有急性或慢性炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)、肺泡間隔斷裂、融合、數(shù)個(gè)肺泡融合成肺大泡，上述病理變化程度隨氡累積暴露劑量的增加而加重，120WLM組大鼠肺泡毛細(xì)血管血栓的發(fā)生率顯著高于其它組；而120WLM-氡防護(hù)劑組較120WLM組大鼠肺病理學(xué)損傷明顯減輕，肺部結(jié)構(gòu)尚完整；各組大鼠均未見細(xì)胞異型性變、癌前病變及腫瘤

6、發(fā)生。
　　 (2)氧化損傷效應(yīng)：隨著染氡劑量的增加，大鼠肺組織中MDA含量顯著升高(P＜0.05)，SOD活性顯著降低(P＜0.05)：且各劑量組間均有顯著性差異(P＜0.05)。氡防護(hù)劑組與同劑量染氡組相比，MDA含量顯著降低(P＜0.05)，SOD活性顯著上升(P＜0.05)。
　　 (3)外周血中白細(xì)胞計(jì)數(shù)及分類變化：與對(duì)照組相比，隨著大鼠染氡劑量的增加，白細(xì)胞總數(shù)有增加趨勢(shì)，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），粒細(xì)

7、胞比例顯著增加(P＜0.05)，淋巴細(xì)胞比例顯著降低(P＜0.05)：氡防護(hù)劑組較同劑量染氡組白細(xì)胞總數(shù)和粒細(xì)胞數(shù)均顯著降低(P＜0.05)，淋巴細(xì)胞數(shù)有增加趨勢(shì)，但無(wú)顯著差異(P＞0.05)。
　　 (4)腫瘤標(biāo)志物及p53抗體水平變化：與對(duì)照組相比，隨著染氡劑量的增加，大鼠血清CEA、NSE、CYFRA21-1及p53抗體濃度均顯著增加（P＜0.05），氡防護(hù)劑組較同劑量染氡組CEA、NSE、CYFRA21-1及p53抗體濃

8、度均顯著降低(P＜0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 (1)氡暴露大鼠可出現(xiàn)肺間質(zhì)充血、水腫、炎性細(xì)胞浸潤(rùn)、肺泡問隔斷裂、肺大泡形成、肺泡毛細(xì)血管血栓形成等病理學(xué)改變，且病變程度隨染氡劑量的增加而加重，其發(fā)生機(jī)制之一可能與肺組織中MDA含量升高、SOD活性降低引起的肺組織氧化損傷有關(guān)。
　　 (2)氡暴露大鼠外周血粒細(xì)胞比例增加，淋巴細(xì)胞比例降低，且與氡暴露劑量相關(guān)，粒細(xì)胞/淋巴細(xì)胞比值可作為氡累積暴露劑量初步估算